摘要：目的基于网络药理学分析滋阴方治疗排卵障碍性不孕症的作用机制并设计临床对照试验观察滋阴方对该病的治疗疗效。方法利用TCMSP、PubChem、Genecards、STRING、Swiss Target Prediction、UniProt等数据库,获得滋阴方所有作用靶点和排卵障碍性不孕症相关的靶点。构建靶点蛋白质相互作用网络,进行GO生物学过程与KEGG通路富集分析,使用Cytoscape 3.6.0构建滋阴方治疗排卵障碍性不孕症的“中药-有效成分-靶点-通路”网络。同时设计临床对照试验,试验组及对照组均以克罗米芬联合人绝经期促性腺激素进行促排卵治疗,试验组在此基础上添加滋阴方,通过观察两组HMG用量、卵泡发育天数、扳机日单个优势卵泡雌二醇水平(E2)水平、周期排卵率、未破裂卵泡黄素化综合征发生率、周期妊娠率等指标,验证滋阴方的临床有效性。结果滋阴方共有22个活性成分,354个作用靶点,排卵障碍性不孕症靶点791个,取交集获得滋阴方治疗排卵障碍性不孕症作用靶点96个。根据Degree找出关键靶点为SRC、MAPK1、HSP90AA1、MAPK3、PTPN11、ESR1、AKT1、EGFR、NR3C1、KNG1。GO生物学过程富集分析显示,滋阴方治疗排卵障碍性不孕症主要集中在类固醇激素介导的信号通路、氧化、还原、凋亡等过程。KEGG通路富集分析表明富集最显著的信号通路PI3K-Akt信号通路、Rap1信号通路、HIF-1信号通路、雌激素信号通路、卵巢类固醇生成、类固醇激素生物合成。临床试验显示滋阴方能减少人绝经期促性腺激素用量,缩短卵泡发育天数,提高扳机日单个优势卵泡E2水平、周期排卵率及妊娠率。结论滋阴方中多种有效活性成分可以通过不同的途径发挥其促进卵泡发育的作用,从而提高排卵障碍不孕症患者排卵率及临床妊娠率,具有良好的临床应用前景。

摘要：目的：探讨近红外荧光染料（NIR-797）标记的靶向纳米微球对胃癌细胞的示踪作用，以期指导胃癌手术中的精准切除。方法采用酰胺化法将NH2-PEG-NH2、明胶酶作用底物肽段（Pep）及PCL-COOH合成靶向聚合物片段NH2-PEG-Pep-PCL及不含Pep的非靶向NH2-PEG-PCL，然后采用自组装法制备成空包纳米微球，通过化学反应将NIR-797标记到PEG末端。检测纳米微球的分子量、粒径、多分散性和表面电位；采用荧光显微镜观察非靶向和靶向纳米微球与人胃癌SGC-7901细胞的结合程度；同时采用多光谱成像系统检测静脉注射到荷瘤裸鼠体内不同时间点下两者在肿瘤部位的富集程度。结果靶向NH2-PEG-Pep-PCL及非靶向NH2-PEG-PCL的分子量和设计分子量相近，靶向纳米微球标记NIR-797前后的平均粒径分别为（124.1±2.1） nm和（129.7±2.8） nm，非靶向微球标记NIR-797前后的平均粒径分别为（120.6±2.6） nm和（124.3±2.9） nm，差异均无统计学意义（均P〉0.05）。靶向纳米微球在SGC-7901肿瘤细胞中和荷瘤裸鼠肿瘤部位的荧光强度均明显高于非靶向纳米微球。结论荧光标记靶向纳米微球对胃癌细胞有明显的靶向亲和力，并在肿瘤部位富集，可以很好地对肿瘤进行示踪，有望在临床上指导肿瘤的精准切除。

摘要：目的宫颈癌术后IMRT中通过分析两种骨盆的定义方法以及骨盆受量的影响因素来评估和预测骨盆的剂量,为宫颈癌术后IMRT中骨盆的保护提供参考。方法选择60例骨盆未限量的宫颈癌术后IMRT患者,按照解剖方法和Mell方法勾画两种骨盆轮廓(骨盆解剖、骨盆Mell),基于骨盆解剖限量重新设计治疗计划后分析两者的剂量关系。应用Pearson法分析相关性,Logistic多元回归分析影响骨盆解剖剂量的因素并建立剂量预测模型。结果骨盆解剖、骨盆Mell体积分别为925.82、1141.20cm3(P=0.000)。骨盆解剖与骨盆Mell剂量存在相关性(r>0.622,P=0.000),前者剂量明显大于后者;两者V10、V20、V30的关系分别为y=-8+1.01x、y=-13+1.05x、y=-4+0.9x。文献推荐骨盆Mell限量标准(V10≤90%、V20≤75%、V30≤60%)经计算得到相应骨盆解剖限量标准为V10≤97%、V20≤83%、V30≤70%。骨盆解剖限量后可降低受量,其中V10、V20、V30、Dmean分别降低3.64%、12.69%、12.02%、6.93%(P=0.000、0.000、0.000)。多因素分析显示骨盆解剖重叠在PTV内的相对体积是骨盆解剖剂量的影响因素(P<0.05),当重叠体积<18%时骨盆限量易达到剂量限值要求。结论宫颈癌术后IMRT中两种骨盆定义方法均能应用于临床,骨盆限量能显著降低其剂量。骨盆重叠在PTV内的相对体积是骨盆剂量的独立影响因素,重叠体积小于18%的患者其骨盆限量后易达到剂量限值要求。

