摘要：目的构建了一种针对炎症微环境的结肠靶向-酶敏感纳米给药系统以解决雷公藤红素的递送难题。方法合成透明质酸-金刚烷甲酸(hyaluronic acid-adamantanecarboxylic acid,HA-AD)聚合物,通过1H-NMR进行结构确认。采用透析法制备装载雷公藤红素(celastrol,Cel)的纳米粒(Cel/NPs),以包封率为指标,通过单因素考察和Box-Behnken设计-响应面法试验优化改善处方,并测定纳米粒的粒径分布、ζ电位、形态、稳定性、酶敏感性、药物包封率和载药量;采用透析袋法考察纳米粒的体外释放行为;激光共聚焦显微镜和流式细胞仪分析NCM460细胞对药物的摄取情况;建立急性溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)小鼠模型,对比研究free Cel和Cel/NPs的体内抗UC作用。结果最佳制备工艺为Cel 2.04 mg、环糊精27.19 mg、HA-AD 7.96 mg、DMSO 3.0 mL、纯水(reverses osmosis,RO)10 mL、搅拌时间2 h。所得纳米粒为光滑圆整球形,平均粒径为(152.37±1.42)nm,多分散指数(polydispersity index,PDI)为0.262±0.009,ζ电位为(−32.1±0.8)mV,Cel包封率和载药量分别为(94.18±2.36)%、(5.17±0.13)%,递药体系具有较好的储存稳定性和胃肠道稳定性,但在结肠微环境α-淀粉酶的刺激下,可使环糊精迅速解体,从而瓦解Cel/NPs,快速释放Cel;Cel/NPs增加了NCM460细胞对药物的摄取。体内抗UC结果显示Cel/NPs可以显著改善UC,降低小鼠疾病活动指数评分,恢复小鼠结肠组织状态,增加结肠长度,降低脾脏质量,恢复结肠黏膜上皮完整性。结论所制备Cel/NPs有利于雷公藤红素抗UC靶向递送,显著改善UC,为结肠病变部位药物靶向递送提供新思路。

摘要：目的为了减少高场磁共振成像中因患者身体几何尺寸的差异而引起的扫描部位与线圈尺寸的匹配程度对信噪比(signal-to-noise ratio,SNR)的影响。材料与方法选用成人头部为研究对象,采用共边正六边形填充线圈表面的方式制作柔性头线圈。在验证自制线圈与商用线圈的性能时,分别用水膜和真实人体头部开展对比实验。结果水膜实验证明:随着成像深度的增加,自制线圈SNR呈递减趋势,SNR最大时表层是深层的3倍;对比商用8通道头线圈,从组织表层到水膜46 mm深度的深层,自制线圈SNR相较商用线圈提升了0~2倍;但随着深度进一步增加,SNR在逐渐降低,相较46 mm深度处,更深处SNR大约降低15%。对人体头部冠状面结构扫描发现:人体头部冠状面结构SNR值,表层位置SNR值最大,中心部位SNR值最小,组织从表层到深层图像SNR逐步递减。同时,线圈铺设不完全,会造成成像结果有一定的恶化。通过测试得出自制线圈是可行且稳定的。结论本研究充分证明了柔性材料和弹性材料相结合的方式能够适应成人头部变化带来的几何形变,使线圈内部获得最大的填充系数。同时线圈的不完全铺设引起的成像质量恶化也是存在的,并且该恶化无法通过高填充系数弥补,临床应用是不可忽视的。

摘要：目的探索灭蚊真菌***1938菌株凝胶剂剂型的制备方案。方法根据蚊虫的变态发育特点和***1938菌株的生物学特性,结合保藏、运输和使用的便捷性,以含海藻糖抗逆保护剂的1/2KPYG2定型固体培养基为载体、以菌丝体为活性物质,加工制成"菌丝体-1/4KPYG2凝胶剂"新剂型,在实验室和模拟野外环境下观察其灭蚊效果。结果在实验室和模拟野外环境,每100ml水体使用2块1.51.5×1.0cm3凝胶剂,7d致倦库蚊幼虫致死率均可达到28%。4～8℃条件下凝胶剂品相稳定,储存6个月药效无明显变化。结论 ***1938菌株"菌丝体-1/4KPYG2凝胶剂"具有杀灭蚊幼虫作用。该凝胶剂生产工艺简单,独立包装,贮存方便,使用时不需要专用器械,拆开包装袋直接投放或捏碎后投入水体中,不污染环境,具有较好的应用前景。

摘要：天然氨基酸(NAA)是一种具有良好生物相容性的材料,对其进行功能化设计是近年来的热门研究领域。本文中将基于蚕丝蛋白的特征氨基酸序列(Gly-Ala)与离子互补多肽序列(Arg-Ala-Asp-Ala)混编,设计了多肽RAG-16。采用原子力显微镜、旋转流变仪、傅立叶变换红外光谱仪、倒置荧光显微镜等技术对多肽RAG-16的自组装结构、流变学性能以及细胞相容性等性质进行了表征。结果表明:多肽RAG-16在溶液中具有自组装特性,能够形成纳米级三维网络结构,所形成的水凝胶力学性能较佳。通过分析得知,多肽二级结构中Silk I结构比例增加是其力学性能增强的主要原因。荧光染色显示,绝大多数接种于多肽水凝胶中的MC3T3-E1细胞能够存活,且能在不同的三维平面上生长增殖,表明该材料具有良好的细胞相容性。综上所述,本实验中设计的NAA材料在生物医学领域有较大的应用潜力。

