摘要：目的 观察对氧磷酶1（PON1）基因过表达对急性敌敌畏中毒所致小鼠膈肌细胞损伤的影响.方法 常规培养小鼠膈肌细胞,转染过表达慢病毒载体,将细胞分为正常对照组,敌敌畏（DDVP）组,LV-GFP＋ DDVP组,LV-PON1＋ DDVP组,CCK-8法检测细胞存活率、流式细胞术检测细胞的凋亡情况、RT-PCR及Western印迹法检测小鼠膈肌细胞PON1和Nrf2mRNA及蛋白的表达情况、ELISA法检测细胞乙酰胆碱酯酶（AchE）、血红素氧合酶1（HO-1）、醌氧化还原酶1（NQO-1）水平,化学比色法检测细胞内超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）活力及丙二醛（MDA）水平.结果 0、80、160、320、640 μmol/L DDVP诱导小鼠膈肌细胞24 h后,细胞的生存率分别为（100±3.82）％、（82.13 ±2.60）％、（53.57±5.05）％、（30.77±3.30）％、（14.20 ±2.19）％,呈浓度依赖性;以160μmol／L DDVP分别诱导小鼠膈肌细胞0、6、12、24 h后,细胞的存活率分别为（100.17±2.74）％、（76.13±6.01）％、（66.53±3.55）％、（53.57±5.05）％,呈时间依赖性（P＜0.05）.LV-PON1组细胞PON1蛋白表达高于空白对照组（0.370±0.015与0.232 ±0.004,0.197±0.015与0.037±0.003,P＜0.05）.DDVP诱导后,不同时间点LV-PON1组细胞存活率高于DDVP组（P＜0.05）.诱导24 h,LV-PON1组凋亡率及MDA含量低于DDVP组（P＜0.05）.LV-PON1组AchE水平、PON1和Nrf2蛋白表达水平、SOD和CAT、HO-1和NQO-1水平均高于DDVP组（P＜0.05）.结论 PON1基因过表达可以有效减轻DDVP对小鼠膈肌细胞AchE的抑制作用,可以诱导Nrf2的表达,发挥抗氧化作用,从而保护小鼠膈肌细胞.

摘要：目的 探讨生长抑素（SST）对内毒素致急性肺损伤（ALI）小鼠炎症反应的影响及其机制.方法 将72只SPF级雄性ICR小鼠按随机数字表法分为对照组、SST对照组、模型组和SST干预组,每组18只.采用腹腔注射内毒素40 mL/kg制备ALI模型,对照组则给予等量生理盐水;SST干预组于制模后0.5、2、6、12h皮下注射SST（20 μg,20 mL/kg）.各组于首次给药后3、8、16h分别取6只小鼠取血后活杀,用烘干法测定肺组织湿/干质量（W/D）比值;光镜下观察肺组织病理学改变;用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测血清SST、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素（IL-6、IL-10）的含量;采用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）及蛋白质免疫印迹试验（Westem Blot）检测肺组织Toll样受体4（TLR4）和核转录因子-κBp65（NF-κBp65）的mRNA及蛋白表达.结果 对照组与SST对照组小鼠各指标比较差异均无统计学意义.