摘要：大多数费城染色体阳性急性淋巴细胞白血病(Ph+ALL)患者在使用酪氨酸激酶抑制剂(TKI)治疗后常表现为复发时间短及易出现ABL激酶区突变现象。为进一步研究Ph+ALL患者使用TKI治疗后易复发特点,本研究采用直接测序法检测了35例TKI耐药Ph+ALL患者ABL激酶区突变。结果发现,77.1%(27/35)患者存在ABL激酶区突变,其中T315I突变患者占ABL激酶区突变患者55.6%,特别是首次发现G:C→A:T突变Ph+ALL患者占总ABL激酶区突变Ph+ALL患者77.8%(21/27),包括T315I、E255K和E459K。其次,8例具有两种或两种以上ABL激酶区突变Ph+ALL患者染色体均为复杂核型,5例染色体由初诊单纯t(9;22)进展为复杂核型的TKI耐药Ph+ALL均出现ABL激酶区突变;并且,尿嘧啶-N-糖基化酶2(UNG2)在耐药Ph+ALL组中转录水平表达显著低于初诊组,具有统计学差异(P<0.05),而细胞核内UNG2缺失能增加G:C→A:T突变几率。结论:中国人群TKI耐药Ph+ALL具有高比例ABL激酶区G:C→A:T突变和高度基因组不稳定性。耐药Ph+ALL患者低表达UNG2可能是耐药Ph+ALL患者发生高比例ABL激酶区G:C→A:T突变的因素之一。

摘要：复发、难治性急性髓系白血病（AML）总体预后较差，且目前仍缺乏统一的、标准的再诱导化疗方案。我们设计应用去甲氧柔红霉素（IDA）与小剂量阿糖胞苷（Ara-C）、G-CSF组成的IAG方案对复发、难治陛AML患者进行再诱导治疗，现报道如下。

摘要：目的:构建能表达密码子优化的中国HIV-1流行亚型AE、BC和B’gp120共识序列的核酸疫苗,并研究其免疫原性。方法:根据HIV-1的分子流行病学资料和包膜糖蛋白的氨基酸序列分析,设计了针对中国流行的AE,BC和B’(ThB)亚型的gp120共识序列。按哺乳动物细胞偏好的密码子对AE,BC和ThB3个亚型的gp120共识序列分别进行密码子优化,合成优化基因。将密码子优化的gp120基因克隆到核酸疫苗载体pSW3891,构建重组质粒核酸疫苗。将重组质粒转染293T细胞,并以重组质粒疫苗免疫新西兰兔。应用蛋白质免疫印迹法检测转染细胞中gp120蛋白的表达。ELISA方法检测免疫后兔血清中gp120特异性抗体的产生。结果:3个密码子优化的gp120核酸疫苗,均能正确表达gp120。这些gp120核酸疫苗免疫家兔后,能产生HIV-1包膜糖蛋白特异性的抗体。结论:成功构建3个密码子优化的、表达HIV-1中国流行亚型AE,BC和ThB的共识序列的gp120核酸疫苗,能诱导HIV-1包膜蛋白特异的免疫反应。

摘要：目的分析ABL激酶区突变在中国汉族人群伊马替尼耐药Ph染色体阳性（Ph＋）急性淋巴细胞白血病（ALL）患者中的分布及特点并与慢性髓性白血病（CML）中ABL激酶区突变进行比较。方法研究对象为2010年10月至2012年4月伊马替尼耐药的122例CML患者及21例Ph＋ALL患者。收集CML患者骨髓或外周血单个核细胞及Ph＋ALL患者骨髓白细胞，采用TRIzol法抽提总RNA，检测ABL激酶区突变，并结合骨髓细胞形态学、染色体和融合基因结果分析ABL激酶区突变的分布特点。结果在112例伊马替尼耐药CML患者中检出20个位点23种ABL激酶区突变，突变比例为54．46％（61例），其中P—loop区突变占耐药CML患者的23．21％（26例）。在21例伊马替尼耐药Ph＋ALL患者中检出8个位点10种突变，突变比例为71．43％（15例），其中T315I突变比例最高，占耐药Ph＋ALL患者的28．57％（6例），其次为E255K／V19．05％（4例）和Y253F／H14．29％（3例）。T315I突变在耐药Ph＋ALL患者中的比例显著高于在耐药CML患者中的比例（P：0．001）；Ph＋ALL患者使用伊马替尼后出现ABL激酶区突变时间显著短于CML患者（P〈0．01）；具有额外染色体结构和（或）数目异常的伊马替尼耐药Ph’ALL患者中ABL激酶区突变比例明显高于同组CML患者（P=0．010）。结论ABL激酶区突变在伊马替尼耐药Ph＋ALL与CML患者中的主要类型及分布明显不同。具有额外染色体结构和（或）数目异常的耐药Ph’ALL患者中ABL激酶区突变比例显著高于同组CML患者。

