摘要：目的基于ITS序列建立北柴胡掺伪藏柴胡的分子鉴别方法。方法收集北柴胡、藏柴胡样品,提取基因组DNA,用ITS通用引物进行测序,通过DNAMAN软件进行序列比对,根据藏柴胡特异性位点用Primer Premier 5.0软件设计特异性鉴别引物,并优化特异性PCR反应条件。结果在位点特异性PCR反应条件考查中,退火温度为65℃(20 s)、引物量为0.4μL、循环次数为30时特异性最佳,该方法适用于不同DNA聚合酶且重现性较好,掺伪检出限为1%。结论该研究设计的位点特异性引物在一定条件下的PCR反应中,仅藏柴胡可以扩增出425 bp大小的条带,北柴胡则不能扩增出条带,能够鉴别北柴胡中掺伪藏柴胡。

摘要：以板蓝根中生物活性成分腺苷为检测指标,采用响应面分析法优化板蓝根的超声提取方法,为其进一步研究提供技术参考。以市售板蓝根药材为原料,水为提取溶剂,在单因素试验的基础上,选择提取温度,提取时间和料液比为影响因素,以腺苷提取率为响应值,根据Box-Behnken响应面模型,设计3因素3水平的响应面试验,建立数学模型,确定最佳提取工艺。提取温度,料液比对腺苷提取有极显著影响;提取时间与料液比之间交互作用显著。通过软件拟合结合实际,得出最佳工艺条件为:提取时间15 min,料液比1:20,提取温度55℃,实测腺苷提取率与理论预测值吻合。采用响应面法优化板蓝根中腺苷的超声提取工艺切实可行,该工艺提取率高、操作简便,使用试剂简单经济,可对进一步推广应用提供参考。

摘要：目的:通过响应面法优化大青叶药材中主要生物活性成分靛蓝的超声提取方法,为其进一步研究提供技术参考.方法:以市售大青叶药材为原料,在单因素试验的基础上,选择提取时间,不同比例N,N-二甲基甲酰胺-水混合液和料液比为影响因素,以靛蓝收率为响应值,根据Box-Behnken响应面模型,设计3因素3水平的响应面试验,建立数学模型,确定最佳提取工艺.结果:提取时间,N,N-二甲基甲酰胺比例和料液比对靛蓝提取率均有明显相关性,三因素间交互影响亦明显.通过软件拟合结合实际,确定最佳提取条件为:提取时间45min,提取溶剂组成为70%,料液比1:60,实测值与模型预测值接近.结论:采用响应面法优化大青叶药材中靛蓝超声提取工艺切实可行,实际值与预测值吻合度高,可以得到较好的提取结果,该工艺提取率高、操作简便,且不涉及易制毒试剂,对大青叶的进一步开发和工业化推广应用奠定基础.

摘要：目的优选当归配方颗粒的提取工艺条件。方法采用单因素试验和Box-Behnken效应面法,以阿魏酸提取率和出膏率为指标,考察加水量、提取时间、提取次数、浸泡时间等因素对提取工艺的影响。结果优选出当归水提物的最佳工艺为:加水11倍,煎煮3次,提取80 min。结论Box-Behnken试验设计法用于当归配方颗粒提取工艺的优选是可行的,数学模型的预测值与试验观察值相符。

摘要：[目的]建立一种快速检测猪、牛、羊动物源性成分的实时荧光环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)方法。[方法]针对猪、牛、羊物种ND1、COXⅠ、cytB特异性基因分别设计LAMP引物,通过实时检测荧光强度判断反应结果。[结果]猪、羊源性成分的检测灵敏度为10 pg,牛源性成分的检测灵敏度为1 pg。对模拟掺杂肉制品检测时,掺杂猪肉、牛肉、羊肉的检出限为0.01%。[结论]该研究所建立的LAMP法特异性强、灵敏度高,能有效地对肉制品掺杂的猪、牛、羊源性成分进行检测,可作为肉类鉴别的一种快速检测方法。

摘要：建立了一种快速检测鸭、马、鹿动物源性成分的实时荧光环介导等温扩增法。针对鸭、马、鹿物种COXIII,atpase6,COXⅠ特异性基因分别设计LAMP引物,反应加入荧光染料SYTO-9,在63℃条件下反应40min,通过实时检测荧光强度判断反应结果,结果显示鸭、鹿源性成分的检测灵敏度为1pg,马源性成分的检测灵敏度为100fg。对模拟掺杂肉制品检测时,掺杂鸭肉、马肉、鹿肉的检出限为0.01%。本文所建立的LAMP法特异性强、灵敏度高,能有效的对肉制品掺杂的鸭、马、鹿源性成分进行检测,可作为肉类鉴别的一种快速检测方法。