与对照组比较,模型组肺组织W/D比值,血清SST、TNF-α、IL-6、IL-10水平,肺组织TLR4、NF-κBp65的mRNA及蛋白表达均明显升高,其中W/D比值、IL-6、IL-10及TLR4的mRNA和蛋白表达均于16h达峰值[W/D比值：6.32±0.18比4.14±0.14,IL-6（ng/L）：673.78±56.13比50.17±7.06,IL-10（ng/L）：481.13±40.78比61.71±10.05,TLR4 mRNA：0.740±0.099比0.183±0.021,TLR4蛋白：0.935±0.067比0.222±0.019,均P＜ 0.05],SST、TNF-α及NF-κBp65的mRNA和蛋白表达均于8h达峰值[SST（ng/L）：254.97±38.75比95.87±13.95,TNF-α（ng/L）：139.69±19.06比21.90±4.52,NF-κBp65 mRNA：0.753±0.065比0.208±0.029,NF-κBp65蛋白：1.214±0.079比0.303±0.067,均P＜0.05].与模型组比较,SST干预组小鼠肺组织损伤程度明显减轻,除血清SST呈持续增加趋势外,其余指标均明显降低[16 h W/D比值：5.21±0.14比6.32±0.18,8 h TNF-α（ng/L）：80.48±8.52比139.69±19.06,16 h IL-6（ng/L）：394.99±37.17比673.78 ±56.13,16 h IL-10（ng/L）：326.95±36.41比481.13±40.78,16 hTLR4 mRNA：0.240±0.028比0.740±0.099,16 h TLR4蛋白：0.618±0.066比0.935±0.067,8 h NF-κBp65mRNA：0.240±0.045比0.753±0.065,8 h NF-κBp65蛋白：0.784±0.041比1.214±0.079,均P＜0.05].结论 SST干预后对内毒素诱导的ALI小鼠炎症因子释放及组织因子基因、蛋白表达均起到明显的抑制作用;其机制可能是通过阻断TLR4-NF-κB信号通路,从而减轻肺组织炎症反应.

摘要：目的：探讨调控对氧磷酶1（PON1）基因对急性敌敌畏中毒小鼠肝组织氧化损伤的保护作用。方法实验1：将12只雄性Balb/c小鼠按随机数字表法分为对照组、对照绿色荧光蛋白慢病毒（Lv-GFP）组、重组PON1慢病毒（Lv-PON1）组3组，每组4只。经尾静脉分别注射转染2＆#215;107 TU的Lv-GFP或Lv-PON1慢病毒，对照组给予等量生理盐水。分别于0、1、3、5、7、9 d取眼底静脉血，检测血清PON1活性；转染3 d取肝组织，分别用反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）和蛋白免疫印迹试验（Western Blot）检测PON1 mRNA和蛋白表达。实验2：另将96只雄性Balb/c小鼠按随机数字表法分为对照组、敌敌畏染毒组、Lv-GFP干预组、Lv-PON1干预组4组，每组24只。经尾静脉分别注射转染Lv-GFP或Lv-PON1慢病毒后3 d，腹腔注射敌敌畏溶液9 mg/kg染毒，对照组给予等量生理盐水。各组分别于染毒后6、12、24、48 h麻醉处死6只小鼠取肝组织，RT-PCR检测PON1 mRNA、核转录因子E2相关因子2（Nrf2） mRNA表达；Western Blot检测PON1蛋白表达；化学比色法检测丙二醛（MDA）、谷胱甘肽（GSH）含量；双抗夹心酶联免疫吸附试验（ELISA）检测超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）活性。结果实验1：Lv-PON1转染正常小鼠后，血清PON1活性逐渐升高，自3 d起维持在较高水平；而对照组和Lv-GFP组血清PON1活性均处于正常低水平状态。转染3 d肝组织PON1 mRNA和蛋白表达均显著高于对照组和Lv-GFP组。