摘要：鸭腺病毒3型(duck adenovirus type 3,DAdV-3)是近年来我国新发鸭源禽腺病毒。本试验根据NCBI数据库中DAdV-3 Hexon基因特征,设计特异性引物,获得番鸭源DAdV-3福建株(命名为W1FJ株)Hexon基因全长,明确其分子特征,并基于此建立检测DAdV-3的SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR方法。结果表明,克隆的W1FJ株Hexon基因全长为2 814 bp,编码937个氨基酸,和DAdV-3(CH-GD-12-2014株)核苷酸同源性为100%,但和鸭源禽腺病毒B型(也称鸭腺病毒2型,DAdV-2,GR株)核苷酸同源性仅为76.6%。Hexon蛋白遗传进化分析表明,W1FJ株和CH-GD-12-2014株在遗传进化上形成一个独立的分支,与鸭源禽腺病毒B型和鹅源禽腺病毒A型(goose aviadenovirus A)在遗传进化上明显不同,建议将其命名为鸭源禽腺病毒C型(duck aviadenovirus C)。建立的检测DAdV-3的SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR方法,灵敏度高,最低检测限为61拷贝/μL;特异性强,和鸭群常见传染病病原均无交叉反应,扩增产物的熔解曲线只出现1个特异性单峰,Tm值为(81.48±0.25)℃;重复性好,组内和组间重复试验变异系数分别为0.49%~1.64%和0.67%~2.40%。本试验为DAdV-3的科学分类和后续开展DAdV-3感染的流行病学调查及致病机理研究奠定基础。

摘要：针对井泵产品外径受限的特点,利用专利技术、采用极大直径法创新设计叶轮,自主研发导叶计算机辅助设计软件创新设计圆周弯扭式导叶,研发紧凑型不锈钢井用潜水泵系列产品。新产品在保证泵效率较高的前提下大幅提高泵单级扬程,主要技术指标较国内同类产品有较大幅度提高。

摘要：鸭腺病毒3型(DAdV-3)是我国鸭群中出现的一种新型腺病毒,属于腺病毒科禽腺病毒属成员。为建立DAdV-3的快速检测方法,本研究根据DAdV-3的fiber2基因,设计特异性的LAMP检测引物,构建重组质粒标准品pT-DAdV-3,经各反应条件优化,建立了DAdV-3 LAMP快速检测方法。结果显示,建立的LAMP检测方法最佳反应条件为64℃40 min;该方法仅对DAdV-3呈阳性反应,与番鸭细小病毒、鸭圆环病毒、鸭源减蛋综合征病毒等其他常见鸭源传染病病原均无交叉反应,特异性强。该方法对重组质粒标准品的最低检测限为50拷贝/μL;利用本研究建立的LAMP方法、前期建立的PCR方法和基于MGB探针的荧光定量PCR方法对临床收集的66份鸭组织病料样品进行检测,结果显示阳性率分别为13.63%(9/66)、13.63%(9/66)和15.15%(10/66);且LAMP检测的阳性样品经PCR方法检测和荧光定量PCR方法检测均为阳性,符合率为100%。本研究首次建立了检测DAdV-3的LAMP方法,该方法快速敏感、特异性强,为该病的流行病学调查提供技术支撑。

摘要：内源miRNAs被认为是真核生物调控基因表达的重要调节因子,人工miRNA(amiRNA)是一种基于天然miRNA的结构用以沉默内源基因的有效策略。利用人工miRNA替换植物内源miRNA前体中miRNA/miRNA*序列,使产生的人工miRNA与靶基因配对,并特异性地抑制靶基因的表达。从天然miRNA的合成过程和作用机制,人工miRNA的设计基本原理及构建方法,人工miRNA技术在植物抗病育种上的应用等方面进行综述。

