摘要：目的:研究miRNA的敲除对全反式维甲酸(ATRA)介导的急性早幼粒细胞白血病髓系分化的影响,并鉴定下调的miRNA若干,设计合成针对miRNA前体基因序列的sgRNA,通过CRISPR/Cas9技术实现miRNA在编码基因水平上的敲除。实时荧光定量PCR验证miRNA水平的变化和流式细胞术检测miRNA敲除后对细胞分化水平的影55种成熟miRNA下调。应用CRISPR/Cas9进行基因敲除后,PCR及Surveyor assay检测可见明显的DNA剪切条带,后,细胞的髓系分化受到明显抑制,而敲除miR-155后髓系分化水平则有所上调。结论:应用CRISPR/Cas9可进行针对平的影响,其具体机制是通过对分化相关靶基因的综合调控。

摘要：为了探索酿酒酵母发酵生产谷胱甘肽(Glutathione,GSH)的最佳工艺条件。在单因素试验基础上,通过Plackett-Burman试验结合响应面设计方法对液体发酵培养基进行优化。结果表明:酿酒酵母发酵生产GSH的最优培养基配方为葡萄糖71 g·L^(-1)、酵母膏4 g·L^(-1)、NH_(4)Cl 6 g·L^(-1)、KH_(2)PO_(4)2.0 g·L^(-1)、MgSO_(4)0.5 g·L^(-1),pH 6.0,在此条件下,GSH理论产量达79.51 mg·L^(-1)。经3批次平行试验验证,GSH实际产量均值为80.5 mg·L^(-1),与预测值相近,较优化前产量(65.03 mg·L^(-1))提高了约19.2%。