实验2：与对照组相比，敌敌畏染毒组染毒后6 h肝组织PON1 mRNA和蛋白表达、 Nrf2 mRNA表达、GSH、SOD、CAT水平即明显降低〔PON1 mRNA（灰度值）：0.237±0.075比0.674±0.011，PON1蛋白（灰度值）：0.602±0.086比0.998±0.124，Nrf2 mRNA（灰度值）：0.089±0.012比0.126±0.010，GSH（mg/g）：3.84±0.33比5.52±0.40，SOD（μg/g）：0.383±0.040比0.564±0.052， CAT（ng/g）：7.32±1.28比12.46±1.54，均P＜0.05〕，MDA含量明显升高（nmol/g：7.78±0.41比2.34±0.25， P＜0.05）；随时间延长，PON1 mRNA和蛋白表达、Nrf2 mRNA表达、GSH、SOD、CAT水平逐渐升高，MDA含量逐渐降低，至24 h时Nrf2 mRNA表达已升至对照组水平（0.133±0.019比0.126±0.009，P＞0.05），48 h时已明显高于对照组（0.206±0.028比0.124±0.010，P＜0.05）。与敌敌畏染毒组比较，Lv-PON1干预组6 h时肝组织PON1 mRNA和蛋白表达、 Nrf2 mRNA表达、 GSH、 SOD、 CAT水平即明显升高〔PON1 mRNA（灰度值）：0.726±0.021比0.237±0.075， PON1蛋白（灰度值）：0.739±0.050比0.602±0.086，Nrf2 mRNA（灰度值）：0.158±0.007比0.089±0.012，GSH（mg/g）：4.30±0.22比3.84±0.33，SOD（μg/g）：0.454±0.062比0.383±0.040， CAT（ng/g）：8.98±1.02比7.32±1.28，均P＜0.05〕，MDA含量即明显下降（nmol/g：6.56±0.44比7.78±0.41，P＜0.05）。结论调控PON1能够降低敌敌畏中毒小鼠肝组织MDA含量，增强SOD、 CAT活性，升高GSH含量，并可能通过启动Nrf2抗氧化程序增强抗氧化能力，对急性敌敌畏中毒小鼠肝损伤发挥保护效应。

摘要：目的探讨创伤弧菌脓毒症大鼠脑组织转位蛋白（TSPO）基因和蛋白表达及促／抗炎因子的蛋白表达，并观察抗菌药物头孢哌酮钠联合左氧氟沙星的干预效应。方法SD大鼠100只，随机（随机数字法）分为健康对照组（A组，n=10）、创伤弧菌脓毒症组（B组，n=40）和抗菌药物干预组（C组，n=40），抗菌药物对照组（D组，n=10）。大鼠左后肢皮下注射创伤弧菌（6×10^8cfu／ml，0．1ml／100g）制作脓毒症大鼠模型，腹腔注射头孢派酮钠180ms／kg和左氧氟沙星18ms／kg进行干预，以RT—PCR、Western blotting、免疫组化、ELISA等方法观察大鼠染菌后6、12、24、48h脑组织TSPO表达、促／抗炎因子水平及电镜的特点。结果与A组比较，B组大鼠脑组织TSPO表达水平6h即明显增高（P〈0．05），24h达峰值。C组大鼠12、24、48h脑组织TSPO表达水平均明显低于相同时间点B组大鼠（P〈0．05）。B组大鼠脑组织各时间点TNF-α、IL-6、IL-10水平均比A组明显升高（P〈0．05），其中TNF-α在6h达峰值，IL-6 12h达峰值，IL-10则48h达峰值。与B组相同时间点比较，C组大鼠6、12、24h时点脑组织TNF-α水平明显下降（P〈0．05），12、24、48h时间点脑组织IL-6水平亦明显下调（P〈0．05），而IL-10水平在各时间点均较B组明显升高（P〈0．05）。免疫组化法观察B组大鼠脑组织TSPO蛋白棕黄色颗粒密集较多，C组棕黄色颗粒较B组减少；电镜下B组大鼠脑组织神经元细胞核溶解消失，细胞及细胞器肿胀明显，C组大鼠脑组织神经元细胞核部分溶解，形态尚存，细胞及细胞器水肿减轻。结论创伤弧菌脓毒症大鼠脑组织TSPO的表达随着脑组织炎症、病理进展逐渐增高，能敏感反映脑损伤的变化。使用头孢哌酮钠和左氧氟沙星能有效减轻脑组织炎症损伤，降低TSPO的水平。

