摘要：建立基于TaqMan探针双重重实时荧光PCR检测肠道沙门氏菌(Salmonella enterica,SP)和肠炎沙门氏菌(Salmonella Enteritidis,SE)的方法。根据SP的aceA基因(Gen Bank:U43344.1)、肠炎沙门氏菌特异序列SEP(GenBank:AF370707.1),分别设计引物和探针,在ace A探针的5′端标记FAM和SEP探针的5′端标记VIC,建立基于TaqMan探针双重荧光PCR检测方法。试验结果,58株29种不同血清型肠道沙门氏菌均扩增出ace A基因扩增曲线,SEP特异性地扩增出15株SE,而28种不同血清型沙门氏菌和17株变形杆菌等阴性对照株扩增结果均为阴性。ace A和SEP的双重荧光PCR扩增效率分别为100%和104%,R2分别为0.999和0.998,最低检测浓度分别达到280 cfu/m L和260 cfu/m L。建立的方法特异性好、灵敏度高,整个试验可在31 h完成,是快速检测SP和SE的有效方法,可用于食品中SP和SE的特异性检测。

摘要：目的建立基于Taq Man探针四重荧光PCR检测甲型、乙型、丙型副伤寒和伤寒沙门菌的方法。方法根据甲型副伤寒沙门菌(Salmonella paratyphi A,SPA)、乙型副伤寒沙门菌(Salmonella paratyphi B,SPB)、丙型副伤寒沙门菌(Salmonella paratyphi C,SPC)和伤寒沙门菌(Salmonella typhi,ST)的特异序列分别设计引物SPAP、SPBP、SPCP和STP,在探针的5'端分别标记TET、ROX、FAM、HEX,建立基于Taq Man探针四重荧光PCR检测方法。结果 SPAP、SPBP、SPCP和STP分别扩增出5株SPA、4株SPB、7株SPC和11株ST,而其他血清型沙门菌和17株非沙门菌扩增结果阴性。SPAP、SPBP、SPCP和STP扩增效率分别为84.5%、101.8%、92.4%和90.9%,线性相关系数(R^2)分别为0.996、0.975、0.996和0.984。结论建立的方法特异性高、敏感性强,可用于SPA、SPB、SPC和ST的特异性检测。

摘要：结合珠岛小桥改造工程项目,对清水混凝土的配合比、模板处理方式、振捣方式、养护等方面进行了试验研究。试验结果表明,粉煤灰掺量较小时,混凝土工作性能好,强度合格,外观色泽均匀;通过与BT-20对比发现,贴透水模板布的混凝土试块颜色均匀,表面无气泡;在振捣间距为14 cm、振捣时间为15 s时,外观质量好。利用清水混凝土技术,珠岛一桥清水混凝土外观质量达标,强度满足设计要求。

摘要：目的建立结合PCR-焦磷酸测序检测单核细胞增生李斯特氏菌的方法。方法根据单核细胞增生李斯特氏菌的hly基因设计扩增引物和测序引物,特异地扩增目的片段,再制备单链模板,在测序引物引导下进行焦磷酸测序,通过测序结果与GenBank中的hly基因序列的比对进行鉴定。结果扩增引物和测序引物表现出良好的特异性,16株单核细胞增生李斯特氏菌菌株均扩增出大小249 bp的DNA片段,焦磷酸测序结果与hly基因序列100%匹配,而阴性对照菌株均未扩增出DNA条带,焦磷酸测序结果为阴性。结论建立的方法特异性高,是快速从DNA序列水平上检测单核细胞增生李斯特氏菌的有效手段。

