摘要：目的构建polo样激酶-1（PLK1）基因小于扰RNA（siRNA），观察其对肝癌细胞凋亡的影响。方法设计合成3个PLK1siRNA（siRNAl、siRNA2、siRNA3）干扰序列，构建干扰载体，转染人肝癌细胞株SMMC-7721，观察48h后转染效率，采用实时定量逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）筛选下调PLK1mRNA效果最好的siRNA；然后选择以该siRNA转染48h的SMMC-7721细胞，分别以实时定量RT－PCR和Westernblot法检测空白组、对照组及转染组细胞中PLK1基因和蛋白表达；流式细胞仪检测细胞周期及细胞凋亡的改变。结果肝癌细胞株SMMC-7721中存在PLK1蛋白的过表达。应用靶向PLK1的siRNA转染SMMC-7721细胞48h后，PLK1mRNA相对水平siRNA2组分别较无关对照组和空白对照组下降了74％和78％，而PLK1蛋白的表达siRNA2组分别较无关对照组和空白对照组下降了83％和88％，抑制率达88％；siRNA2组中出现大量凋亡细胞，与对照组比较差异有统计学意义（P〈0．05）。结论PLK1基因在肝癌细胞增殖中具有重要的调控作用。PLK1-siRNA转染可明显抑制癌细胞增殖，诱导凋亡是其重要机制之一。

摘要：目的 观察肾移植患者与霉酚酸（MPA）作用位点相关的次黄嘌呤脱氢酶（IMPDH）基因多态性对急性排斥反应的影响.方法 对105例肾移植患者采用基因测序法进行IMPDH基因多态性检测,并随访统计上述患者移植后1年内急性排斥反应的发生率,按照IMPDH不同基因型分组,分析IMPDH基因多态性与移植后1年内急性排斥反应的相关性.结果 105例患者中,所测3个位点中IMPDH1 rs2278293 GG型35例（33.33％）,GA型49例（46.67％）,AA型21例（20.00％）;IMPDH1 rs2278294 GG型22例（20.95％）,GA型49例（46.67％）,AA型34例（32.38％）;IMPDH2 rs11706052 GA型14例（13.33％）,AA型91例（86.67％）.单因素分析显示肾移植后1年内IMPDH1 rs2278293、rs2278294位点GG型患者急性排斥反应的发生率明显高于GA＋AA型患者,差异有统计学意义（P＜0.05）.两位点联合分析显示GG-GG型患者移植后1年内急性排斥反应的发生率更高,与GA＋ AA型者比较差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 携带IMPDH1rs2278293、rs2278294的GA或AA型患者移植后1年内急性排斥反应发生率更低,对霉酚酸酯的治疗效果更好.

摘要：背景：前期实验已经证实30%心肌培养上清是诱导大鼠骨髓间充质干细胞分化为心肌样细胞的最佳浓度。目的：在前期实验基础上,观察30%心肌培养上清条件下诱导骨髓间充质干细胞分化为心肌样细胞的时间依赖效应。设计、时间及地点：对比观察,于2007-08/2008-06在徐州市心血管病研究所完成。材料：健康成年SD大鼠,体质量180-220g。方法：分离大鼠骨髓间充质干细胞和心肌细胞并在体外培养纯化。以1×10^8L^-1的细胞密度种植心肌细胞,培养72h后收集上清。将骨髓间充质干细胞的DMEM/F12培养基换为含有30%M199心肌细胞培养上清作为实验组,对照组仍将细胞接种在DMEM/F12培养基上继续培养。主要观察指标：30%心肌细胞培养上清诱导7,14,21d后,应用免疫细胞化学技术检测骨髓间充质干细胞中α-平滑肌肌动蛋白、β-肌动蛋白和心肌特异性肌钙蛋白T的表达。结果：30%心肌细胞培养上清诱导骨髓间充质干细胞后,细胞的形态没有改变,但与对照组相比,α-平滑肌肌动蛋白、β-肌动蛋白和心肌特异性肌钙蛋白T的表达均呈阳性,其中以第14天的蛋白表达量最高（P〈0.01）。结论：30%心肌细胞培养上清诱导骨髓间充质干细胞分化为心肌样细胞的最佳诱导时间是14d。

