摘要：目的:优化黄芩(Scutellaria baicalensis Georgi)中黄酮类成分的提取工艺,分析其体外抗炎活性。方法:以乙醇浓度、超声时间、超声温度及料液比为考察因素,以黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素及汉黄芩素为评价指标,在正交试验基础上分别采用层次分析法(AHP)、熵权法(EWM)及层次分析法-熵权法(AHP-EWM)法确定各指标权重系数,优化黄芩中黄酮类成分的提取工艺,并以最佳工艺制备黄芩提取物,利用MTT法和酶联免疫法(ELISA)分析其体外抗炎活性。结果:AHP-EWM法确定的权重系数科学合理,优选的最佳提取条件为:乙醇浓度55%、超声时间25 min、超声温度60℃、料液比1∶25。ELISA法结果表明,黄芩提取物浓度为50~300μg/mL时,可显著抑制RAW264.7炎性细胞TNF-α、IL-6的释放。结论:AHP-EWM法确定的权重系数客观真实,优选的工艺稳定可靠,该工艺下制备的黄芩提取物具有良好的体外抗炎活性。

摘要：目的采用皮肤渗透性参数计算、复杂网络分析、分子对接、分子动力学模拟等计算机辅助药物设计结合化学分析、体外生物试验的“干湿”结合策略探究敦煌消痹止痛酊治疗骨关节炎(osteoarthritis,OA)的物质基础。方法选择被实验证实的中药来源的可透皮化合物,利用Schr?dinger软件Qikprop模块进行皮肤渗透性参数计算,建立透皮参数范围标准,并筛选敦煌消痹止痛酊中满足条件的化合物。对敦煌消痹止痛酊进行功效分组,通过靶点反向预测-复杂网络分析-KEGG通路富集分析探讨不同功效组治疗OA的潜在靶点及KEGG通路。采用分子对接的方法对方中符合皮肤渗透性参数范围的成分进行虚拟筛选,挑选化合物进行酶活性测定、ADMET计算、皮肤渗透性测定、细胞试验、外植体试验研究。结果全方得到潜在透皮成分为69个,复杂网络分析结果显示活血组治疗OA的特有靶点主要为VEGFA、IGF1R及HIF-1α等,主要KEGG通路为Ras、RAP1等。清热组治疗OA的特有靶点主要为TLR9、IL-6及ADAMTS5等,主要KEGG通路涉及TNF、NF-κB等信号通路;分子对接-酶活性-细胞试验结果显示,升麻素、欧前胡素和香草酸对COX-2具有抑制活性,可以抑制软骨细胞PGE2的合成。在软骨外植体模型中,升麻素可以有效缓解软骨损伤;体外透皮试验显示,升麻素12 h内皮肤累积渗透量达到128.1μg·cm-2,透皮吸收百分率为28.2%。分子动力学模拟结果显示,升麻素与COX-2的氨基酸残基TYR 355、LEU 384、SER 530形成较为稳定的氢键作用,与PHE 518形成较为稳定的疏水相互作用。结论本研究采用计算机辅助药物设计联合多种化学生物实验技术的“干湿”结合策略初步阐明了敦煌消痹止痛酊治疗OA的物质基础,为外用中药的研究提供参考。