摘要：为了对禽多杀性巴氏杆菌(Pm)外膜蛋白H(Omp H)的免疫学活性进行鉴定,本研究根据已发表的多杀性巴氏杆菌X-73株(U50907.1)设计了两对引物,用PCR方法扩增了禽多杀性巴氏杆菌CVCC44801株的Omp H,扩增片段为1 348bp(ORF为1 056bp)。扩增的Omp H与GenBank中登录号为AE004439.1(Pm70株)、EF635422.1(C44-1株)、EU016232.1(P52株)、JQ082510.1(XJ121株)、U50907.1(X-73株)、U52200.1(P-1059株)的序列比对分析结果表明,其核苷酸同源性范围在80.2%~98.4%,氨基酸同源性范围在79.6%~98.5%。扩增了去信号肽的Omp H基因,构建原核重组表达质粒pET-Omp H,转化BL21并诱导表达,SDS-PAGE结果表明,表达蛋白约为56ku,与预期分子量的大小相符;蛋白免疫印迹试验结果表明,该蛋白具有良好的免疫学活性,为建立禽Pm血清学检测方法以及禽多杀性巴氏杆菌外膜蛋白疫苗的研究奠定了基础。

摘要：针对木结构构件加工过程中依赖人工上下料码垛作业生产效率低的问题,提出采用可编程逻辑控制器(programmable logic controller,PLC)自动控制系统控制桁架式机械手承载真空海绵吸盘的方法,设计开发一种用于木结构构件自动上下料码垛作业的装置。装置应用在尺寸为2387 mm×118 mm×152 mm(长×宽×高)的杉木结构构件的上下料码垛,作业效率为187根/h,上料合格率99.4%,下料合格率为99.2%。该装置能够实现木结构构件的稳定、高效、自动化上下料码垛作业,满足自动化作业的要求。

摘要：根据麦克斯韦电磁场基本理论建立永磁交流同步电机电磁场的数学模型,利用谐波转矩分析法进行电磁优化设计,最大程度消除电机谐波的影响,降低齿槽转矩;使用三维建模软件对电机定子、转子、绕组和永磁体进行计算域建模;利用有限元分析法对电机计算域模型进行数值模拟,在气隙磁密分析、转矩性能和转矩波动分析基础上,预测电动机空载特性和负载特性并进行优化设计,提高电机效率和功率因素等综合指标。

摘要：为避免农产品烘干生产实际中的不必要经济损失,设计并试制了一种小型的热风烘干系统;开展温控实验研究,通过结合实际实验参数曲线和PID参数整定方法获取较理想的温控参数,从而为生产实际中的大型热风烘干库房烘干提供参数依据,提高农产品的烘干品质。

摘要：编制自然资源资产负债表是中国为推进生态文明建设提出的新举措。海洋自然资源资产是中国自然资源资产的重要组成部分,然而目前要明确海洋自然资源负债的内涵及科目仍存在诸多问题。本研究基于全国“自然资源资产平衡表”的试点经验,以服务国家海洋综合管理为目的,充分考虑海洋资源的特殊性,在文献综述基础上明确海洋自然资源负债的概念。进而根据受托责任和可操作性,从海洋资源过渡消耗、海洋环境破坏、海洋生态破坏等3个方面筛选出海域面积减少、大陆自然岸线减少、无居民海岛面积减少、无居民海岛自然岸线减少、违规占用生态红线区、海水水质下降等6个可实物量计量的二级负债科目。在此基础上,设计“海洋自然资源负债表”框架和其实物量、价值量核算的途径,本研究可为海洋自然资源资产负债表的编制提供参考。

摘要：为研究欧洲鳗鲡(Anguilla anguilla)RIG-I基因的特性,通过设计引物,扩增其序列,克隆至pCE2-TA/Blunt-Zero载体,测序验证后对所获得欧洲鳗鲡RIG-I基因序列进行生物信息学分析及原核表达。结果表明,欧洲鳗鲡RIG-I基因ORF序列有2823 bp碱基,编码940个氨基酸,与日本鳗鲡(***)的序列同源性为96.71%;RIG-I蛋白属酸性亲水性蛋白,不存在跨膜结构,无信号肽,较不稳定,主要分布于细胞质中,有6个保守功能区;SDS-PAGE和western blot结果显示,实现了RIG-I基因在大肠杆菌中的高效表达,为后期制备RIG-I多克隆抗体和进一步探索RIG-I介导的天然免疫在鳗鲡抵御鳗鲡疱疹病毒(Anguillid herpesvirus,AngHV)侵染过程中的作用机制提供了研究基础。