摘要：织纹螺俗称乌螺，是我国沿海一带人们喜食的海产品，由此发生食用织纹螺中毒的事件时有发生，发病急，进展快，严重中毒者可致死亡1。2012年7月9-10日，浙江省温州市发生居民因食用农贸市场销售的纹织螺，致使21人中毒事件，经我院及时抢救，1例死亡，20例康复出院。我们结合本次纹织螺中毒的流行病学调查，将其临床特征及救治报告如下。

摘要：目的 探讨降钙素原（procalcitonin，PCT）对脓毒症患者病情及预后的临床价值，及其与急性生理学与慢性健康状况Ⅱ评分（APACHEⅡ评分）的相关性。方法 回顾性分析2013年1月1日至2014年12月31日收住本院急诊科（包括普通病房及急诊重症监护室EICU）、感染科的109例脓毒症患者的临床资料（包括入院24 h内PCT值、白细胞计数WBC及中性粒细胞百分比Neut%、APACHEⅡ评分等）。据患者病情严重程度（脓毒血症组、严重脓毒症组和脓毒性休克组）、临床结局（存活组和死亡组）及多器官功能障碍综合征MODS（MODS组和非MODS组）不同进行分组，比较各组中各指标差异，分析PCT与APACHEⅡ评分两者之间的相关性，评价PCT、APACHEⅡ评分和APACHEⅡ评分＋PCT在评估患者预后及多器官功能障碍综合征中的价值，及分析PCT对脓毒症患者预后的独立效应及脓毒症患者预后的影响因素。结果 脓毒血症组中PCT值、APACHEⅡ评分均低于严重脓毒症组和脓毒性休克组，严重脓毒症组均低于脓毒性休克组，三组之间差异均有统计学意义（P〈0.05）。脓毒血症组中WBC明显低于脓毒性休克组（P〈0.05）。死亡组较存活组中的APACHEⅡ评分显著升高，差异有统计学意义（P〈0.01），而PCT值、WBC、Neut%在两组间则差异无统计学意义。非MODS组中APACHEⅡ评分、WBC、Neut%、PCT值均显著低于MODS组（均P〈0.05）。PCT与APACHEⅡ评分之间呈显著正相关关系（rs=0.403，P〈0.01）。通过绘制PCT、APACHEⅡ评分、APACHEⅡ评分＋PCT三者的受试者工作曲线（ROC）来评估脓毒症患者预后情况，得出三者的ROC曲线下面积（AUC）分别为0.617、0.899、0.917，而APACHEⅡ评分、APACHEⅡ评分＋PCT的预后评估价值均较PCT高（均P〈0.01），且PCT、APACHEⅡ评分的截断值（cut-off）、灵敏度、特异度分别为（3.40 ng/mL、88.24%、38.04%）和（20分、94.12%、81.52%）。同样PCT、APACHEⅡ评分、APACHEⅡ评分＋PCT三者评估脓毒症患者多器官功能障碍综合征的AUC分别为0.824、0.796、0.871，PCT分别与APACHEⅡ评分、APACHEⅡ评分＋PCT间差异无统计学意义，且PCT、APACHEⅡ评分的截断值、灵敏度、特异度分别为（7.26 ng/mL、88.24%、63.79%）和（17分、64.71%、87.93%）。PCT对脓毒症患者预后的COR、AOR分别为1.008、1.014，性别与APACHEⅡ评分是影响脓毒症患者预后的独立危险因素。结论 PCT值、APACHEⅡ评分能评估脓毒症患者病情，三者间均呈正相关关系。APACHEⅡ评分、APACHEⅡ评分＋PCT较PCT能更好评估患者预后，且PCT不能作为预后评估的独立指标；而PCT、APACHEⅡ评分、APACHEⅡ评分＋PCT对脓毒症患者多器官功能障碍综合征的评估效能均较好。PCT研究需考虑混杂因素，性别与APACHEⅡ评分是脓毒症患者预后的两个独立危险因素。

