摘要：本文介绍了前牙美学修复中的主要注意事项,包括美学修复前的准备,标准化的基牙预备,美学修复中过渡性修复体的制作,全瓷材料的选择,全瓷美学修复体的粘接以及如何预防瓷折、瓷裂的发生等方面的内容;同时,对前牙美学修复中常见的临床问题进行了总结和回顾。

摘要：背景:制约桡骨近端骨折治疗及内固定物、假体设计和改进的一个重要因素是该部位的解剖学形态。目的:测量桡骨近端19项解剖学指标,为桡骨近端骨折内固定物的合理放置及桡骨头正确切除、假体的设计和改进提供参考依据。设计、时间及地点:重复测量,对比观察实验,于2007-12/2008-04在江苏省南通大学附属医院创伤研究室完成。材料:成人30对防腐尸体上肢标本,男、女各15对。方法:对上述标本解剖并取出尺桡骨,利用精度0.01mm的游标卡尺、分规、量角器对桡骨近端数项解剖学指标进行测量。主要观察指标:①桡骨近端相关角度:桡骨颈干角、桡骨头环状关节面和尺骨桡骨切迹在前臂中立位时接触弧、前臂最大旋前位时接触弧度、前臂最大旋后位时接触弧度、非接触弧度;②桡骨近端相关高度、长度、横径、矢状径等:桡骨近端长度、环状关节面内侧、外侧、前侧及后侧高度、桡骨头凹最大深度、桡骨近端外侧弧长度、外侧弧的最大垂直高度、桡骨转子上缘桡骨颈横径、桡骨转子上缘-桡骨头近端距离、桡骨转子中部-桡骨头近端距离、桡骨头横径、桡骨头矢状径、桡骨头凹直径。结果:男、女在桡骨近端相关角度方面测量值的差异无统计学意义(P>0.05);而在桡骨近端相关高度、长度、横径、矢状径等方面男性测量值大于女性(P<0.05)。结论:桡骨近端骨折在行内固定或桡骨头切除、假体置换时,需遵循桡骨近端各项解剖参数;因男性桡骨近端的解剖参数略大于女性,设计时应根据不同性别做成各种型号的假体。

摘要：背景：体内成熟和不成熟树突状细胞（dendritic cells,DC）数量极少,仅占外周血单核细胞的1%,占脾细胞的0.2%-0.5%,几乎不能直接从体内分离出大量的纯化的DC,要获得足够的DC,只有依靠体外培养增殖。目的：以不同剂量粒巨噬细胞集落刺激因子诱导分化获得大鼠骨髓源性DC,拟建立合适的大鼠骨髓源性未成熟DC的培养方法。设计、时间及地点：随机对照动物实验,于2007-06/2008-05在苏州大学附属第一医院临床免疫学实验室和附属儿童医院骨科实验室完成。材料：雄性SPF级Lewis大鼠用于培养骨髓源性DC,雄性SPF级Brown Norway大鼠用于混合淋巴细胞反应实验。方法：采用密度梯度离心法从Lewis大鼠股骨和胫骨获取骨髓源性单个核细胞,分别以2.5,5,10,20μg/L粒巨噬细胞集落刺激因子和5μg/L白细胞介素4诱导分化获得大鼠骨髓源性DC,采用黏附法纯化DC。主要观察指标：以流式细胞仪分析DC表型。混合淋巴细胞反应中以Lewis大鼠DC作为刺激细胞,以Brown Norway大鼠脾脏T细胞作为反应细胞,检测其刺激同种T细胞增殖能力。ELISA测定分泌细胞上清液中白细胞介素12、干扰素水平。结果：随粒巨噬细胞集落刺激因子质量浓度的增高,诱导的细胞获得率逐渐升高,但DC比例逐渐下降。CD86、MHC-II表达阳性率随培养时间延长逐渐增加。培养第5,7天,DC不能有效刺激同种异体T细胞的增殖反应,培养第13天,DC刺激同种异体T细胞的增殖反应能力明显增强（P〈0.01）。培养7d以后,DC上清液中白细胞介素12水平明显增高（P〈0.01）,脂多糖刺激以后升高更加明显（P〈0.01）。脂多糖刺激后DC表型MHCII、CD86表达明显增加,白细胞介素12分泌增加,刺激同种T细胞增殖能力轻度增强。结论：5μg/L粒巨噬细胞集落刺激因子为诱导大鼠骨髓源性未成熟DC的最佳剂量,培养9d可以获得足够数量和纯度的未成熟DC。

