摘要：目的:ABCB11基因突变是肝内胆汁淤积症2型(PFIC-2)的主要病因,本研究试图构建特异性靶向小鼠Abcb11基因的CRISPR/Cas9系统,并检测该系统的基因编辑效率。方法:根据小鼠Abcb11基因的DNA序列,设计3条sgRNA导向序列,通过构建sgRNA表达载体,将sgRNA质粒和Cas9质粒一起转入N2a细胞,药物筛选,阳性细胞DNA的PCR产物测序以及TA克隆测序等实验,完成基因编辑系统构建及效率检测。结果:sgRNA3导向序列可用于编辑小鼠Abcb11基因,编辑效率为61.54%。结论:靶向小鼠Abcb11基因的编辑系统构建成功,且有较高的编辑效率,为后续建立精准模拟人类PFIC-2疾病的小鼠模型以及临床治疗奠定了基础。

摘要：以文化创意产业背景下的DIY手绘鞋的创作发展为主题,对DIY手绘鞋面临的技艺缺少创新、传播力度不够、创新不足等问题进行深入研究。研究在新媒体融合发展迅速的前提下,让DIY手绘鞋与桂林传统文化相结合,运用桂林独特的文化符号作为绘制创作基础,加以民族蜡染面料等、充分发挥手绘鞋独一无二的文化魅力,探索DIY手绘鞋在艺术、历史、审美上等多方面的发展和创新。

摘要：课堂教学是教学的最基本形式,传统的依靠课堂录播视频对教学行为分析不仅效率低,而且结果较为主观。在教育信息化的背景下,为提高智慧课堂中教学视频信息的有效运用以及课堂行为自动识别问题,该文设计制作一种基于目标检测的课堂行为监控系统。由相机拍摄的课堂视频流作为系统输入,综合使用图像视频处理技术,卷积神经网络算法,应用界面编程等技术,识别教学课堂上学生的行为,并将结果反馈给教师及时采取措施。该系统实验结果表明,系统能够实时有效分析课堂状况,规范学生自身行为,有助于提高教学质量管控,辅助教师改善课堂教学方式。

摘要：根据GenBank中的大肠杆菌0157:H7毒力基因rfbE保守序列,应用LAMP引物的设计软件Primer Explorer V4设计针对靶基因rfbE的引物、设计反应程序与体系,成功建立检测致病大肠杆菌的LAMP检测方法。结果表明,该LAMP方法具有良好的敏感性、特异性及荧光可视化判定效果。该方法对目的菌株纯菌DNA可被检出的最低限可达到1.69×10-4 ng/μL;对9种相关细菌进行LAMP方法检测,大肠杆菌0157:H7为阳性结果,其余菌株均显示阴性,阳性检出率为100%;优化浊度仪监控条件,反应器加入荧光染料,63℃反应1 h后即可观察结果,较PCR方法用时短。结果表明,该LAMP方法具有操作简便、高效快捷等优势,在食品食源性致病大肠杆菌快速检测监测方面具有较高的实用价值。

摘要：本文通过对仿生机械手进行了进一步的探讨,同时也设计一款基于图像识别、手势控制、脑电控制和远程APP操控于一身仿生机械手。仿生机械手是一种基于人类活动的仿生机器人技术,它借鉴人体手部运动方式,实现对物体的抓取。它的出现给人类生产和生活带来便利和效率提升,同时也帮助人类的科技发展跨入新的纪元。

摘要：天基平台快速反射镜在工作过程中受到空间电离辐射和天体摄动力的影响,会在音圈电机和负载输出端引起电流以及位置扰动,降低系统稳态精度和跟踪精度。为了减小扰动对系统的影响,在音圈电机输出电流路径和负载输出位置路径分别设计了扰动观测环节用于实现对特定扰动的抑制。首先,分析了天基环境下各扰动信号对系统输出精度的影响;然后,在系统中分别引入了电流和运动状态干扰观测环节,根据系统分析结果设计了各DOB(disturbance observer)环节控制器参数;最后,对理论模型进行了数值仿真并与刚柔耦合虚拟样机控制系统模型测试结果进行了对比分析。结果显示,当扰动电流和扰动位置频率分别为200 Hz和40 Hz时,双DOB系统对扰动的抑制能力可达92.59%,虚拟样机测试结果与理论结果的误差均在10%以内。

