摘要：目的研究温室内冬季基质育苗对抑制当归早期抽薹的效应。方法设播期、基质和种子3个因子，正交设计，3次重复。结果在15个处理中有7个处理抽薹率低于1％，其中最低抽薹率为0．14％；另有7个处理抽薹率1％～5％；另有1个处理抽薹率为19．93％。在总计45个小区中，40％的小区完全未发生早抽薹，另有46．7％的小区抽薹率低于5％。冬季育当归苗8月初茎节开始伸长，比传统苗推迟约70d；冬季育当归苗9月中旬为抽薹高峰期，比传统苗推迟约100d。在15个处理的早抽薹植株中，有6个处理100％只抽生花茎不能成花，另有8个处理50％以上不能成花，另1处理38．9％不能成花。抽样测定不能成花当归的醇溶性浸出物的量为45．93％。3个因子均极显著影响当归早薹率，影响作用的主次顺序为播期、种子、基质。结论冬季基质育苗不仅可明显降低当归早抽蓥率．而且可能规避抽薹，大幅度推迟抽薹期。

摘要：利用CDDP(Conserved DNA-derived Polymorphism)分子标记方法,对47个不同花色紫斑牡丹品种的基因组DNA进行遗传多样性分析。结果显示:(1)采用正交实验设计,对影响紫斑牡丹CDDP-PCR反应的引物浓度、DNA模板浓度两因素进行优化,优化后紫斑牡丹CDDP-PCR反应体系为:总反应体系20μL,其中包括2×Es Taq MasterMix酶(含染料)10μL,10pmol/μL引物1.5μL,15ng/μL DNA模板4μL,ddH2O 4.5μL。(2)21条引物中,有19条产生了清晰的条带。19条引物共扩增出112条带,其中多态性条带97条,占总条带数的86.61%,多态性比例高。(3)UPGMA聚类显示,47个紫斑牡丹品种的聚类大体按照花色聚类,品种间遗传相似系数值在0.72~0.95,说明品种间相似度高,差异程度小。研究表明,CDDP分子标记方法适用于紫斑牡丹遗传关系分析,且特异条带的产生为深入研究紫斑牡丹品种鉴别提供理论依据。

摘要：以葡萄酒泥废酵母为试材,采用高压均质法和冻融法协同破碎酵母细胞壁,并辅以复合蛋白酶和脂肪酶酶解技术,研究多重破壁技术对β-葡聚糖纯度的影响。在单因素实验基础上,利用Box-Behnken实验设计原理,以酵母浓度、均质时间和冻融加水量为实验因素,以β-葡聚糖纯度为响应值,优化葡萄酒泥酵母β-葡聚糖提取工艺。结果表明:葡萄酒泥酵母β-葡聚糖最优提取工艺为均质压力70 MPa,酵母浓度13%,均质时间34 min,冻融加水量25%,在此条件下提取所得酵母β-葡聚糖纯度为91.69%,得率为13.23%,该方法为酵母葡聚糖的开发利用提供了参考依据。

摘要：根据 GenBank 发表的大蒜普通潜隐病毒（GCLV）的外壳蛋白基因的保守序列设计了一对引物,以全基因序列合成的方法获得质粒标准品,以此质粒标准品为模板建立 SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR检测 GCLV的方法.该方法在4.2×10^1~4.2×10^7拷贝之间呈现良好的线性关系,相关系数为0.999,扩增效率为106%,最低可检测42拷贝/PCR反应阳性标准品,比常规PCR敏感100倍；扩增产物的溶解曲线只出现1个单特异峰,无引物二聚体,溶解温度为（77.5±0.9）℃；重复性好,组内变异系数为0.2%~1.1%.用该方法对疑似带病的大蒜材料进行检测,结果表明 GCLV-SYBR GreenⅠPCR特异性强,操作简便,敏感性高,可以用于 GCLV 感染的检测及定量分析.

摘要：为了降低啤酒大麦蛋白的含量,提高啤酒大麦品质,利用甘肃推广面积最大的品种甘啤4号为材料,克隆大麦醇溶蛋白基因保守区序列,构建RNAi表达载体。根据已知大麦醇溶蛋白基因保守序列设计一对特异性引物B2PF5′-CAACCATTTC-CACAGCAACCACCAT-3′,B2PR5′-GAAAGATAGAGTAGACGATTGCACG-3′,采用PCR技术从甘啤4号大麦基因组中获得了1个349bp片段(GP4)。依据载体pHANNIBAL和pART27的结构,分别将GP4按所对应酶切位点正反向插入,利用热激法转化。结果分析显示,克隆出的片段与GenBank(NCBI)中醇溶蛋白基因核苷酸序列同源性高达92%,所构建成的RNAi表达载体pART27-pHAN-GP4中含目标片段。

