摘要：分别在庚型肝炎病毒 （ＨＧＶ） 基因５′端非编码区 （５′ＵＴＲ）、非结构 （ＮＳ） ３ 区及非结构 （ＮＳ） ５ 区设计套式引物，建立逆转录套式聚合酶链反应（ＲＴｎｅｓｔｅｄ ＰＣＲ） 检测血清ＨＧＶ ＲＮＡ。在２９９份不同血清标本中ＨＧＶＲＮＡ 阳性者４１ 例，基于５′ＵＴＲ、ＮＳ３ 区及ＮＳ５ 区引物ＰＣＲ的阳性率分别为８７８％ 、８０５％ 和９７６％ 。本研究结果表明根据中国株ＨＧＶ基因ＮＳ５区部分序列设计引物建立的ＲＴｎｅｓｔｅｄ ＰＣＲ更灵敏、实用。可用于对ＨＧＶ 感染流行病学及临床的研究。

摘要：目的 建立一种能快速、准确检测环境中屋尘螨过敏原Der p 1基因的逆转录环介导等温扩增可视化(RT-LAMP)技术。方法 用Primer Explore 4.0对Der p 1基因进行RT-LAMP引物设计与筛选,提取屋尘螨、粉尘螨、热带无爪螨、腐食酪螨总RNA,利用优化的RT-LAMP反应体系分别扩增4个螨种的Der p 1基因,评价方法的特异度和灵敏度。采集74份哮喘患儿的床尘样品,提取总RNA进行Der p 1基因RT-PCR和RT-LAMP检测。结果 利用优化的RT-LAMP方法检测4种螨的Der p 1基因,只有屋尘螨阳性,琼脂糖凝胶电泳检测扩增产物呈现特征性梯形条带,肉眼和紫外灯下均观察到绿色荧光。建立的RT-LAMP对Der p 1基因的最小检测量为1.0×10^(-6 )μg,敏感性比常规RT-PCR高10倍;检测74份床尘样品,阳性率85.1%,与RT-PCR阳性率70.3%比较差异具有统计学意义(χ^(2)=4.72,P<0.05)。结论 建立的屋尘螨过敏原Der p 1基因RT-LAMP较常规RT-PCR灵敏度和特异性更高,可用于屋尘螨过敏原污染的快速检测。

摘要：【摘要】目的探讨肺癌患者血清／外周血单个核细胞（PBMC）mieroRNA（miltNAs）表达谱的变化及其意义。方法本研究属于临床病例对照研究。建立基于实时荧光定量PCR（RT-qPCR）技术检测miRNA的方法，对其进行定量研究；2011年11月至2012年9月收集苏州大学附属第一医院住院及门诊肺癌患者61例，肺部良性疾病及健康对照各48例，各组间性别、年龄匹配，年龄为64（40-85）岁；采用RT-qPCR技术检测血清及配对PBMC中miR．20a、miR-21、mitl-25、mitl-29a、miR-31、miR-126、miR-129、miR-145、miR-205的表达水平，以U6为内参，用F=2^△Ct法计算。其中△Ct=CtmiRNA-CtU6。F表示目标miRNA表达量相对于同一样本u6的变化倍数。采用SPSS19．0软件进行统计分析，两组样本的比较采用成组设计的两样本t检验，多组数据的比较采用单因素方差分析，若差异有统计学意义，多组数据两两间的比较采用S-N-K检验，两变量之间关系采用Pearson相关性分析，对各样本中u6的ct值是否相等作Brown-Forsythe检验。结果肺癌患者血清miR．20a（F=271．64，P〈0．01）、mill-21（F=2232．51，P〈0．01）、miR-205（F=45．13，P〈0．01）、miR-29a（F=19．98，P〈0．01）、miR-25（F=313．19，P〈0．01）、miR-126（F=32．38，P〈0．叭）与健康对照组、肺部良性疾病组之间差异有统计学意义，且其中miR-29a（健康对照组3．27±2．44，肺部良性疾病组3．19±0．32，肺癌组0．99±2．31）、miR-25（健康对照组3．88±0．62，肺部良性疾病组3．42±0．51，肺癌组1．79±0．37）、miR-126（健康对照组3．19±1．77，肺部良性疾病组2．67±1．55，肺癌组0．96±0．84）在肺部疾病恶性化发展中呈下调趋势；肺癌miR-31（比值=1．85，P〈0．01）与健康对照相比升高，miR．145（比值=-3．00，P〈0．05）则下降；不同分化程度的肺癌患者血清mill-31（F=5．22，P〈0．01）表达差异有统计学意义，中分化时期（1．40±0．39）表达最高；当全身转移（特别是骨转移）时，miR-31（无转移1．16±0．40，有转移1．03±0．24，P〈0．05）表达下降。在与肺癌患者血清配对PBMC中，mill-126（F=690．58，P〈0．01）、miR-129（F=26．66，P〈0．01）、miR-145（F=48．57，P〈0．01）、miR-205（F=308．61，P〈0．01）、mill-25（F=218．57，P〈0．01）、miR-31（F=48．05，P〈0．01）与健康对照组、肺部良性疾病组之间差异有统计学意义，且其中miR-25（健康对照组6．54±0．63，肺部良性疾病组5．82±0．51，肺癌组3．97±0．55）、mill-31（健康对照组4．26±0．43，肺部良性疾病组4．08±0．37，肺癌组3．43±0．38）在肺部疾病恶性化发展中呈下调趋势；肺癌miR-20a（比值=1．39，P〈0．01）、miR．29a（比值=1．42，P〈0．01）与健康对照相比均升高；当全身转移时，miR-21（无转移5．11±0．24，有转移5．28±0．24，P〈0．05）表达上升；患者miR-31血清和PBMC中的表达水平呈负相关（r=-0．369，P〈0．05）；血清miR-29a（S=0．968，P〈0．01）、miR-25（S=0．906，P〈0．01）、miR-126（S=0．969，P〈0．01）的t／OC曲线下面积有统计学意义。结论miRNA可能参与了肺癌转移的多个步骤，包括局部浸润、渗出血管或在远处的初步生存和转移灶生长等，也可能影响肺癌的预后。mittNA的检测可为肺癌的进展机制提供一个新的研究线索。