摘要：目的:本研究设计三维CT支气管血管成像(three-dimensional computed tomography bronchography and angiography,3D-CTBA)导航联合亚段切除术处理肺段间结节,和传统方法扩大肺段切除术相比较,评价其可行性。方法:回顾性研究本中心27例联合亚段切除术(combined subsegmentectomy,CSS)和21例扩大肺段切除术(extended segmentectomy,ES)治疗肺段间结节,肺段间结节的认定方法:在术前3D重建图像上确定结节与相关段间静脉的最小距离≤结节直径。CSS以肺结节和段间静脉为中心,解剖性切除分别属于不同肺段的2个相邻亚段。ES跨越段间交界,扩大切除一个肺段。两组手术均使用3D术前规划和术中导航,对比分析早期临床结果。结果:CSS组和ES组结节特征:直径、深度、所属肺叶、病理诊断、TNM分期无差异。CSS组平均切缘宽度大于ES组[(2.20±0.35)cm vs.(1.45±0.53)cm,P<0.001]。CSS组所有病例切缘宽度均符合要求:≥2 cm。ES组5例切缘不足,另有2例亚段支气管撕裂并发症,这7例结节的深度明显大于ES组其他14例结节[(2.20±0.39)cm vs.(1.35±0.51)cm,P=0.001]。两组手术时间、术中出血、术后胸管引流时间、住院时间、并发症无差异,无术后严重并发症和术后30 d死亡。结论:3D-CTBA导航胸腔镜联合肺亚段切除术治疗肺段间结节安全可行,较传统的扩大肺段切除术有更安全的切缘宽度,扩大肺段切除术不适合对深部肺段间结节的处理。

摘要：目的探讨不同细胞色素P4503A亚家族多肽5（CYP3A5）基因型与肾移植患者术后钙调磷酸酶抑制剂（CNI）他克莫司（Tac）的药物剂量和患者血清药物谷浓度之间的关系。方法对接受过肾移植的77例患者采用基因测序方法进行CYP3A5基因多态性检测，同时采用微粒酶联免疫法动态检测移植后7、14、21d．1、3、6、12个月Tac的血清药物谷浓度。按CYP3A5的不同基因型，比较各时间段组内不同CYP3A5基因型与血清药物谷浓度、用药剂量之间的相关性。结果77例肾移植患者中，CYP3A5＊1／＊1型8例（10．39%）、CYP3A5＊1／＊3型31例（40．26＊）、CYP3A5＊3／＊3型38例（49．35＊）。肾移植术后1个月内＋3／＊3型患者服用Tac的的血清药物谷浓度高于＊1／＊3型和＊1／＊1型（P〈0．05），而＊3／＊3型患者Tac的用药剂量则低于＊1／：it3型和＊1／＊1型（P〈0．05）；肾移植术后＊3／＊3型患者在3、6、12个月时的血药浓度高于＊1／女3型和＊1／＊1型患者，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论CYP3A5＊3／{3型患者在肾移植术后1年内使用较低剂量的Tac即可维持有效的血药浓度。

摘要：针对脑科医生对二维脑部图像通过想象建立起三维空间的立体结构缺乏直观性与准确性的缺陷,设计了基于Matlab GUI的脑胶质瘤三维显示辅助诊断系统软件。软件具有读取MRI原始数据、对脑部MRI图像的预处理、图像插值放大、图像分割和三维重建等功能。通过该软件,可以对脑部MRI图像进行合适的预处理,提取出脑部肿瘤组织区域,三维重建可以凸显肿瘤区域的位置、形状和大小。该软件界面友好,使用方便,为临床医生诊断脑胶质瘤与确定治疗区域提供了参考。

