摘要：目的探讨环氧合酶-2(COX-2)特异性小干扰RNA(siRNA)真核表达质粒对人结肠癌HT-29细胞COX-2表达和生长的影响。方法设计短发夹结构的COX-2 siRNA对应模版DNA序列,构建重组质粒pshCOX-2。将重组质粒转染人结肠癌HT-29细胞,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、Western印迹分别从mRNA和蛋白水平检测COX-2表达。用四氮唑盐(MTT)法和流式细胞仪观察COX-2表达被抑制后细胞的生长情况,放射免疫法(RIA)和ELISA法分别检测培养上清中PGE2和VEGF的含量变化。结果酶切及测序证实质粒pshCOX-2构建成功。转染重组质粒72h后可以显著抑制HT-29细胞COX-2 mRNA和蛋白表达(P<0.05),细胞生长受抑,凋亡细胞数显著增加(P<0.05),细胞PGE2和VEGF的产生受抑制(P<0.05)。结论成功构建的COX-2 siRNA真核表达质粒pshCOX-2通过抑制人结肠癌HT-29细胞COX-2基因表达,从而抑制细胞生长、PGE2合成和VEGF的产生。

摘要：背景：前期实验已经证实30%心肌培养上清是诱导大鼠骨髓间充质干细胞分化为心肌样细胞的最佳浓度。目的：在前期实验基础上,观察30%心肌培养上清条件下诱导骨髓间充质干细胞分化为心肌样细胞的时间依赖效应。设计、时间及地点：对比观察,于2007-08/2008-06在徐州市心血管病研究所完成。材料：健康成年SD大鼠,体质量180-220g。方法：分离大鼠骨髓间充质干细胞和心肌细胞并在体外培养纯化。以1×10^8L^-1的细胞密度种植心肌细胞,培养72h后收集上清。将骨髓间充质干细胞的DMEM/F12培养基换为含有30%M199心肌细胞培养上清作为实验组,对照组仍将细胞接种在DMEM/F12培养基上继续培养。主要观察指标：30%心肌细胞培养上清诱导7,14,21d后,应用免疫细胞化学技术检测骨髓间充质干细胞中α-平滑肌肌动蛋白、β-肌动蛋白和心肌特异性肌钙蛋白T的表达。结果：30%心肌细胞培养上清诱导骨髓间充质干细胞后,细胞的形态没有改变,但与对照组相比,α-平滑肌肌动蛋白、β-肌动蛋白和心肌特异性肌钙蛋白T的表达均呈阳性,其中以第14天的蛋白表达量最高（P〈0.01）。结论：30%心肌细胞培养上清诱导骨髓间充质干细胞分化为心肌样细胞的最佳诱导时间是14d。

摘要：目的调查江苏省养老机构在新型冠状病毒疫情下的防控现状及卫生状况,为更好地落实国家关于新型冠状病毒疫情的工作部署和提高养老机构卫生状况与消毒质量提供依据。方法采用自行设计的调查方案及调查问卷于2020年10月-12月对江苏省养老机构进行调查,利用“问卷星”平台收集汇总调查结果,利用SPSS 23.0软件对结果进行统计分析。结果93家养老机构在配备防疫物资、进行室内通风、环境清洁消毒、工作人员口罩佩戴方面比例较高,医养结合型和非医养结合型养老机构除免洗手消毒液配备率差异有统计学意义(P<0.05),其他调查的项目比较差异均无统计学意义。在卫生状况监测方面,对719份环境物体表面的样本进行新型冠状病毒核酸监测,检测结果均为阴性;空气、物体表面、餐饮具、工作人员手等1750份样本平均合格率为75.09%,其中餐饮具的合格率最低,保健医生手与清洁人员手之间合格率差异有统计学意义(P<0.05)。医养结合型和非医养结合型养老机构空气的合格率差异有统计学意义(P<0.05),而物体表面、餐饮具、工作人员手合格率差异均无统计学意义。结论参照《关于印发重点场所重点单位重点人群新冠肺炎疫情防控相关防控技术指南的通知》要求,江苏省各养老机构对国家下发通知的落实情况有待加强,环境卫生状况需要改善,建议加强养老机构环境的监督管理,同时尽快出台养老机构消毒相关的国家标准和规范。

