摘要：目的·探讨RNA干扰技术(RNAi)沉默人肝癌HepG2细胞中高尔基体蛋白73(GP73)基因表达后,对细胞迁移和侵袭能力的影响。方法·应用阳离子脂质体法将设计合成的GP73小干扰RNA(siRNA)瞬时转染HepG2细胞。HepG2细胞分为空白对照组、阴性对照组和GP73 siRNA干扰组。各组培养48 h后,采用实时定量PCR(qRT-PCR)和ELISA法检测转染后HepG2细胞中GP73 mRNA和蛋白表达水平变化,Transwell迁移实验、划痕愈合实验及侵袭实验分别观察迁移和侵袭能力改变,qRTPCR和Western blotting法检测基质金属蛋白酶2(MMP-2)和MMP-9的表达情况。结果·GP73 siRNA能显著降低HepG2细胞中GP73 mRNA和蛋白的表达,转染后细胞的迁移和侵袭能力明显下降,其MMP-2和MMP-9 mRNA和蛋白表达水平均明显降低。结论·siRNA干扰介导GP73基因沉默可抑制人肝癌HepG2细胞的迁移和侵袭,其机制可能与下调MMP-2和MMP-9的表达水平有关。

摘要：目的系统评价有关食管鳞状细胞癌(ESCC)组织中CXCR4表达及临床意义的研究。方法计算机检索PubMed、EMbase、Web of Science、CBM、VIP、CNKI和WanFang Data,并辅以文献追溯的方法收集国内外发表的相关病例-对照研究,检索时限均从建库至2012年4月。由两位研究者按纳入和排除标准筛选文献并评价纳入研究质量后,应用RevMan 5.1软件进行Meta分析。结果共纳入5个病例-对照研究,包含ESCC组织493例,正常食管组织136例。Meta分析结果显示:在CXCR4表达方面,ESCC组织比正常组织高[OR=12.03,95%C(I6.76,21.44),P<0.000 01],有淋巴结转移的ESCC组织比无淋巴结转移的高[OR=4.35,95%CI(2.48,7.62),P<0.000 01],中低分化的ESCC组织比高分化的高[OR=0.51,95%CI(0.32,0.81),P=0.004];ESCC组织临床Ⅰ～Ⅱ期和临床Ⅲ～Ⅳ期CXCR4表达的差异无统计学意义[OR=0.63,95%CI(0.08,4.99),P=0.66],但敏感性分析显示该结果不可靠。结论现有有限证据表明,CXCR4表达与ESCC及其有无淋巴结转移和不同组织学分级有关,说明CXCR4在ESCC发生、发展过程中可能起重要作用,但其与ESCC临床分期间的关系尚不确定,需要进行更多大样本、设计严谨的高质量研究来进一步证实。

摘要：摘要：目的探讨高分辨熔解（high resolution melting，HRM）技术的常规化检测流程以及实验设计策略和具体操作要点。方法以疾病关联SNP单位点IL1B-31和双位点IL6-597／-572的检测为例，分别从核酸提取，引物设计、验证和有效性评价以及酶系统和HRM染料的选择与匹配等方面进行最优策略与流程的探索。结果成功建立了单位点IL1B-31和双位点IL6-597／-572的PCR—HRM检测方法并得到验证。柱提基因组DNA模板、特异高效HRM引物和应用热启动酶是PCRIIRM检测方法成功建立的关键，尤其是Beacon designer，uMelt和mfold等工具软件的应用。结论HRM技术是一种适合疾病关联SNP验证和临床分子诊断的高通量、低成本、易操作、闭管均相检测新方法。