摘要：根据GenBank中公布的牛BMAP-28基因mRNA序列设计引物,利用RT-PCR技术从牛骨髓总RNA中扩增出BMAP-28基因片段,将其克隆到pMD-18载体上,通过PCR、酶切和测序分析鉴定,获得重组克隆载体pMD18-T-BMAP28.以重组质粒为模板,扩增BMAP-28基因的去信号肽片段,转入原核表达载体PET28a,并转化到Rosetta宿主菌中,用IPTG诱导表达,SDS-PAGE和Western-blot检测表达产物.结果表明:重组克隆载体序列与已发表的BMAP-28基因序列有1个碱基差异,并导致氨基酸替换;经IPTG诱导后,含PET28a-BMAP28重组质粒的大肠杆菌能表达预计大小的融合蛋白,且表达的蛋白有抑菌活性.

摘要：以紫斑牡丹籽为原料,运用单因素和响应面中心组合设计实验(Central Composite Design,CCD),对紫斑牡丹籽油的化学提取工艺进行优化。结果表明,紫斑牡丹籽油的最佳提取时间为5.2 h、料液比1∶6.2 g/m L、温度(52±1)℃,在此条件下紫斑牡丹籽出油率可达31.36%。最佳工艺所得紫斑牡丹籽油经GC-MS分析显示共检测出18种脂肪酸,主要含有亚麻酸、亚油酸、油酸、棕榈酸,其中亚麻酸占其总脂肪酸含量的65.23%。紫斑牡丹籽油中不饱和脂肪酸含量占其脂肪酸总量的96.62%,饱和脂肪酸占其脂肪酸总量的3.38%。紫斑牡丹籽仁出油率高,不饱和脂肪酸较高,脂肪酸组成及其含量符合我国健康食用油标准。

摘要：根据已发表的牛Bac5 mRNA序列设计1对特异性引物,进行RT-PCR扩增,将目的片段定向克隆到原核表达载体PET28a(+),构建原核重组表达质粒PET28a-Bac5,并转化大肠杆菌Rosetta,进行IPTG诱导和SDS-PAGE检测.结果表明:采用RT-PCR技术成功扩增出414bp去信号肽的Bac5基因片段,重组蛋白经ZPTG诱导和SDS-PAGE检测发现,在19ku附近有1条清晰蛋白条带,与理论预测值大小一致;对表达的Bac5重组蛋白(rBac5)处理后进行抑菌活性的初步鉴定结果表明,rBac5对大肠杆菌(CVCC1450)和金黄色葡萄球菌(CVCC545)2种标准菌株和乳房炎乳的3种常见分离菌株均有一定的抑菌活性.

摘要：【目的】探讨牦牛血中IgG的最佳提取工艺.【方法】以牦牛血液为原料,在单因素试验的基础上,选取聚乙二醇浓度、K2HPO4浓度、NaCl浓度和pH为自变量,IgG的含量为响应值,根据响应面Box-Behnken试验设计原理,采用四因子三水平的分析法模拟得到二次多项式回归方程的预测模型.优化聚乙二醇/K2HPO4双水相法提取牦牛血中IgG的工艺条件.【结果】聚乙二醇/K2HPO4双水相法提取牦牛血中IgG的最佳工艺条件为聚乙二醇13%(w/w)、K2HPO417%(w/w)、NaCl 11%(w/w)、pH 6.0,在此条件下IgG质量浓度达13.82mg/mL,与预测值14.04mg/mL的相对误差为1.59%.【结论】回归模型具有高度显著性,方程对试验拟合较好,可以对IgG的含量进行很好的分析和预测;各因子对IgG含量影响大小依次是PEG浓度>NaCl浓度>K2HPO4浓度>pH;

摘要：采用PCR-SSCP方法检测牦牛胰岛素样生长因子2(Insulin like growth factor 2,IGF2)基因内含子2,7,8的多态性,并分析其对体重、体高、胸围和体斜长的遗传效应。用BioEdit软件对牛、羊、人、猪等相关序列同源性比对以后,主要依据牛(NW-001494548)DNA序列设计3对引物。结果在intron7和intron8引物扩增的片段上发现多态性,并对纯合子进行测序,发现intron7引物扩增片段91位存在C→T转换,intron8引物扩增片段存在330位G→C和358位A→G转换,且在该两对引物扩增产物均检测到3种基因型(AA、AB、BB)。统计结果表明,intron7的3种基因型在大通牦牛、青海高原牦牛和新疆巴州牦牛群体中的分布处于平衡状态,而在甘南牦牛和天祝白牦牛群体中则处于极端不平衡状态。intron8的3种基因型仅在新疆牦牛群体中处于不平衡状态,最小二乘分析结果表明,AA和AB基因型同BB基因型相比有较大体重(P<0.01),但在体高、体长和胸围性状上AA与BB基因型均不显著,说明IGF2基因有不赖于骨骼增长而增加体重的作用机制。