摘要：目的比较丙泊酚、咪达唑仑及两药联用在急诊危重病患者机械通气中的镇静效果。方法回顾性分析2007年8月至2011年7月在本院急诊重症监护病房（EICU）接受机械通气同时需要镇静治疗的68例患者临床资料，根据镇静剂种类不同分为丙泊酚组（28例）、咪达唑仑组（20例）、丙泊酚联合咪达唑仑组（联用组，20例）。丙泊酚组和咪达唑仑组按常规镇静方法分别给予负荷量的丙泊酚、咪达唑仑，随后用微量注射泵持续泵入；联用组先以丙泊酚静脉推注诱导镇静，随后以丙泊酚联合咪达唑仑用微量注射泵持续泵入。采用Ramsav镇静分级，3组患者均维持理想的镇静深度2～4级，镇静开始后每1～2h评估1次。观察各组患者用药前后生命体征及呼吸机相关参数的变化，并记录镇静剂及机械通气治疗情况。结果3组患者用药1h后心率（HR）、自主呼吸频率（RR）、收缩压（SBP）、舒张压（DBP）、潮气量（V_T）均较用药前显著降低，脉搏血氧饱和度（SpO2）均较用药前显著升高；RR、SpO2变化程度无显著差异。用药1h，丙泊酚组HR（次／min）、SBP（mmHg，1mmHg=0．133kPa）、DBP（mmHg）降低程度较咪达唑仑组和联用组显著（HR：20．43±13．52比15．27±13．71、18．54±10．07，SBP：39．26±16．64比25．80±21．09、31．50±28．20，DBP：21．35±12．91比14．07±10．53、16．42±13．55，P〈0．05或P〈0．01），联用组V，（m1）降低程度较丙泊酚组和咪达唑仑组显著（121．06±96．50比33．36±28．49、39．94±33．24，均P〈0．01）。联用组镇静剂总用量（mg／奴）较丙泊酚组、咪达唑仑组明显减少（丙泊酚总用量：25．21±15．33比90．83±17．42，咪达唑仑总用量：2．37±1．87比4．02±3．62，均P〈0．01），但3组镇静剂持续应用时间无明显差异。联用组EICU滞留时间（d）较丙？白酚组、咪达唑仑组明显缩短（7．75±5．20比12．53±8．24、15．20±8．33，均P〈0．05），但3组机械通气时间无明显差异。结论丙泊酚联合咪达唑仑用于急诊危重病机械通气患者不仅能达到良好的镇静效果，减少镇静药物的总用量，还能减轻丙泊酚对循环的抑制作用，改善患者人机对抗的症状，缩短在EICU的住院时间。

摘要：目的 探讨姜黄素对急性百草枯中毒大鼠肝组织氧化应激损伤的疗效和作用机制.方法 60只大鼠随机分为正常对照组（生理盐水）,姜黄素对照组（姜黄素50 mg/kg）,百草枯染毒组（百草枯100 mg/kg）,姜黄素干预组（百草枯染毒后15 min、24 h、48 h,腹腔注射姜黄素50 mg/kg）,每组15只.不同处理后1、3、7 d取肝组织,化学比色法检测肝组织匀浆丙二醛（MDA）含量,超氧化物歧化酶（SOD）,过氧化氢酶（CAT）活力;双抗夹心酶联免疫吸附法（ELISA）检测血红素氧合酶-1（HO-1）、醌氧化还原酶-1（NQO-1）活力;反转录-聚合酶链式反应（RT-PCR）法检测核因子E2相关因子2转录因子（Nrf2）mRNA表达,蛋白免疫印迹法（Western blot）检测Nrf2蛋白表达,光学显微镜下观察肝组织病理变化.结果 与正常对照组比较,姜黄素对照组各项观察指标无明显变化,差异均无统计学意义（P〉0.05）.与正常对照组比较,百草枯染毒组和姜黄素干预组MDA含量均升高,SOD、CAT活力均降低,HO-1 、NQO-1活力升高,Nrf2 mRNA和蛋白表达均升高,除第7天百草枯染毒组HO-1活力外,差异均有统计学意义（P＜0.05）.与同时间点百草枯染毒组比较,姜黄素干预组在第1、3、7天,MDA含量明显降低,SOD、CAT、HO-1、NQO-1活力明显升高,Nrf2 mRNA和蛋白表达明显升高,差异均有统计学意义（P＜0.05）.光学显微镜下可见,百草枯染毒组大鼠肝组织在染毒后第3天,病理损害最严重,各个时间点姜黄素干预组病理损害都较同时间点百草枯染毒组有所减轻.结论 姜黄素通过诱导Nrf2的表达,升高HO-1 、NQO-1、SOD、CAT活力,降低MDA含量,提高肝组织细胞的抗氧化应激能力,对急性百草枯所致的肝损伤有一定的保护作用.