摘要：近期有研究表明异基因造血干细胞移植（allo—HSCT）患者体内存在抗供者特异性抗体（donor-specific antibodies，DSA），尤其是抗人类白细胞抗原（human leukocyte antigen，HLA）抗体。HLA是影响造血干细胞移植物植入、造血重建时间延缓和存活最重要因素之一，特别是抗供者特异性HLA抗体（DSHA）与供受者HLA错配allo—HSCT失败密切相关，

摘要：目的研究中国汉族人群KIR2DL1高分辨等位基因频率及识别HLA-C配体的分布特点。方法采用基因测序和序列特异性引物聚合酶链反应（PCR—SSP）方法，对中华骨髓库登记的111例患者和116名无关供者，共计227份样本进行KIR2DL1高分辨等位基因分型和KIR基因分型，有105例患者接受异基因造血干细胞移植（allo—HSCT）。结果227份样本中有224份（98．68％）样本存在KIR2DL1基因，在448个等位基因中共发现3种KIR2DL1＊00302、＊00201、＊00401等位基因多态性，基因表型频率分别为84．82％（380／448）、12．05％（54／448）和3．13％（14／448），等位基因频率分别为61．04％、6．22％、1．58％，并与欧美人种基因频率分布差异有统计学意义。在6种KIR2DL1高分辨等位基因组合中KIR2DL1＊00302、00302（74．55％）纯合组合为最常见的基因型，且KIR2DL1＊00302、00401组合频率在A／A和B／x中的分布差异有统计学意义（P=0．001），含KIR2DLI＊00401的等位基因组合在A／A中无基因频率分布。KIR2DL1＊00302和KIR2DL1＊00201分别均与KIR2DS1、KIR2DL3、KIR2DS4和KIR3DL1／S1有连锁关系（P〈0．001）。在allo—HSCT的KIR／HLA受配体模式中KIR2DL1＊00302与HLA—C2组位点存在相关性，且与HLA—C＊06：02是最常见的识别受配体组合，而与HLA-C＊01：02受配体模式是最常见的产生异源反应活性的组合，二者在受配体模式中的分布差异具有统计学意义（P〈0．05）。结论KIR2DLI＊00302是中国汉族人群中最常见的等位基因，KIR2DLl高分辨基因分型可预测移植后供者NK细胞的异源反应活性并有利于供者的筛选。

摘要：目的探讨白念珠菌菌丝对小鼠骨髓来源巨噬细胞(BMDM)自噬流的影响。方法白念珠菌菌丝分别体外诱导BMDM细胞0.5、4、12 h,以不加菌丝处理的0 h组作为对照,Western印迹法检测各时间点自噬关键蛋白微管相关蛋白1轻链3(LC3)-Ⅰ向LC3-Ⅱ的转换及磷酸化雷帕霉素机制性靶蛋白(p-mTOR)的表达。白念珠菌菌丝分别联合4种溶酶体阻断剂,包括半胱氨酸蛋白酶抑制剂E-64d+胃蛋白酶抑制剂pepstatin、巴弗洛霉素-A1(BAF-A1)、氯化铵及氯喹,体外诱导小鼠BMDM细胞4、12 h,观察白念珠菌菌丝对BMDM细胞基础自噬流的影响。统计分析采用非配对t检验、析因设计的方差分析及LSD-t检验。结果白念珠菌菌丝体外处理小鼠BMDM 0.5、4和12 h后,与0 h组(0.983±0.030)相比,LC3-Ⅰ向LC3-Ⅱ转换均增加(1.254±0.118、1.629±0.391、1.598±0.379),差异有统计学意义(t值分别为3.875、2.856、2.804,均P<0.05),但各组p-mTOR的蛋白表达无明显差异。白念珠菌菌丝联合E-64d+pepstatin体外处理BMDM细胞4和12 h后,LC3-Ⅱ的蓄积水平较E-64d+pepstatin单独处理组明显增高,差异均有统计学意义(t值分别3.691、6.648,均P<0.05)。与相应溶酶体阻断剂组相比,白念珠菌菌丝联合BAF-A1、氯化铵或氯喹4和12 h后,LC3-Ⅱ的蓄积水平均显著升高(均P<0.05)。结论白念珠菌菌丝体外诱导可增加小鼠BMDM细胞基础自噬流中LC3-Ⅰ向LC3-Ⅱ的转换。