摘要：目的 观察肾移植患者与霉酚酸（MPA）作用位点相关的次黄嘌呤脱氢酶（IMPDH）基因多态性对急性排斥反应的影响.方法 对105例肾移植患者采用基因测序法进行IMPDH基因多态性检测,并随访统计上述患者移植后1年内急性排斥反应的发生率,按照IMPDH不同基因型分组,分析IMPDH基因多态性与移植后1年内急性排斥反应的相关性.结果 105例患者中,所测3个位点中IMPDH1 rs2278293 GG型35例（33.33％）,GA型49例（46.67％）,AA型21例（20.00％）;IMPDH1 rs2278294 GG型22例（20.95％）,GA型49例（46.67％）,AA型34例（32.38％）;IMPDH2 rs11706052 GA型14例（13.33％）,AA型91例（86.67％）.单因素分析显示肾移植后1年内IMPDH1 rs2278293、rs2278294位点GG型患者急性排斥反应的发生率明显高于GA＋AA型患者,差异有统计学意义（P＜0.05）.两位点联合分析显示GG-GG型患者移植后1年内急性排斥反应的发生率更高,与GA＋ AA型者比较差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 携带IMPDH1rs2278293、rs2278294的GA或AA型患者移植后1年内急性排斥反应发生率更低,对霉酚酸酯的治疗效果更好.

摘要：目的 改进颅内动脉瘤手术入路,以最小的创伤来取得动脉瘤显微手术的最佳疗效。方法 根据颅内动脉瘤所在位置,精确设计“锁眼”手术入路,以2 cm左右直径的骨窗进行颅内动脉瘤夹闭等手术。32例手术中,眶上额下经眉弓入路28例,翼点入路1例,乳突后入路2例,额部中线旁入路1例。结果 32例患者35个动脉瘤,行32次“锁眼”显微手术,共有33个动脉瘤行夹闭术,其中3例为多发性动脉瘤,予一次手术夹闭,另行动脉瘤孤立术、包裹术各1例。所有手术无术后感染、出血及脑脊液漏等手术并发症。结论“锁眼”手术创伤小,疗效佳,外观影响少,费用节省,是动脉瘤有效和理想的显微手术入路。

摘要：目的探讨不同细胞色素P4503A亚家族多肽5（CYP3A5）基因型与肾移植患者术后钙调磷酸酶抑制剂（CNI）他克莫司（Tac）的药物剂量和患者血清药物谷浓度之间的关系。方法对接受过肾移植的77例患者采用基因测序方法进行CYP3A5基因多态性检测，同时采用微粒酶联免疫法动态检测移植后7、14、21d．1、3、6、12个月Tac的血清药物谷浓度。按CYP3A5的不同基因型，比较各时间段组内不同CYP3A5基因型与血清药物谷浓度、用药剂量之间的相关性。结果77例肾移植患者中，CYP3A5＊1／＊1型8例（10．39%）、CYP3A5＊1／＊3型31例（40．26＊）、CYP3A5＊3／＊3型38例（49．35＊）。肾移植术后1个月内＋3／＊3型患者服用Tac的的血清药物谷浓度高于＊1／＊3型和＊1／＊1型（P〈0．05），而＊3／＊3型患者Tac的用药剂量则低于＊1／：it3型和＊1／＊1型（P〈0．05）；肾移植术后＊3／＊3型患者在3、6、12个月时的血药浓度高于＊1／女3型和＊1／＊1型患者，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论CYP3A5＊3／{3型患者在肾移植术后1年内使用较低剂量的Tac即可维持有效的血药浓度。

摘要：目的:对甲基化特异性PCR(methylation-specific PCR,MSP)引物设计进行探讨。方法:使用Methyl PrimerExpress Software Version 1.0软件、"methprimer"和"MSPprimer"的网上在线软件设计的引物以及参照国外文献的MSP引物对CCAAT/增强子结合蛋白ζ(CEBPζ),CCAAT/增强子结合蛋白δ(CEBPδ)、脆性组氨酸三联体(FHIT)和死亡相关蛋白激酶(DAPK)基因启动子进行MSP扩增,然后对其MSP产物进行测序验证以比较MSP引物设计的可靠性。结果:对于CEBPζ,CEBPδ,FHIT和DAPK启动子基因所设计的MSP引物经MSP后均获得了所需要的目的条带,但经测序鉴定Methyl Primer Express和methprimer设计的CEBPδ,CEBPζ-1的MSP扩增产物为假阳性产物,而MSPprimer设计的CEBPζ-2的MSP产物为正确序列。结论:MSP引物设计的质量是保证MSP扩增成功的关键因素。