摘要：目的探讨用实时荧光PCR对沙门菌进行种间鉴别。方法根据猪霍乱沙门菌(Salmonella Choleraesuis,SC)和丙型副伤寒沙门菌(Salmonella paratyphi C,SP)的共有序列(Gen Bank:AE017220.1),伤寒沙门菌(Salmonella Typhi,ST;Gen Bank:NC_016832.1)和鸡伤寒沙门菌(Salmonella Gallinarum,SG;Gen Bank:HQ703462)的特异序列分别设计SCP、STP、SGP引物和Taq Man探针,在探针的5'端分别标记FAM、HEX、TET,建立基于Taq Man探针多重荧光PCR检测方法。同时,根据SC和SP差异序列(Gen Bank:CP000857)设计SPP引物和探针,在探针的5'端标记ROX,区分SC和SP。结果 SCP特异性扩增出25株SC和22株SP,STP和SGP分别扩增出31株ST和34株SG,而其他不同血清型沙门菌和非沙门菌扩增结果阴性。SPP扩增出22株SP,25株SC扩增结果阴性。扩增体系评价结果,SCP、STP、SGP和SPP扩增效率均在80%~100%,线性相关系数r2≥0.994。结论建立的方法特异性强、敏感性高,可用于SC、SP、ST、SG的种间鉴别。

摘要：[目的]研究从DNA碱基序列水平检测金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)的方法。[方法]根据金黄色葡萄球菌凝固酶基因设计扩增引物和测序引物,先用PCR特异性地扩增目的片段,再制备单链模板,在测序引物引导下用焦磷酸测序法检测DNA碱基序列,检测的DNA碱基序列为GCCTGTGGGTACT-TCTCCTGCCAGTATAAT,则判断为金黄色葡萄球菌。[结果]20株金黄色葡萄球菌均扩增出大小215bp的DNA片段,而其他对照菌株未扩增出DNA条带。焦磷酸测序结果,20株金黄色葡萄球菌均测出与预期相符的DNA碱基序列,而其他对照菌株未测出DNA碱基序列。[结论]建立的方法特异性高,整个试验可在21-27h完成,是快速检测金黄色葡萄球菌的有效手段,可用于食品中金黄色葡萄球菌的检测。

摘要：针对中面层常用混合料级配,提出使用硬质沥青,SBS改性沥青,高强改性沥青,添加水泥等中面层混合料设计方案.选取抗压模量、抗剪强度和动稳定度作为高温性能评价指标,结合沥青路面温度场,研究混合料在全温域范围内的高温性质.研究结果表明,不同混合料在全温域范围内,力学性质递变规律存在差异,各项高温性能参数存在一定相关性.

摘要：粉煤灰置换部分水泥能降低新拌混凝土中的绝热温升,而水胶比亦显著影响着绝热温升值,但目前的经验公式均无考虑水胶比的影响。为探讨并量化水胶比影响,设计混凝土绝热温升测量装置,通过热补偿法实验测量了21组配比的粉煤灰混凝土的绝热温升。结果揭示了混凝土绝热温升、单位胶凝材料平均绝热温升分别在0.3、0.4左右达到峰值。在高水胶比下,掺入粉煤灰降低绝热温升的效果较显著。通过调低水胶比补偿掺入粉煤灰带来的强度损失,能在同样强度下实现绝热温升的降低。最后通过实验结果回归分析,推导出精度满足工程应用需要的粉煤灰混凝土绝热温升经验公式。

摘要：以广东省国土资源档案云平台建设为研究基础,分析云计算技术典型三层级理论,提出省级国土资源档案云平台的构建思路。在三层级理论的指导下,详细介绍基于虚拟化技术构建的基础架构云、网络化应用系统宿主环境的平台云实现方法和网络化业务应用的应用云的搭建方法,为我国省级国土资源档案信息化建设提供全新的思路和方法。

摘要：对深圳市过境与疏港货运交通特性进行研究,分析了空间需求分布和交通流向分布,识别过境与疏港货运交通走廊,对存在的问题进行诊断及成因剖析。研究成果将为深圳市过境、疏港货运交通组织提供基础资料,对其他城市的货运交通规划和组织也有借鉴作用。