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荧光mRNA差异显示方法的建立及条件优化: 收藏
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引用; 《福建医药杂志》2004年第3期26卷 135-137页; 作者：余桂华陈如凯陈燕凌福建医科大学附属协和医院肝胆外科350001 福建农林大学农业部甘蔗生理生态与遗传改良重点开放实验室350001; 目的　建立荧光 m RNA差异显示方法 ,优化实验条件 ,为分离克隆基因差异表达片段奠定基础。方法　提取总 RNA,筛选随机引物和荧光锚定引物各 1条进行差异显示 ,割取差异条带进行重扩增。结果　总 RNA经DNase 处理后 ,展示条带减少明显 ...; 目的　建立荧光 m RNA差异显示方法 ,优化实验条件 ,为分离克隆基因差异表达片段奠定基础。方法　提取总 RNA,筛选随机引物和荧光锚定引物各 1条进行差异显示 ,割取差异条带进行重扩增。结果　总 RNA经DNase 处理后 ,展示条带减少明显 ,以未经处理为好 ;提高反转录的温度有利于长片段 c DNA的合成 ;荧光标记锚定引物、长引物设计和采用高分辨率的电泳系统有利于最大限度的减少 DD- PCR中的假阳性率偏高的问题。结论　 DD- PCR方法简便、灵敏、高效 ,完全适用于一般性的基因差异表达研究。; 来源：详细信息评论

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