摘要：目的 :探讨心理因素与 2型糖尿病患病的关系。方法 :采用频数匹配病例对照研究设计 ,随机选择徐州市 2型糖尿病新诊断病例 185例、医院对照 2 0 1例和人群对照 197例 ,使用统一的调查表和“A型行为类型问卷”调查并进行单因素和多因素非条件logistic回归分析。结果 :在控制有关因素的基础上 ,A型行为类型 (OR =2 6 8,95 %CI为 1 5 9-4 49)、容易激动 (OR =1 97,95 %CI为 1 19-3 2 7)与 2型糖尿病患病存在显著性关联。结论 :A型行为类型和容易激动等心理因素可能是 2型糖尿病的危险因素。倡导健康合理的生活方式 ,培养良好的心理状态 ,是 2型糖尿病防治工作的一项措施。

摘要：设计了脉冲式NO吸入流量控制仪 ,对其工作原理进行了探讨 ,并进行了物理性能检测、动物实验及临床应用研究。物理性能检测结果表明 ,在不同压力下及不同释放量下NO实际释放量与理论释放量非常接近(p>0.05) ,均无统计学差异 ,能够达到临床应用要求。动物实验结果表明 ,吸入NO浓度与理论浓度相比偏低 ,但差异不显著(p>0.05)。16例PH病人吸入NO后平均PVR从617±*** -5降至417±*** -5(p0.01) ,但停止吸入NO后较短时间即回到基线。脉冲式NO吸入流量控制仪设计符合要求 ,可以被广泛地应用于临床及实验研究 ,从而为临床又提供了一个新的治疗途径。

摘要：TS基因5′非翻译区(5′untranslation region,5′UTR)增强子区域(TS enhancer region,TSER)存在28bp的2次(2R)、3次(3R)的串联重复多态,在3R等位基因第二次重复中还存在一个G→C的单核苷酸多态性(single nu-cleotide polymorphisms,SNPs),同时在3′非翻译区(3′untranslation region,3′UTR)存在6个碱基片段缺失/插入多态。这些多态形式的存在影响了TS基因mRNA的稳定和翻译效率,并可导致不同TS基因型肿瘤患者对以5-fuorouracil(5-FU)为基础的化疗疗效产生差异。为提高TS基因型临床检测的效率和准确性,方便、快捷、准确和自动化区分各种纯合及杂合基因型,设计多重PCR反应,同时扩增TS基因5′和3′非翻译区多态所处片段。利用DHPLC技术建立TS基因多态性检测平台,在非变性条件下,通过优化DHPLC洗脱梯度,同时检测5′TSER区的串联重复多态和3′UTR片段长度多态;在变性条件下,检测5′TSER区单核苷酸多态。同时采用PCR-RFLP和DNA测序方法,验证DHPLC分析结果。