摘要：目的 构建MGMT基因的siRNA（small interfering RNA）质粒载体pRNAT-H1.1/Neo-MGMT siRNA,为进一步研究siRNA对MGMT基因的抑制作用,探讨MGMT在胶质瘤的化疗耐药及逆转胶质瘤细胞耐药表型中的作用奠定基础.方法 针对MGMT的靶序列设计合成二三条shRNA（small hair RNA）的DNA模板单链,同时模板链两端分别设计BamHⅠ和Hind Ⅲ限制酶切位点.退火形成siRNA载体插入片断.用限制性内切酶将pRNAT-H1.1/Neo线性化,T4连接酶将插入片断插入pRNAT-H1.1/Neo中.重组质粒转化大肠杆菌DH5α后培养出阳性克隆,抽提质粒,经酶切、电泳和测序的方法鉴定质粒构建是否成功.结果 设计构建三条针对MGMT基因的siRNA质粒载体,经双酶切,在2%琼脂糖凝胶电泳结果显示：PCR产物大小76bp,产物大小与设计的完全相同.测序结果证明序列正确.结论 成功设计构建了三条针对MGMT基因的siRNA质粒载体,为研究RNA干扰逆转胶质瘤细胞的耐药表型提供了良好的实验材料.

摘要：目的应用实时荧光定量PCR(real-time-qPCR)对全国范围内的耳聋患者进行mtDNA C1494T的筛查,为进一步研究该突变和聋病的临床基因诊断提供帮助。方法收集国内25个不同省市的特教学校和聋哑学校的3 133例双侧重度或极重度非综合征型聋患者,提取外周血DNA,设计TaqMan-MGB的引物和探针进行real-time-qPCR,对所有阳性样本和随机抽取的495例阴性样本进行直接测序验证。结果 3 133例中,发现C1494T突变14例(14/3 133,0.45%),经测序验证全部为C1494T突变,495例阴性样本中均无C1494T突变。结论 Real-time-qPCR是进行mtDNA C1494T突变筛查的有效方法,中国耳聋人群中mtDNA C1494T的突变率较低。

摘要：目的对人工气管的相关组分材料进行毒理学评价实验。方法本实验按照同际国内既定标准，对纳米碳纤维、胶原蛋白。纳米羟基磷灰石等组分材料进行体外毒理学实验研究，包括细胞毒性实验、遗传毒性实验、急性毒性实验。结果本实验涉及的生物材料以及混合材料没有发现细胞毒性及遗传毒性作用。各组材料浸渍液与L-929细胞共培养7d，细胞相对增殖率均〉100％（纳米碳纤维：136．21％；胶原蛋白-纳米羟基磷灰石：135．10％；混合材料：112．05％），毒性分级均为0级。动物实验亦未见明显的全身毒性作用，均符合毒理学评价实验的安全标准。结论利用纳米碳纤维、胶原蛋白-纳米羟基磷灰石设计制作的人工气管符合生物相容性毒理学评价实验的安全标准。