摘要：目的:胰瘘仍是胰十二指肠切除术后主要的并发症和死亡原因之一,可分为单纯性胰瘘和临床重症胰瘘。回顾性分析表明多种胰肠吻合口重建方式均能降低胰瘘发生率,但极少见前瞻性随机化的临床研究。文中采用前瞻性随机化设计旨在比较胰管空肠黏膜吻合与胰肠套入式吻合对术后胰瘘的影响。方法:64例胰十二指肠切除术患者随机分为胰管空肠黏膜吻合组(A组,n=32例)和胰肠套入式吻合组(B组,n=32例)。所有胰腺残端均为易致胰瘘的软质胰腺。结果:2组病例在基础疾病、病理类型、胰管直径、胰管引流方式等方面没有显著差异。共有21例(32.8%)患者出现手术并发症,其中8例(12.5%)并发胰瘘(胰管黏膜吻合组2例为6.3%,胰肠套入式吻合组6例为18.8%,P>0.05);胰管黏膜吻合组未发生一例有明显临床症状的Ⅱ型重症胰瘘,与胰肠套入式吻合组的4例Ⅱ型胰瘘相比亦无显著差异(0vs12.5%,P=0.057)。胰肠套入式吻合组患者有2例(6.3%)患者再手术。2组病例各有1例死亡(3.1%)。术后住院时间无明显差异(A组为19 d,B组为21 d,P>0.05)。而所有胰瘘患者均经非手术治疗后痊愈。结论:胰管空肠黏膜吻合与胰肠套入式吻合相比,并未显著降低胰十二指肠切除术后临床胰瘘发生率。

摘要：目的:建立甲基化特异性PCR(MSP)技术检测死亡相关蛋白激酶(DAPK)基因启动子甲基化。方法:设计针对DAPK基因启动子的MSP引物,建立MSP检测体系对甲基化阳性模板进行检测,评价其特异性、重复性和灵敏性,并经测序鉴定。结果:所建立的甲基化MSP方法仅能扩增出甲基化阳性模板,不能扩增出未甲基化阳性模板和未硫化处理的DNA模板;对不同梯度稀释的甲基化阳性模板进行检测,其最大敏感性可达2%;在不同时间进行甲基化MSP检测的结果均一致。结论:成功建立的DAPK基因启动子甲基化MSP检测方法具有良好的特异性、灵敏性和重复性,可用于肿瘤标本的批量检测。

摘要：目的：采用实时定量聚合酶链反应（RQ-PCR）法检测急性髓系白血病（AML）中黑色素瘤优先表达抗原（PRAME）基因转录本,初步评价其在AML中的临床意义。方法：设计PRAME基因引物,建立扩增PRAME基因转录本的EvaGreen染料法RQ-PCR法,对PRAME转录本克隆质粒进行扩增,评价其特异性、重复性和灵敏性。并对10例AML患者的骨髓单个核细胞标本进行初步检测。结果：所建立的EvaGreen RQ-PCR法具有良好的特异性,最低可检测到10个拷贝/μl的阳性模板,但其重复性差,而10^8～10^2拷贝/μl阳模的重复性良好。10例初诊AML患者PRAME转录本绝对含量为4.91×10^2～8.07×10^5拷贝/50ng（中位7.26×10^3拷贝/50ng）,ABL标化后的相对含量为4.42%～13 170.01%（中位67.98%）。而对照组8例缺铁性贫血患者中PRAME转录本相对含量为0.00%～0.01%（中位0）。1例AML患者诱导缓解后PRAME转录本下降,复发时又明显升高。结论：EvaGreen染料法RQ-PCR检测PRAME转录本方法敏感可靠,可用于AML患者临床监测。