摘要：背景:已证实疏密波对病变组织有兴奋作用,能够促进病变组织的新陈代谢,课题组前期研究发现其对骨性关节炎具有良好的治疗作用。目的:探讨疏密波诱导骨髓间充质干细胞向软骨细胞分化的最佳波段组合,并从分子生物学水平阐明疏密波调控骨髓间充质干细胞向软骨细胞分化的机制。设计、时间及地点:细胞学体外对照观察,于2006-10/2008-03在福建中医学院中西医结合研究院完成。材料:清洁级健康4周龄SD大鼠45只,由上海斯莱克实验动物有限责任公司提供。疏密波发射仪由福州大学生物医学仪器研究所提供。根据同一周期疏密波比例的不同,分为以下3种工作模式:模式Ⅰ为疏波∶密波=1∶1,模式Ⅱ为疏波∶密波=2∶1,模式Ⅲ为疏波∶密波=1∶2。方法:抽取大鼠骨髓液,用全骨髓贴壁培养法体外分离纯化培养大鼠骨髓间充质干细胞。取传至第3代细胞,接种后加入含体积分数为0.15胎牛血清的DMEM培养液,根据仪器工作模式的不同分为:疏密波1∶1组、疏密波2∶1组、疏密波1∶2组、空白对照组。各诱导组按干预时间的不同又分为2个亚组:诱导30min和诱导60min,每天诱导1次,共14d。主要观察指标:RT-PCR半定量分析Cbfa1mRNA及Sox9mRNA的表达,甲苯胺蓝染色检测糖胺聚糖的表达,免疫组化染色检测Ⅱ型胶原基质的表达。结果:体外培养14d可获得均质性较好的骨髓间充质干细胞,传至第3代CD45阳性率为1.91%,CD90阳性率为98.22%。诱导14d后,各疏密波诱导组Cbfa1mRNA,Sox9mRNA均呈阳性表达,而空白对照组未表达。甲苯胺蓝染色可见诱导后细胞胞质和细胞外基质异染,空白对照组无明显异染;免疫组化染色可见各诱导组多数细胞的胞浆呈棕黄色阳性表达,且疏密波1∶2组Ⅱ型胶原的表达优于疏密波2∶1组,疏密波2∶1组优于疏密波1∶1组,空白对照组细胞为阴性表达。结论:疏密波能诱导大鼠骨髓间充质干细胞体外分化为软骨细胞表型,且疏波∶密波=1∶2的波段组合效果最佳,其作用主要是通过上调Cbfa1mRNA和Sox9mRNA的表达进而促进糖胺聚糖和Ⅱ型胶原基质的表达来实现的。

摘要：背景:治疗型关节炎护膝具有通经活络、疏导瘀滞、行气活血的作用,已证实是防治膝骨性关节炎行之有效的医疗仪器。目的:通过观察兔膝骨性关节炎关节软骨组织的病理变化,探讨治疗型关节炎护膝的治疗作用。设计、时间及地点:随机对照动物观察,于2006-01/10在解放军南京军区福州总医院动物实验中心及病理中心完成。材料:健康6月龄日本大耳白兔54只,由无锡市惠山江南动物实验中心提供。治疗型关节炎护膝由福建中医学院和福州大学生物医学研究所共同研制,包括疏密波、热软膜程序,两种程序联合为温热动态干扰变频疏密波。微波仪产地日本。方法:取10只兔作为正常对照组,剩余44只采用改良Hulth法建立膝骨性关节炎模型,造模后随机分为模型对照组9只、微波对照组9只、疏密波组9只、热软膜组8只、疏密波+热软膜组9只。造模后7d开始每日强迫兔活动30min,之后正常对照组、模型对照组不进行任何干预,其余组兔固定后分别对应给予微波仪治疗、疏密波治疗、热软膜治疗、疏密波+热软膜联合治疗,30min/次,1次/d,连续16周。主要观察指标:通过CR片、光镜和电镜观察膝关节组织形态学变化。结果:干预16周后,CR片显示正常对照组关节间隙正常,关节面平整光滑,无骨赘;模型对照组内侧间隙明显变窄,有明显骨赘。光镜下正常对照组关节软骨四层结构清晰可辨,软骨细胞排列整齐呈柱状,染色质分布均匀,细胞核清晰;模型对照组关节软骨层变薄,部分区域软骨细胞核固缩、坏死,软骨细胞排列紊乱,四层结构不易分辨。电镜下正常对照组软骨细胞呈椭圆形,细胞及胞膜完整,包质内可见丰富的粗面内质网、高尔基体、线粒体,细胞核完整,染色质分布均匀;模型对照组软骨细胞明显固缩且外形不规则,细胞周晕消失,胞浆内细胞器凝成高电子密度的片状物不易分辨,细胞核不规则,染色质浓聚,散裂于核中。疏密波+热软膜组在病理程度上的改变明显轻于模型对照组,软骨表面裂纹少,胶原纤维结构基本完整,固缩的软骨细胞少,虽可见部分退变的软骨细胞,但部分软骨细胞具有较多的细胞器,某些区域形成软骨细胞簇。微波对照组、单纯疏密波组、单纯热软膜组膝关节组织形态学变化介于模型对照组和疏密波+热软膜组之间。结论:治疗型关节炎护膝的疏密波+热软膜程序能延缓膝关节软骨宏观形态、软骨细胞及软骨基质的退变,效果优于微波仪治疗或单纯的疏密波、热软膜治疗。

摘要：RNA干扰(RNAi)是由双链RNA(dsRNA)启动的序列特异的转录后基因沉默过程。在这一过程中,dsRNA被核酸内切酶切割成小干扰RNA(siRNA),siRNA与相关的蛋白结合成RNA诱导沉默复合体,这一复合体可识别并降解mRNA,导致基因沉默。它是一种比反义寡聚核苷酸技术更为有效的方法,具有更高的特异性,在生物医学领域有广阔的应用前景。文章就RNAi技术在功能基因组学、基因治疗(如人类免疫缺陷病毒、肝炎病毒、肿瘤)、神经性疾病及其药物设计等领域的实验及其应用研究及存在问题作一综述。