摘要：探讨重组人生长激素(recombinant human growth hormone,rhGH)联合化疗药物阿霉素(adriamycin,ADM)对体外培养的Bel-7402肝癌细胞的影响。该实验设计分组为对照组、不同浓度rhGH组、不同浓度rhGH+阿霉素(ADM)组及ADM组,共8组,运用体外细胞培养技术、四甲基偶氮唑蓝比色(methyl thiazolyl terazolium,MTT)和流式细胞技术等研究方法,检测不同浓度的rhGH及不同浓度rhGH+ADM对体外培养的Bel-7402肝癌细胞的生长率、生长曲线、细胞周期及增殖指数(proliferation index,PI)等的影响。48 h后,MTT法检测结果提示:与对照组比较,中、高浓度rhGH组生长率明显升高(P<0.05);ADM组明显抑制Bel-7402肝癌细胞生长(P<0.05);与ADM组比较,rhGH+ADM各组抑制率明显降低(P<0.05)。依据生长曲线图可以得出,rhGH各组较对照组明显升高,尤其rhGH2组升高明显,rhGH各组间变化不明显;rhGH+ADM各组间变化不明显;与rhGH+ADM各组比较,ADM组明显降低。细胞周期结果显示,与对照组比较,rhGH2、rhGH3组的G2/M期比例和增殖指数(PI)显著升高(P<0.05),ADM组的G2/M期比例和PI显著降低(P<0.05),与ADM组相比较,不同浓度rhGH+ADM组的G2/M期比例和PI明显升高(P<0.05)。生长激素可促进体外培养的Bel-7402肝癌细胞生长;生长激素联合阿霉素治疗,可降低化疗药物的抗癌效果。

摘要：目的:构建拓扑异构酶ⅡαRNA小分子干扰片段(TopoⅡαsiRNA)的真核表达载体并进行表达鉴定。方法:(1)根据GeneBank表达序列标签(Esr)数据库设计4对TopoⅡα基因siRNA的小分子片段。(2)采用RT-PCR方法检测细胞中的To-poⅡα表达并确定受试细胞。(3)将最佳沉默siRNA片段克隆到psilencer4.1-CMV-neo载体上,质粒DNA直接测序确定克隆成功。(4)采用脂质体法将TopoⅡα-siRNADNA转染至受试细胞。并采用有限稀释法和G418加压筛选并培养稳转及对照细胞。(5)分别采用RT-PCR和Westernblot方法测定稳转及对照细胞系TopoⅡαmRNA和蛋白表达。结果:(1)SKOV3/DDP细胞中TopoⅡαmRNA表达最高,与其亲本细胞SKOV3相比较,差异有统计学意义(P<0.05)。(2)以TopoⅡα-4302siRNA片段沉默TopoⅡαmRNA表达最强(P<0.01)。(3)重组阳性克隆经测序鉴定证实TopoⅡα-4302siRNA克隆成功。(4)RT-PCR和Westernblot检测结果显示转染TopoⅡα-4302siRNA质粒DNA后能抑制SKOV3/DDP细胞中的TopoⅡα基因表达。结论:成功构建psilencer4.1-CMV-neo-TopoⅡα-siRNA重组表达载体并稳转至SKOV3/DDP细胞系。为下一步探讨TopoⅡα基因在卵巢癌多药耐药中的作用提供了实验基础。

摘要：目的应用本研究室建立的二乙基亚硝胺(DEN)致大鼠作用的短期体内实验模型,研究了5%的金花茶叶和5%的金花茶浓缩液对DEN致肝癌作用的影响。方法实验用SPF级雄性Wistar大鼠,用DEN作为肝癌的启动剂(200μg/kg,ip,只用1次),然后喂食含0.015%的2-AAF(2-乙酰氨基芴)饲料2周,加大部分肝切除,作为选择性促进程序,使被DEN启动的肝细胞迅速增生成癌前病灶。各实验组大鼠从实验一开始即喂食含5%的金花茶叶和5%金花茶浓缩液饲料,对照组则喂食基础饲料。大鼠于停饲2-AAF饲料3天后处死。肝脏按规定部位取材,做γ-谷氨酰转肽酶(γ-GT)染色,用笔者设计的计算机软件计算肝癌前病变γ-GT阳性灶,算出平均每cm2肝面积中γ-GT阳性灶的数目、面积。结果实验组γ-GT阳性灶的数目、面积均明显少于和小于对照组。结论5%金花茶叶和5%的金花茶浓缩液有抑制DEN致大鼠肝癌作用。

摘要：目的探讨5%的金花茶叶和5%的金花茶浓缩液及5%银杏叶对DEN致肝癌抑制作用。方法应用广西医科大学附属肿瘤医院病理研究室建立的2-乙基亚硝胺(DEN)致大鼠作用的短期体内实验模型,用DEN作为肝癌的启动剂(200μg/kg静脉注射,只用1次),然后喂食含0.015%的2-AAF(2-乙酰氨基芴)饲料2周,加大部分肝切除,作为选择性促进程序,使被DEN启动的肝细胞迅速增生成癌前病灶。各实验组大鼠从实验一开始即喂食含5%的金花茶叶、5%金花茶浓缩液和5%银杏叶饲料,对照组则喂食基础饲料。大鼠于停饲2-AAF饲料3天后处死。肝脏按规定部位取材,做γ—谷氨酰转肽酶(γ-GT)染色,用我们自己设计的计算机软件计算肝癌前病变γ-GT阳性灶,算出平均每cm2肝面积中γ-GT阳性灶的数目、面积。结果实验组γ-GT阳性灶的数目、面积均明显少于和小于对照组。结论5%金花茶叶、5%的金花茶浓缩液和5%银杏叶均有抑制DEN致大鼠肝癌作用,且银杏叶具有抵抗DEN对大鼠的毒性作用。