摘要：【摘要】目的探讨百草枯（paraquat，PQ）中毒的小鼠肺组织中血红素加氧酶1（heineoxygenase1，HO-1）、醌氧化还原酶1（NAD（P）H：quinineoxidoreductase1，NQ01）和核因子E2相关因子2转录因子（nuclearfactorerythroid2-relatedfactor2，Nrf2）的变化及生长激素释放肽（ghrelin）对PQ中毒小鼠急性肺损伤的保护效应。方法50只清洁级ICR小鼠按随机数字表法分为正常对照组（10只）、PQ染毒组（10只）、16．58、33．15、49．73μg／kg生长激素释放肽干预组（30只），PQ（20mg／kg）染毒方式及生长激素释放肽干预均通过腹腔内注射实现；取各组小鼠肺组织，HE染色，光学显微镜下观察小鼠肺组织病理学变化，蛋白免疫印迹法westernblot）检测核内Nrf2蛋白水平的改变，双抗夹心酶联免疫吸附法（ELISA）法测定肺组织HO．1、NQ01活力变化，化学比色法检测丙二醛（malondiadehyde，MDA）蛋白含量、髓过氧化物酶（myeloperoxidase，MPO）活力。另将40只小鼠分为PQ染毒组（10只）、16．58、33．15、49．73μg／kg干预组（各10只），处理同上，记录72h内各小鼠死亡时间和临床表现。结果与正常对照组比较，PQ染毒组核内Nrf2蛋白增加，HO-1、NQ01及MPO活力明显升高，MDA含量升高，差异均有统计学意义（P〈0．05）。与P0染毒组比较，干预组核内Nrf2蛋白明显增高，HO-1、NQ01活力明显升高，MDA含量和MPO活力降低，差异均有统计学意义（P〈0．01）。PQ组在染毒后肺组织损害明显，干预组肺损害较之有所减轻。干预组小鼠死亡率明显低于PQ染毒组，其中高剂量干预组与PQ染毒组的差异有统计学意义（P〈0．05）。结论生长激素释放肽能上调PQ染毒小鼠核内Nrf2的蛋白表达，增加140-1、NQ01活力，降低MPO活力，减少MDA含量，对PQ中毒小鼠急性肺损伤有保护作用。

摘要：目的探讨群体性急性间二硝基苯中毒应急机制，总结救护和组织管理经验，为临床救治提供指导。方法收集本次间二硝基苯中毒患者的病例资料，总结并分析其临床特点、救治措施和组织管理。结果9例中毒患者来院后立即启动急诊科重大突发事件救援紧急预案、护理人员快速准确的分诊、医院分管院长统一指挥、调度人员及抢救物品和药品。急诊科中毒救治组集中收治患者，统一制定治疗和护理方案。所有患者经过3周的救治和护理全部痊愈出院。结论急诊医护人员熟悉重大突发事件救援的处理流程，统一调配人员，抢救物资储备充足，对急性间二硝基苯中毒规范救护等是抢救成功的重要环节。