摘要：目的观察小干扰RNA（siRNA）抑制大鼠垂体生长激素腺瘤细胞（GH3）中垂体特异转录因子．1（Pit-1）的基因表达对其生物学行为的影响。方法设计合成针对Pit-1基因的siRNA，经脂质体包裹转染GH3细胞。采用Westernblot、逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）法测定经siRNA转染24h后；Pit．1蛋白和Pit-1mRNA表达；用细胞计数试剂盒（CCK-8）细胞增殖-毒性检测法检测细胞生长增殖的变化；用流式细胞仪检测细胞凋亡的改变；制备Transwell小室测定GH3细胞体外侵袭能力的变化。结果siRNA显著地抑制Pit-1蛋白和Pit-1mRNA的表达水平，分别降低58．18％和75．82％；CCK．8法结果显示siRNA组细胞增长率明显低于与阴性对照组；流式细胞仪分析显示，siRNA组细胞凋亡率[（9．25000±0．99695）％]较阴性对照组[（2．89330±0．66516）％]增加；，siRNA组穿过Matrigel胶及滤膜的细胞数[（92．91±53．25）个]，与阴性对照组[（7．50±7．95）个]比较侵袭力明显减弱，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论Pit-1siRNA能够有效地抑制GH3细胞的生长、促进其凋亡，降低侵袭力。

摘要：种植牙植入方向的确定是关系到种植远期成功的重要因素之一。本研究提出一种基于咬合力中心重建模型的种植定向初步设计方法。利用患者的CT数据、牙颌石膏模型数据、咬合记录数据及咬合力测量数据，构建咬合力中心平衡模型，对患者种植区域咬合力进行定量化研究，完成种植植入方向的初步设计。本方法为种植定向设计提供了重要参照标准和力学理论依据，为进一步完善现有口腔种植系统外科导向模板设计提供了新思路。以1例三单位桥缺失患者和5例单冠缺失患者为试验对象，完成了种植定向设计过程及最终种植规划。实验结果显示，近远中向和颊舌向倾角偏差都小于10°-15°的平均种植方向调整量，验证了本方法的有效性和可行性。

摘要：目的了解南京市无偿献血人群知识、态度和行为的现状,为无偿献血员的招募及无偿献工作的改进提供科学依据。方法采用专门设计调查表,对随机选择自愿参加个人无偿献血人员共698人进行调查。结果698人中,54.2%的人为首次献血,学生群体多次献血比例明显低于非学生群体;无偿献血相关知识平均知晓率为54.6%;献血意向方面,92.1%的人愿意献血,61.6%愿意成为应急献血员,愿意捐献骨髓的人占30.3%。结论提高人群的无偿献血率,应有针对性地加大无偿献血相关知识宣传力度并正确引导,以保证临床用血安全。

摘要：目的探讨浅静脉干对远端蒂耳大神经营养血管皮瓣成活的影响。方法以30只日本大耳白兔作为实验对象随机分为3组:Ⅰ组静脉-神经组、Ⅱ组神经组及Ⅲ组对照组。另外2只日本大耳白兔作为实验对照。于兔耳根部中央区设计远端蒂皮瓣1.2cm×3.8cm,Ⅰ组保留静脉和神经;Ⅱ组保留神经;Ⅲ组动、静脉和神经均不保留,皮瓣制备完成后即刻原位缝合。术后1h对3组皮瓣进行组织学观察并测定皮瓣的丙二醛(MDA)含量。术后1周,测量3组皮瓣的成活面积。结果术后1h,各组皮瓣均出现不同程度的出血和水肿,其中I组反应相对较轻;MDA含量Ⅰ组与Ⅱ组间没有显著性差异,Ⅰ组与Ⅲ组、Ⅱ组与Ⅲ组间有显著性差异。术后1周,各组皮瓣的成活率以Ⅰ组最高。结论保留浅静脉干没有增加兔耳远端蒂耳大神经营养血管皮瓣的回流负荷,对皮瓣的成活有利。