摘要：文库筛选技术广泛应用于生命科学研究各领域,加速了生物医药基础科研和临床实践的进展。本文对基于CRISPR-Cas9的文库类型和应用进行综述。CRISPR-Cas9文库包括敲除、活化和抑制文库。敲除文库通过Cas9/sgRNA靶向切割DNA序列,产生移码突变进行基因敲除。活化文库包括两种:一种是dCas9/sgRNA与转录活化蛋白质融合,例如dCas9-SAM,dCas9-SunTag和dCas9-VPR系统;另一种是dCas9与表观遗传修饰酶融合,例如d Cas9-Tet1和d Cas9-p300系统。CRISPR-Cas9抑制文库通过dCas9与表观遗传修饰蛋白质融合,抑制转录,例如d Cas9-KRAB和d Cas9-Dnmt3a系统。目前,CRISPR-Cas9文库广泛用于功能基因筛选、药物靶点和耐药靶点筛选、病毒靶点筛选和揭示信号通路,并在基因互作筛选及揭示顺式调节元件功能等方面初步展现其优势。CRISPR-Cas9文库优势在于其设计灵活、操作便捷、筛选高效。伴随基因编辑系统的研发,新的筛选文库靶向性和突变将更加精准,应用将更加拓展和深化。基于CRISPR-Cas9筛选文库不仅可以筛选病理和生理过程中的关键基因和非编码DNA,还可以揭示其发挥功能的分子机制,是剖析生命复杂调控网络的手术刀。

摘要：目的了解南京地区青少年单纯性肥胖患病率,并进行相关危险因素分析,提出相应的干预措施。方法2016年10月,以南京市中学的在校学生为调查对象。采取整群抽样方法,随机抽选市区及郊区各一个区域,纳入共14所中学,将所选学校全部在校学生作为调查对象,共8695例。设计"青少年肥胖危险因素问卷调查表",调查学生基本情况、父母情况、饮食情况、运动情况、夜眠情况等,并对学生的身高、体重、腰围进行测量。采用体重指数(body mass index,BMI)作为结局变量,将学生分为正常体重组、超重组和肥胖组,分析超重及肥胖的影响因素。统计学分析采用χ^2检验和Logistic回归分析。结果有效问卷8522份(98.01%,8522/8695),超重及肥胖共1966例(23.07%,1966/8522)。男生与女生组的超重率、肥胖率比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。初中生肥胖率高于高中生(P0.05)。单因素分析结果显示,超重肥胖的中学生中,11项指标的比例高于正常体重组,3项指标的比例低于正常体重组(P<0.05)。以上述14个差异有统计学意义的变量为自变量,以是否有超重或肥胖为因变量,进行Logistic回归分析,结果显示,不吃早餐(OR=2.306)、父亲未接受过正规教育(OR=1.277)、母亲未受过正规教育(OR=1.196)、祖父母均肥胖史(OR=1.131)、父母均肥胖史(OR=1.113)、出生体重≥4000 g(OR=1.113)为超重肥胖的危险因素。每天吃蔬菜/水果的数量在5种及以上(OR=0.958)为超重肥胖的保护因素。结论南京市中学生超重、肥胖的现状较为严峻。家庭遗传、出生体重较高、不吃早餐等因素与超重肥胖密切相关,建立良好的生活行为及饮食习惯是干预肥胖的有力措施。

摘要：目的了解江苏省医疗卫生机构专业技术岗位设置情况,为健全和完善专业技术岗位管理提供依据。方法采用自行设计的医疗卫生机构专业技术岗位设置问卷,对全省医疗卫生机构进行调查,对照原国家卫生计生委出台的《事业单位岗位设置管理试行办法》及其实施意见、《疾病预防控制中心岗位设置管理指导意见》,以及《江苏省卫生事业单位岗位设置管理指导意见》等相关文件政策,分析评价医疗卫生机构专业技术岗位设置情况,尤其是专业技术高级岗位设置情况。结果江苏省绝大多数医疗卫生机构的专业技术岗位占比达到80%的要求,其中高级岗位比例均接近甚至超过规定范围的最大值,医疗卫生机构专业技术高级岗位数缺口严重。结论建议增加核定专业技术岗位数、提高高级岗位占比,并出台编外人员政策。

摘要：胰腺手术是肝胆胰外科常见手术,主要适用于胰腺的恶性肿瘤、神经内分泌肿瘤及有恶性倾向的囊性肿瘤;甚至某些胆管下段及十二指肠病变手术时也需切除部分胰腺。由于术后胰腺内分泌功能改变、药物代谢及应激反应等因素影响,患者术后血糖水平极易升高,并发糖尿病。不同于常规糖尿病护理,胰腺术后糖尿病患者自我依从性和家庭支持情况更差。由于患者出院后缺乏有效护理监测及术后胰腺内分泌功能改变,延续性护理变得尤为重要[1]。本研究回顾性分析本院收治的胰腺术后糖尿病患者的临床资料,旨在探究三级医院联合基层医疗机构及患方组成对护理小组在胰腺术后糖尿病患者中的运用价值。

摘要：本文通过介绍苏州市公共卫生基础平台的建设与实践,阐述了苏州市公共卫生基础平台的整体设计、业务流程和应用案例等基本情况,实现了不同公共卫生业务应用系统之间的数据共享和业务协同,对促进公共卫生信息化建设发挥了重要作用,有效提高了公共卫生服务和管理水平。