摘要：背景:肝细胞生长因子半衰期短,且不具有靶向性。成熟肝细胞体外大量培养及活力维持难度较大,严重制约肝细胞移植及生物人工肝的临床应用。目的:制备并表征载肝细胞生长因子的聚乳酸-O-羧甲基壳聚糖纳米粒子,探讨其体外降解、释药行为及对培养大鼠肝细胞活力的影响。设计、时间及地点:对比观察实验,于2006-07/2008-01在南通大学肝胆外科研究所及南通大学江苏省神经再生重点实验室设计完成。材料:SD大鼠10只,肝细胞生长因子由英国PeproTech公司提供,聚乳酸由美国Sigma公司提供,O-羧甲基壳聚糖由上海伟康生物技术有限公司提供。方法:以聚乳酸和O-羧甲基壳聚糖为基质材料,采用超声波法制备聚乳酸-O-羧甲基壳聚糖纳米粒子,用低温磁力搅拌法制备载肝细胞生长因子的聚乳酸-O-羧甲基壳聚糖纳米粒子。用该载药纳米粒子进行原代大鼠肝细胞培养,并以不加肝细胞生长因子的普通培养作为对照,采用CCK-8体外细胞增殖检测试剂盒检测培养肝细胞活力。主要观察指标:观察该载药纳米粒子的结构、粒径及表面形貌,测定其粒径分布和表面电位,动态监测降解过程中粒子表面形貌的变化、降解过程中质量的损失情况和降解介质的pH值变化情况。并进一步检测培养1周内肝细胞的活力。结果:载肝细胞生长因子的PLA-O-CMC纳米粒子呈球形,其平均粒径为140nm,粒径分布指数为0.108,载药率为0.12665%,包封率为76.32%,粒子表面电位为32.8eV。该载药纳米粒子前24h释药动力学方程为Q=148.4266+189.0493t1/2(R=0.97589),符合Huguchi方程;前30d内释放动力学方程Q=1086.28966+58.23938t(R=0.99716),符合零级释放方程。载药纳米粒子组肝细胞活力明显高于普通培养组(P<0.05)。结论:实验成功制备并表征了载肝细胞生长因子的聚乳酸-O-羧甲基壳聚糖纳米粒子,并证实其能够有效维持培养大鼠肝细胞的活力。

摘要：目的人分化抑制因子3(inhibitor of differentination 3,Id3)基因在A549细胞中的外源性表达能抑制细胞生长并诱导细胞凋亡。文中旨在构建靶向人Id3基因的微小分子RNA(miRNA)表达载体,观察miRNA对A549细胞中Id3表达的下调作用,为进一步探讨Id3基因在A549细胞生长调控中的作用机制提供一定实验依据。方法依据miRNA设计原则,针对人Id3基因的mRNA序列,设计并合成编码miRNA的2条寡核苷酸序列,经退火成互补双链,再克隆至pcDNATM6.2-GW/EmGFP-miR真核表达载体中,构建含靶向人Id3基因的miRNA表达质粒(pcDNA6.2-GW/EmGFP-miR-Id3),DNA测序验证后,采用Lipofectamine2000TM脂质体转染技术将该质粒导入A549细胞。荧光倒置显微镜下观察miRNA干扰质粒转染A549细胞后EGFP的表达情况,应用RT-PCR和Western blot方法分别检测miRNA干扰后Id3mRNA及蛋白水平的表达。结果DNA测序表明重组质粒pcDNA6.2-GW/EmGFP-miR-Id3构建正确,将其成功导入A549细胞后,在Id3mRNA水平和蛋白表达水平均有不同程度的抑制作用。结论成功构建了针对人Id3基因的4组pcDNA6.2-GW/EmGFP-miR-Id3miRNA表达载体,其中,SRId3-1干扰组在mRNA水平和蛋白表达水平均能有效抑制A549细胞Id3的表达。

摘要：目的：了解徐州地区耐药结核的流行情况及其耐药谱，探讨耐药结核发生的影响因素。方法选择本院收治的涂阳肺结核患者作为研究对象，釆用统一设计的调查表获取患者的基本信息和相关流行病学资料；对研究对象的痰标本进行一线和二线抗结核药物敏感性试验，获取耐药性资料；数据录入Excel表格，采用SPSS 18.0软件进行统计分析。结果本地区总的耐药率为17.29%，耐多药[至少同时耐异烟肼（INH）和利福平（RFP）]率为5.60%，广泛耐药率为0.26%；复治患者的耐药率（37.26%）高于初治患者（13.56%），两者差异有统计学意义（χ2=140.35，P＜0.05）；单一耐药的菌株中耐INH的耐药率最高，在多耐药（对至少两种一线抗结核药耐药，但不包括同时耐INH和RFP）组合中，以INH+SM（链霉素）的组合构成比最高；耐多药组合中，以INH+RFP的组合构成比最高；耐药结核病在不同性别患者中分布的差异无统计学意义，在不同年龄患者中分布具有统计学意义，以41～60岁年龄组耐药率最高。结论徐州地区结核病总耐药率虽然不高，但耐多药率较高，性别分布差异无统计学意义，年龄分布以41～60岁年龄段最多。