摘要：为了筛选适宜在南方种植的高产优质象草品种,试验采用完全随机区组设计,对桂闽引象草等3个南方高产象草类品种进行了生产性能测定。结果表明:桂闽引象草生长速度快,生产性能佳,营养丰富,鲜草产量及干物质产量均居3个供试品种的首位,鲜草产量达(290.73±24.47)t/hm2,比另外2个品种分别高14.08%、25.00%,差异显著(P<0.05)。说明桂闽引象草是南方优质高产象草品种,应用前景广阔。

摘要：【目的】建立针对黏菌素耐药基因mcr-1的Taq Man-MGB荧光定量PCR检测方法,为监控mcr-1基因携带细菌提供技术支持。【方法】针对mcr-1基因保守序列设计特异性引物和MGB探针,构建重组质粒作为阳性标准品,优化引物、探针浓度及Rox参比染料用量、退火温度等反应条件,建立针对mcr-1基因的Taq Man-MGB荧光定量PCR检测方法,并通过特异性、敏感性、重复性试验及临床应用验证其实用性。【结果】Taq Man-MGB荧光定量PCR最佳反应体系20.00μL:Premix Ex Taq^(TM)10.00μL,Rox参比染料(50×)0.25μL,引物MCR-1F/MCR-1R(10μmol/L)各0.50μL,MCR-1-P探针(10μmol/L)0.50μL,重组质粒pMCR-1(模板)2.00μL,灭菌双蒸水6.25μL。扩增程序:95℃预变性20 s;95℃10 s,60℃20 s,进行40个循环。该检测方法能特异性扩增出mcr-1基因,其检测敏感性为2.85拷贝/μL,是常规PCR的100倍,组内和组间重复性试验的变异系数为0.37%~1.18%,均小于1.20%。采用建立的Taq Man-MGB荧光定量PCR对82株广西鸡源致病性沙门氏菌分离株进行检测,结果未发现有携带mcr-1基因的菌株。【结论】针对mcr-1基因建立的Taq Man-MGB荧光定量PCR检测方法具有特异性强、敏感性高、重复性好的特点,可用于临床筛查mcr-1基因,为监控mcr-1基因携带细菌提供技术支持。

摘要：为了探讨桉树-牧草复合种植模式的可行性和桉树是否影响牧草的营养成分,试验于2013—2014年在不同郁闭度的桉树林下套种桂牧1号杂交象草、山毛豆、圆叶舞草、非洲狗尾草、合萌、白花扁豆、速生槐等7种牧草,共设计了13种桉-草复合种植模式。结果表明:在不同郁闭度的桉树林下,桂牧1号杂交象草鲜草产量最高的套种模式是新造林(2 m×6 m),达232.35 t/hm2;其次是新造林(2 m×3 m)、萌芽林(2 m×4 m)、萌芽林(2 m×3 m);山毛豆鲜草产量最高的套种模式是新造林(2 m×6 m),达89.0 t/hm2,新造林与萌芽林间产量相比差异显著(P0.05)。说明桂牧1号杂交象草、非洲狗尾草、山毛豆、圆叶舞草4个牧草品种适合在桉树下套种生长,而且桉树对牧草营养价值的影响不明显。

摘要：为了研制猪戊型肝炎(HE)基因工程疫苗,设计引物扩增猪戊型肝炎病毒(HEV)的基因片段LB1、LB2、LB3,分别与真核表达载体pEASY-M1Expression Vector直接进行T-A连接,构建得到了重组真核表达质粒pEASY-LB1、pEASY-LB2、pEASY-LB3。将这3个重组真核表达质粒分别转染293T细胞,采用实时荧光定量RT-PCR检测目的基因,并进行SDS-PAGE电泳分析和Western-blot鉴定。结果显示,重组真核表达质粒pEASY-LB1、pEASY-LB2、pEASY-LB3在转染的293T细胞中均可表达一约20.5ku的目的蛋白,且具有良好的HEV抗原性。本试验获得的3个HEV ORF2连续片段的候选核酸疫苗为今后进一步研制HEV核酸疫苗奠定了基础。

摘要：【目的】基于第三代高通量测序技术--单分子实时(SMRT)测序开发凡纳滨对虾微卫星分子标记,为凡纳滨对虾的遗传育种研究提供基础资料。【方法】采用SMRT测序对凡纳滨对虾转录组进行测序,经Illumina测序纠错后利用MISA对获得的转录组数据进行分析;以Primer 3.0设计微卫星引物,随机挑选40对微卫星引物进行PCR扩增验证,并选用扩增成功且具有多态性的微卫星引物用于不同养殖家系凡纳滨对虾遗传多态性分析。【结果】凡纳滨对虾转录组SMRT测序共获得51367条非冗余全长转录本序列,鉴定出39674条微卫星序列;微卫星的分布密度为0.232SSR/kb;以二核苷酸重复微卫星序列分布最多,共有22223条(占56.01%)。随机选取的40对微卫星引物中有26对微卫星引物能成功扩增出特异性条带;微卫星荧光分型结果显示,有16个微卫星位点具有多态性,共获得67个等位基因,平均等位基因数(Na)为4.2个,计算获得的平均观测杂合度(Ho)为0.511,平均期望杂合度(He)为0.451,平均多态性信息含量(PIC)为0.489。在16个微卫星位点中,有2个微卫星位点为低度多态性(PIC0.50);有4个微卫星位点偏移Hardy-Weinberg平衡(P0.05)。【结论】采用SMRT测序开发凡纳滨对虾微卫星分子标记是一种简单而高效的途径,有助于开展凡纳滨对虾的遗传育种研究工作。

摘要：为了对猪场中猪肺炎支原体的感染和发病情况进行有效病原学监测,根据Genbank中猪肺炎支原体(Mhp)基因组序列,设计合成针对P46基因的1对特异性引物,经特异性试验表明,其对猪鼻支原体、猪絮状支原体、鸡毒支原体、猪传染性胸膜肺炎放线杆菌和副猪嗜血杆菌的扩增结果为阴性;敏感性试验表明,其最低检出量为0.675 ng的基因组DNA;临床初步应用证明该方法可满足临床上对猪肺炎支原体的快速检测要求。

摘要：研究建立一种弧菌类致病菌的快速药敏试剂盒,设计与筛选了增菌培养基、药物包埋试剂、细菌生长指示剂、10种药物的定量药敏试剂盒。试剂盒包括试剂盒1和试剂盒2,试剂盒分为检测区、生长区和空白对照区,每种药物双样对照,通过生物指示剂颜色变化来判断药物的最小抑菌浓度。实验结果表明,创伤弧菌在培养基S2里具有较好的生长优势,指示剂对细菌生长具有较好的生长指示作用,准确判断每种药物最小抑菌浓度。结果表明,药敏试剂盒具有准确、简单和快速的特点。