摘要：为了促进开发大肠杆菌O157∶H7快速检测适体生物传感器,对其鞭毛蛋白紧密黏附素以肠致病性大肠杆菌紧密黏附素为模板,进行空间结构同源建模并作为目标抗原,用不同对接方法模拟预测研究比较其与随机RNA序列的相互作用。方法可行性通过模拟研究已知亲和性同一RNA适体与不同物种凝血酶相互作用论证。结果表明,不同随机RNA序列与不同菌株的紧密黏附素空间相互作用的位点预测有一定差异,说明针对不同蛋白质进行高亲和适体筛选具有一定的可行性。分子对接研究表明因不同长度RNA所形成空间结构不同,而与大肠杆菌O157∶H7紧密黏附素结合位点存在一定差异、与PRIdictor预测位点结果接近;具有不同RNA结构模体的片段对紧密黏附素的亲和力不同,有从不同片段中筛选高亲和力的RNA适体的可能。分子模拟进一步研究RNA-紧密黏附素相互作用的方法具有一定的可行性,将有助于进一步通过设计合成RNA改进适体筛选、研发的相关生物技术推广,以及应用创新。

摘要：随着城市环境问题的日益突出,建立宁波市绿地空间分布信息系统有重要的意义。本文应用RS与GIS等现代技术最新理论和方法对宁波市绿地空间分布进行分析,提出宁波市绿地空间分布GIS的体系结构,详细设计了系统的实现技术路线和途径。

摘要：通过慢病毒载体介导的RNA干扰(RNAi)技术,沉默成人T细胞白血病(ATL)中关键的病毒基因HBZ,并研究RNA干扰后对白血病细胞增殖的影响.首先根据HBZ基因序列设计RNA干扰片段,构建其慢病毒载体,并将其包装成病毒.然后用HBZ siRNA慢病毒感染白血病细胞株TL-Om1,通过RT-PCR和Western blot检测HBZ基因和蛋白表达情况,MTT技术检测沉默HBZ后TL-Om1细胞的增殖情况,利用RT-PCR检测病毒感染后下游生长相关基因的表达.实验结果表明:利用慢病毒介导的RNA干扰技术能有效降低HBZ的表达,进而抑制了白血病细胞的增殖;沉默HBZ后,细胞内E2F1,PCNA和Myc等下游生长相关基因的表达受到了明显抑制.这将为慢病毒介导的RNA干扰技术应用于临床治疗成人T细胞白血病提供重要的实验依据.

摘要：近年来,连续生物加工备受各界关注,在生物制药等领域中的应用越来越广泛。阐明连续生物加工技术在生物制药领域中的发展历程、进展及其在单克隆抗体等产品生产中的应用,对于生物制药发展具有重要的指导意义和参考价值。分析连续生物加工相对于传统批次处理的优势和存在的问题,以及未来在制药行业的机遇与面临的挑战,可以为连续生物加工的研究和产业发展提供参考。克服连续生物加工技术的不足并充分发挥其优势,对于生物制药等领域的发展具有重要意义。随着现代生物工业对灵活性和均一性等的持续追求,连续生物加工必将在生物制药等生物技术领域发挥更大的作用。

摘要：为了促进开发大肠杆菌快速检测适体生物传感器,通过对已知RNA-蛋白质相互作用原理和复合物结构的分析,在对相关文献资料和基于分子模拟技术的网络资源充分了解的基础上,模拟预测研究了随机RNA序列与肠致病性大肠杆菌紧密黏附素蛋白的相互作用。结果表明,RNA高级结构主要依赖于其一级结构的序列信息。NPDock模拟不同随机RNA序列与紧密黏附素相互作用时,不同长度RNA序列均可与紧密黏附素发生相互作用,但作用位点和相互位置有一定差异;对于相同长度不同排布的RNA序列,相互作用的差异性主要与序列排布信息有关。对于分子模拟研究RNA-紧密黏附素相互作用方法的可行性,通过RNA-蛋白质相互作用位点在线预测方法(PRIdictor)进行验证,结果表明,预测出的蛋白质、RNA相互作用位点均位于相互作用预测结构的接触面上,说明对于RNA-蛋白质相互作用的模拟预测研究方法具有一定的可行性,将有助于通过设计合成RNA改进适体筛选、研发的相关生物技术推广,以及应用创新。