摘要：目的调查江苏省养老机构在新型冠状病毒疫情下的防控现状及卫生状况,为更好地落实国家关于新型冠状病毒疫情的工作部署和提高养老机构卫生状况与消毒质量提供依据。方法采用自行设计的调查方案及调查问卷于2020年10月-12月对江苏省养老机构进行调查,利用“问卷星”平台收集汇总调查结果,利用SPSS 23.0软件对结果进行统计分析。结果93家养老机构在配备防疫物资、进行室内通风、环境清洁消毒、工作人员口罩佩戴方面比例较高,医养结合型和非医养结合型养老机构除免洗手消毒液配备率差异有统计学意义(P<0.05),其他调查的项目比较差异均无统计学意义。在卫生状况监测方面,对719份环境物体表面的样本进行新型冠状病毒核酸监测,检测结果均为阴性;空气、物体表面、餐饮具、工作人员手等1750份样本平均合格率为75.09%,其中餐饮具的合格率最低,保健医生手与清洁人员手之间合格率差异有统计学意义(P<0.05)。医养结合型和非医养结合型养老机构空气的合格率差异有统计学意义(P<0.05),而物体表面、餐饮具、工作人员手合格率差异均无统计学意义。结论参照《关于印发重点场所重点单位重点人群新冠肺炎疫情防控相关防控技术指南的通知》要求,江苏省各养老机构对国家下发通知的落实情况有待加强,环境卫生状况需要改善,建议加强养老机构环境的监督管理,同时尽快出台养老机构消毒相关的国家标准和规范。

摘要：目的 改进颅内动脉瘤手术入路,以最小的创伤来取得动脉瘤显微手术的最佳疗效。方法 根据颅内动脉瘤所在位置,精确设计“锁眼”手术入路,以2 cm左右直径的骨窗进行颅内动脉瘤夹闭等手术。32例手术中,眶上额下经眉弓入路28例,翼点入路1例,乳突后入路2例,额部中线旁入路1例。结果 32例患者35个动脉瘤,行32次“锁眼”显微手术,共有33个动脉瘤行夹闭术,其中3例为多发性动脉瘤,予一次手术夹闭,另行动脉瘤孤立术、包裹术各1例。所有手术无术后感染、出血及脑脊液漏等手术并发症。结论“锁眼”手术创伤小,疗效佳,外观影响少,费用节省,是动脉瘤有效和理想的显微手术入路。

摘要：背景:BMI-1的表达对于维持干细胞特别是造血干细胞、神经干细胞、肿瘤干细胞的自我更新能力是不可缺少的。目的:以细菌内同源重组法构建携带BMI-1干扰基因的重组腺病毒载体,制备重组腺病毒pShuttle-H1-AdEasy-1-P1P2/P3P4。设计、时间及地点:开放性实验,于2006-02/2007-08在江苏大学医学技术研究所完成。材料:限制性内切酶由NewEngland BioLabs提供,腺病毒骨架质粒pAdEasy-1、大肠杆菌BJ5183、Ad293细胞由南京师范大学生科院分子医学生物技术江苏省重点实验室惠赠。方法:采用细菌内同源重组法构建RNA干扰腺病毒载体pShuttle-H1,PmeⅠ线性化质粒,通过同源重组腺病毒骨架蛋白pAdeasy-1,得到重组的腺病毒干扰质粒;经PacⅠ线性化后用脂质体转染方法转染293A细胞,收获腺病毒重组病毒子,以未转入小干扰RNA片段的重组质粒为对照,包装后收集细胞,反复裂解细胞获得腺病毒。主要观察指标:腺病毒质粒重组构建及鉴定情况。结果:经酶切鉴定,已成功构建siRNA的重组腺病毒表达载体pShuttle-H1-AdEasy-1-P1P2/P3P4,获得了重组病毒子。结论:利用新型腺病毒载体pAdeasy-1系统可在短期内制备BMI-1干扰基因的腺病毒表达载体,并制备出重组腺病毒P1P2/P3P4。

摘要：目的:对甲基化特异性PCR(methylation-specific PCR,MSP)引物设计进行探讨。方法:使用Methyl PrimerExpress Software Version 1.0软件、"methprimer"和"MSPprimer"的网上在线软件设计的引物以及参照国外文献的MSP引物对CCAAT/增强子结合蛋白ζ(CEBPζ),CCAAT/增强子结合蛋白δ(CEBPδ)、脆性组氨酸三联体(FHIT)和死亡相关蛋白激酶(DAPK)基因启动子进行MSP扩增,然后对其MSP产物进行测序验证以比较MSP引物设计的可靠性。结果:对于CEBPζ,CEBPδ,FHIT和DAPK启动子基因所设计的MSP引物经MSP后均获得了所需要的目的条带,但经测序鉴定Methyl Primer Express和methprimer设计的CEBPδ,CEBPζ-1的MSP扩增产物为假阳性产物,而MSPprimer设计的CEBPζ-2的MSP产物为正确序列。结论:MSP引物设计的质量是保证MSP扩增成功的关键因素。