摘要：【目的】建立奶牛G蛋白偶联受体109A基因(GPR109A)的实时荧光定量PCR检测方法,为开展奶牛产后脂类代谢紊乱及酮病发生机理研究奠定基础。【方法】根据Gen Bank中奶牛GPR109A基因和β-actin基因(内参基因)的m RNA保守序列设计合成两对引物,以奶牛肝脏组织c DNA为模板,PCR扩增目的基因后与载体连接构建重组质粒,以SYBR Green I实时荧光定量PCR进行扩增,绘制标准曲线,并对其特异性、敏感性、重复性等进行检验。【结果】GPR109A基因和β-actin基因的实时荧光定量PCR标准曲线方程分别为y=-3.309x+10.92(R2=0.9985)和y=-3.289x+9.794(R2=0.9997),扩增效率分别为101.0%和100.0%。特异性试验结果显示,GPR109A基因和β-actin基因的溶解曲线峰单一,无引物二聚体和非特异性扩增产物生成;敏感性试验结果显示,线性扩增范围广,可检测到1.8×102个拷贝的GPR109A基因;重复性试验结果显示,各扩增反应的变异系数(CV)小于或等于1.7%。【结论】基于GPR109A基因建立的SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR具有操作简便、敏感性高、特异性强和重复性好等特点,可用于牛源性GPR109A基因表达量的快速检测和定量分析。

摘要：【目的】探索在慢羽鸡成纤维细胞中敲除ev21基因的可行性,净化鸡群内源性逆转录病毒,同时为快速培育缺失ev21基因的慢羽鸡配套系打下基础。【方法】根据ev21基因序列(KY235336)特点,分别在其5’和3’端各设计2个sgRNA,用于构建4种不同sgRNA的打靶质粒,筛选出在5’和3’端打靶效率较高的sgRNA。然后基于CRISPR/Cas9基因编辑技术对ev21基因进行剪切,并通过同源重组方式以红色荧光蛋白(mCherry)的DNA片段(CAG-mCherry)替换ev21基因,实现对慢羽鸡成纤维细胞内源性白血病病毒ev21基因定点敲除。【结果】在慢羽鸡成纤维细胞中能检测到ev21基因,构建的4种sgRNA(sgRNA1~sgRNA4)均能成功插入对应的打靶质粒中,经嘌呤霉素筛选及T7E1酶切检测,发现转染4种不同sgRNA打靶质粒后慢羽鸡成纤维细胞均有不同程度的死亡,其中又以sgRNA1和sgRNA3的基因敲除效率较高。同时针对同源位点左右同源臂构建表达mCherry的供体质粒,以其转染293T细胞12 h后均能表达出mCherry。以sgRNA1和sgRNA3打靶质粒及供体质粒共同转染慢羽鸡成纤维细胞,观察发现成纤维细胞内的mCherry持续表达,至转染后第30 d通过流式细胞仪分选收集红色荧光阳性成纤维细胞,并提取其总DNA进行PCR鉴定与基因测序,结果显示红色荧光阳性成纤维细胞中有目的片段(CAG-mCherry)插入,即以插入替换方式能实现对ev21基因的敲除。【结论】基于crispr/cas9基因编辑技术的基因敲除方法能成功敲除慢羽鸡成纤维细胞内源性白血病病毒ev21基因,为培育缺失ev21基因的慢羽鸡品系提供技术支持。

摘要：随着3D打印技术的发展,越来越多的领域逐渐融入了3D打印技术。3D打印文创产品,是一种结合3D打印的快速成型技术和文化创意产品的设计理念相结合的创新创意的思路。将3D打印技术应用于文创产品的设计中,有助于实现文创产品的个性化、多元化的发展。

摘要：目的优选白花丹巴布剂的最佳基质处方,确定透皮促进剂。方法在单因素试验基础上,以感官评分、初黏力、持黏力的综合评分为评价指标,采用均匀设计法对白花丹巴布剂处方中各组分的用量进行优化;并采用Franz扩散池法进行体外透皮吸收试验,筛选透皮促进剂的种类及用量。结果最佳基质处方为白花丹浸膏2.0 g,聚丙烯酸钠0.938 g,甘羟铝0.137 g,甘油8.6 g,酒石酸0.04 g,蒸馏水6.0 g,高岭土0.5 g;以5%薄荷油作为透皮促进剂时渗透效果较好。结论以最优处方制得的白花丹巴布剂黏着力适中,膏体均匀、易涂布,皮肤追随性较好,制备工艺稳定可行。