摘要：目的建立一种能快速准确检测hcmv-miR-UL112的方法。方法根据miRBase网站中公布的hcmv-miRUL112基因序列,通过设计引物、探针及优化反应条件,建立了一种实时荧光定量PCR方法对hcmv-miR-UL112进行定量检测,并进行敏感度、重复性和特异性实验,同时对PCR产物进行测序验证。结果获得了1条特异性茎环反转录引物,一条特异性PCR正向引物和通用反向引物。PCR最佳反应条件为95℃10min,53℃2min;95℃15s,57℃40s,共40个循环。该方法的批内变异系数CV和批间CV均0.99,扩增效率均>90.0%。结论成功建立了一种敏感度高、特异性强、重复性好并且简便快速的hcmv-miR-UL112荧光定量qRT-PCR检测方法。

摘要：肠出血性大肠杆菌O157:H7紧密黏附素是一种致病性相关的跨膜蛋白,C端区域具有免疫原性。本研究以肠致病性大肠杆菌的紧密黏附素C端空间结构为模板,利用Build Homology Models同源建模构建目标序列——肠出血性大肠杆菌O157:H7紧密黏附素,C端区域的部分空间结构模型。对模型空间结构的合理性通过Verify-3D程序进行评估,Ramachandram图谱和残基相容性评分结果显示,构建出的模型结构合理,各氨基残基的空间排布整体相容性较高.模型多为β型结构,非球状,本研究可为进一步通过空间结构模型进行特异性抗体、适体的设计以及筛选提供理论基础。

摘要：为提高企业对产品市场表现的把握能力,提高企业产品研发的针对性与科学性,提出数据驱动的产品综合评价模型,解决产品评价要素单一及难以量化的问题。以互联数据及科技资源数据挖掘为基础,运用情感倾向分析技术和LDA主题模型算法,引入产品功效矩阵等进行评价主题发现的研究,并将评价主题与产品设计等业务决策需求进行映射,建立综合考虑了产品市场表现及产品技术潜力的综合评价模型。本研究有益于减少在产品定位、设计、销售等环节上的盲目性,发挥大数据对企业业务的赋能作用。

摘要：采用基于总应力法(φ=0°法)的强度折减有限元法分析了圆锥形人造园林山体的稳定性,给出了圆锥形边坡的稳定因子N_(s)和安全系数F_(s)随坡角β变化的规律.并与几种形态相似的平面边坡(三角形平面边坡、无限平面边坡)的稳定因子和安全系数进行了对比,分析了边坡稳定性的几何效应.研究表明,由于几何形态的影响,圆锥形园林山体边坡的稳定因子及安全系数要明显大于平面边坡的稳定性.工程设计中可以采用三角形平面边坡的安全系数乘以修正值1.41来分析这种圆锥形边坡的稳定性.另外,滑动面形态也表现出一定的几何效应,圆锥形边坡的滑动面比平面边坡的浅一些,失稳时的影响范围也要小一些.

摘要：成人T细胞白血病(Adult T-cell leukemia,ATL)是与人类T淋巴细胞白血病1型病毒(Human T-cell leukemia virus type 1,HTLV-1)感染密切相关的恶性淋巴细胞白血病.HTLV-1反义编码的HBZ(HTLV-1 b ZIP factor)蛋白在ATL发生过程中扮演极为重要的角色.为了寻找治疗成人T细胞白血病的方法,设计了能与HBZ蛋白形成二聚体,从而封闭HBZ蛋白功能的靶向多肽R8-HBAP.通过免疫共沉淀实验,发现R8-HBAP可以有效抑制HBZ蛋白与下游靶蛋白c-Jun的结合,报告基因实验显示,R8-HBAP能阻遏HBZ蛋白对AP-1信号通路的调控作用.MTT和流式细胞术实验发现,R8-HBAP能抑制ATL细胞的恶性增殖并促进细胞凋亡.因此,靶向多肽R8-HBAP通过阻遏HBZ蛋白的功能从而抑制白血病细胞的恶性增殖,为R8-HBAP的开发利用及成人T细胞白血病的治疗提供一定的实验依据.