摘要：目的构建斑马鱼腺苷甲硫氨酸脱羧酶(amd 1)突变体,并运用聚合酶链式反应(PCR)技术对突变的碱基位点设计特异性引物,以建立快速鉴定短片段缺失的方法。方法利用CRISPR/Cas9系统构建斑马鱼amd1突变体;运用整胚原位杂交技术分析AMD1在野生型(WT)和amd1纯合子斑马鱼胚胎中的表达;根据突变体的突变位点设计鉴定引物,用PCR和琼脂糖凝胶电泳检测,并使用二代测序技术验证。结果斑马鱼amd1突变体构建成功;受精后24 h,在WT斑马鱼胚胎中AMD1主要在头部、眼睛、体节及内胚层区域表达,而在amd1纯合子斑马鱼胚胎中AMD1的表达明显降低。运用amd 1-screen-(3)-5′引物进行PCR时,在WT斑马鱼胚胎中可获正常条带;而在amd 1纯合子斑马鱼胚胎中未能获得相应条带。结论斑马鱼amd1突变体被成功构建;amd 1-screen-(3)-5′被确定为最佳鉴定引物。

摘要：目的:优化草果酚酸的提取工艺。方法:以乙醇体积分数、液料比、提取时间为考察因素,原儿茶酚酸和香草酸的总含量为响应值,采用Box-Behnken设计-响应曲面法优化草果酚酸的提取工艺并验证。结果:最优提取工艺为乙醇体积分数65%,液料比4∶1(mL/g),提取时间2.5 h。经3次实验验证,原儿茶酚酸和香草酸的平均总含量为12.32 mg/g(RSD=0.26%,n=3),与预测值(12.63 mg/g)的平均相对误差为2.45%。结论:优化所得工艺稳定、可行。

摘要：目的探讨应用无针喷射技术进行心肌注射的可行性及规律。方法以改造后的Injex无针注射系统采用正交试验设计选择不同喷射容量、喷口直径,以蓝色墨水对离体心肌组织进行喷射,记录其喷射压强、喷射效率及喷射深度,并分析各因素与观察指标的相关性。结果正交试验结果表明喷射容量,喷口直径作为两个独立的因素影响喷射压强及喷射深度,但喷射效率仅受喷口直径的影响。利用无针喷射技术可在不穿透心肌全层的情况下,使投送效率达到90%。结论利用无针喷射技术可实现有效的,注射深度可控的心肌注射。

摘要：目的建立适用于检测人胱抑素C(Cystatin C)的IgG与IgY双抗体夹心ELISA检测体系。方法以人Cystatin C作为抗原免疫产蛋的罗曼鸡和新西兰兔,纯化抗Cystatin C的鸡抗体IgY和兔抗体IgG,并分别建立三种ELISA夹心检测体系,I:捕捉抗体IgG+检测抗体IgY+抗鸡IgY酶标抗体;Ⅱ:捕捉抗体IgG+检测抗体IgY+兔F(ab')2抗鸡酶标抗体;Ⅲ:捕捉抗体IgY+检测抗体IgG+抗兔IgG酶标抗体。通过比较Cystatin C的最低检测浓度和阴性对照的OD值评价三种夹心法的灵敏度和特异性。结果体系I的Cystatin C最低检测浓度为7.5ng/mL(阴性对照OD值为0.737),体系Ⅱ的Cystatin C最低检测浓度为13ng/mL(阴性对照OD值为0.313),体系Ⅲ的Cystatin C最低检测浓度为10ng/mL(阴性对照OD值为0.31)。结论成功建立了Cystatin C的双抗体夹心ELISA检测体系,体系I的灵敏度最高但其特异性差,体系Ⅱ和Ⅲ的检测灵敏度和特异性均较好,可以用于Cystatin C的检测。

摘要：利用天然蛋白质氨基酸序列设计生物仿生材料是近年来兴起的一个热门研究领域.本文中将蚕丝蛋白特征氨基酸序列(Gly-Ala-Gly-Ala-Gly-Ser)部分引入离子互补型多肽RADA16-Ⅰ中,设计了新型多肽RAGA16.采用原子力显微镜(AFM)、旋转流变仪(Rheometer)、傅立叶变换红外光谱仪(FTIR)、倒置荧光显微镜等技术对多肽RAGA16的自组装结构、肽链的二级结构、流变学性能以及细胞相容性等进行研究.结果表明,蚕丝蛋白多肽序列引入后,多肽RAGA16具有自组装特性,能够自组装形成致密的纳米级三维网络结构,所形成的水凝胶力学性能明显提高,通过分析得知这可能是由于多肽二级结构中Silk I结构成分比例增加所致.荧光染色显示,绝大多数接种于多肽水凝胶中的小鼠前成骨细胞MC3T3-E1能存活,且在不同的三维平面上生长增殖.综上,利用蚕丝蛋白特征序列对RADA16-Ⅰ进行仿生改性后,对拓展多肽材料在生物医学领域的应用具有重要意义.

摘要：为了评估公路隧道施工空气污染对施工人员健康的影响,按照生命周期评价思想和影响路径分析方法,以NO_2、SO_2作为研究对象。结合流行病学和病理学的成果,将NO_2、SO_2的健康损害效应归类,建立公路隧道施工NO_2、SO_2浓度和健康损害定量关系,最后用伤残调整生命年(DALY)表征空气污染对施工人员造成的健康损害。研究发现相同浓度下空气污染物的健康损害能力差别显著,建议优先控制能造成更不利健康损害的空气污染物浓度。将当前关于隧道施工环境的研究范围从单纯的空气质量监测及改善方法拓宽到施工人员健康损害上,对于优化设计和施工方案,推进绿色隧道施工有直接的参考意义。