摘要：目的建立基于AllGlo探针Real—time RT—PCR技术检测发热伴血小板减少综合征病毒（SFTSV）的方法。方法根据SFTSV基因组S片段的相对保守序列设计引物和AllGlo探针，建立和优化Real—time RT—PCR反应体系，对其敏感性、特异性和稳定性进行评价，并检测临床疑似SFTSV病例标本，与普通RT—PCR法、病毒分离法和抗体检测法进行比较。结果 所建立AllGlo探针Real—time RT—PCR法检测SFTSV核酸，标准曲线方程为Y=3．38x＋46．03（Y为ct值，z为核酸拷贝数log值），r2〉O．998，扩增效率为97．6％，Ct值变异系数（CV）均〈1．2％，检测限为1．00×10^3copy／mL。与汉坦病毒、H1N1、H3N2、登革病毒1～4型均无交叉。检测362份疑似病例标本，SFTSV核酸阳性检出率11．9％，高于普通RT-PCR法、病毒分离法和抗体检测法（P值均d0．05）。结论建立的AllGlo探针Real—time RT-PCR法，操作简单、快速，灵敏性、特异性较高，可用于SFTSV核酸检测。

摘要：目的建立幼兔桡骨不同尺寸骨缺损模型,确定幼兔桡骨临界性骨缺损长度。方法选取健康3月龄雄性新西兰兔20只(2.2~2.5 kg),采用左右侧配对设计的方法在双侧桡骨中段分别制作15 mm及20 mm桡骨骨缺损模型,按骨缺损长度分为A组(15 mm)及B组(20 mm),每组各20侧。分别于术后第1天,术后第4、8、12周行CT检查,应用CT-Hedberg评分评估骨愈合情况。于术后12周处死所有实验兔,取出尺桡骨标本,通过大体观察及HE染色组织学观察分析缺损区骨愈合情况。结果术后实验兔均存活,术后第12周大体观察:A组19例(95%)桡骨断端有连续性骨痂生成,新生骨表面光滑,塑形良好;B组缺损断端髓腔封闭,缺损区由纤维组织填充。术后第12周CT图像可见A组皮质骨塑性完全,B组断端及缺损尺侧均有新骨生成,髓腔封闭。术后各时间点CT-Hedberg评分:A组(3.0±0.6,3.9±0.3,4.0±0.2)与B组(1.6±0.5,2.7±0.6,2.9±0.6)间差异有统计学意义(P<0.05)。组织学结果:A组缺损已修复完全,新生骨组织内可见血管再生,B组缺损区由纤维组织填充。结论在进行幼龄兔骨缺损研究时,可选择3月龄雄性新西兰兔桡骨干构建20 mm长骨缺损。

摘要：目的对宫内节育器严重伤害事件报告表进行质量评估,探讨影响因素,以期提高报告质量。方法按照国家药品不良反应监测中心制定的质量评估标准对国家卫生计生委计划生育药具不良反应监测中心(简称"中心")2015年7月~2016年6月收集到的263份严重伤害事件报告表逐一评分,构建数据库,采用SPSS 19.0软件进行对分值进行描述并对不同特征报告的质量情况进行比较。结果报告整体质量较好,失分项目以报告时限、对受害者的影响、产品编号或批号、生产日期为主,监测点类别、有无医学资料佐证、不良事件主要表现对报告质量有显著影响(P<0.01)。结论应针对评估中发现的问题,有目的、有重点地予以改进,强化业务培训,加强信息登记管理,细化报告要求,拓宽报告渠道,进一步提升报告质量。

摘要：目的:探讨线粒体裂变调节因子1(mitochondrial fission regulator 1,MTFR1)在乳腺癌组织中的表达及临床意义。方法:应用TCGA门户网站cBioPortal分析浸润性乳腺癌组织中MTFR1基因突变、拷贝数变化、mRNA表达变化以及mRNA差异表达与预后的关系;应用UALCAN分析浸润性乳腺癌与正常组织中MTFR1的表达差异;应用LinkedOmics分析浸润性乳腺癌中MTFR1基因表达与临床指标的相关性,基因拷贝数和甲基化水平变化对MTFR1表达的影响。结果:cBioPortal分析表明32%(345/1 093)浸润性乳腺癌样本发生MTFR1基因改变,包括突变、拷贝数变化和mRNA水平变化,其中MTFR1 mRNA水平上调超过阈值(EXP≥2)比例为29%(319/1 093),且MTFR1高表达不利于患者预后(P<0.01);UALCAN分析表明浸润性乳腺癌中MTFR1 mRNA水平显著高于正常组织(P<0.01);LinkedOmics分析表明浸润性乳腺癌中MTFR1 mRNA水平分别受到人表皮生长因子受体2、雌激素受体、病理分期、PAM50分期、组织学类型及种族的显著影响(P<0.01)。最后,MTFR1 mRNA水平与其基因拷贝数变化正相关(P<0.01,相关系数为0.699 4),而与其DNA甲基化水平负相关(P <0. 01,相关系数为-0. 342 9)。结论:MTFR1在乳腺癌组织中高表达,且不利于乳腺癌患者预后,可作为乳腺癌患者预后的潜在标志物。

摘要：目的:了解孕前妇女对艾滋病、梅毒和乙型肝炎(简称“三病”)母婴阻断服务的认知需求。方法:随机整群抽取江苏省3个县(区/市)参加孕前健康检查的妇女480例,进行“三病”母婴阻断服务的认知及需求调查。结果:孕前妇女对相关检测和相关干预服务的知晓率分别为50.8%和36.7%。孕前妇女对“三病”母婴阻断服务的宣教时间以婚前、孕前检查占比为最多(94.2%);宣教内容以预防知识占比最多(86.5%);宣教形式以网络和移动网络(微信)占比最多(81.9%)。服务需求方面要求保护个人隐私占比居首位(87.9%)。结论:孕前妇女对于“三病”母婴阻断的相关认知缺乏,亟需服务供给,应继续开展有针对性的健康宣教,提供专业技术服务,促进母婴健康。