摘要：参照鸭1型甲肝病毒亚型(DHAV-1a)的基因组序列设计了1对VP3基因特异性扩增引物,通过RT-PCR方法扩增获得了DHAV-1a结构蛋白VP3基因,将纯化的VP3基因与pEASYTM-Blunt Zero Cloning Vector连接,构建DHAV-1aVP3基因克隆重组质粒,然后将VP3基因片段插入pET-32a(+)表达载体,转化*** BL21(DE3)感受态细胞。以1.0mmol·L-1 IPTG于37℃诱导表达,经SDS-PAGE和Western blot分析表明VP3基因于大肠杆菌中成功表达,其分子量为47kDa,且表达的VP3蛋白能够与Anti-His Mouse mAb发生特异性反应,具有良好的生物活性,为进一步研究DHAV-1aVP3蛋白功能和以VP3蛋白为抗原研制DHAV-1a诊断试剂盒奠定基础。

摘要：应用原核表达系统表达新型鸭呼肠孤病毒σC基因,分析σC蛋白的抗原性。根据已登录的新型鸭呼肠孤病毒(NDRV)NP03株S1基因序列,针对σC基因设计并合成1对特异性引物,用RT-PCR扩增该基因,并将此片段克隆到原核表达载体pET-30a(+)上,将序列正确的重组质粒命名为pET-NDRV-σC,转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,1.0mmol·L-1 IPTG 37℃诱导表达。结果显示,RT-PCR扩增得到966bp的目的片段;表达产物经SDS-PAGE分析,获得了与预期相符的约41.3ku的条带,重组蛋白主要以包涵体形式存在;Western blotting分析显示,重组蛋白能与NDRV阳性血清发生反应。本试验首次应用原核表达系统获得NDRVσC蛋白,并证明其具有免疫反应性。

摘要：根据GenBank公布的绵羊肺炎支原体Y-98株(***435069.1)P80基因序列,利用Beacon Designer7.9软件设计1对特异性引物,建立了绵羊肺炎支原体的SYBR Green Ⅰ实时荧光定量检测方法。结果显示,该方法可以特异性检测绵羊肺炎支原体,对其他羊常见病原扩增结果无特异性扩增;该方法最低检测限为10copies·μL^(-1),组内和组间变异系数均小于2%;采用该方法对96份临床样品进行检测,绵羊肺炎支原体的阳性率为67.7%(65/96),结果显示该方法与TaqMan实时荧光定量PCR方法检测结果一致。以上结果表明本研究建立的绵羊肺炎支原体SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR方法特异性强、灵敏度高、重复性好,可用于绵羊肺炎支原体的病原学检测和流行病学调查。

摘要：【目的】利用遗传聚类和配合力分析来了解新育成9个甜玉米自交系的遗传背景和配合力,为组配新品种提供科学依据。【方法】以TS01-1、BS02-1、GS132、AS67、SS1等5个白粒自交系为母本,闽甜系688、闽甜系G73、闽甜系197、X90-34等4个高配合力黄粒自交系为父本,按5×4不完全双列杂交设计组配20个杂交组合,并对其株高、穗位高、穗长、穗粗、穗行数、行粒数、百粒重、出籽率、带苞叶穗重和去苞叶穗重等10个性状的配合力进行研究。【结果】从去苞叶穗重的一般配合力值得出,供试甜玉米自交系的配合力大小顺序,白粒自交系为AS67>GS132>TS01-1>BS02-1>SS1,黄粒自交系为闽甜系688>X90-34>闽甜系G73>闽甜系197。从特殊配合力值得出,杂交组合AS67×闽甜系688的特殊配合力值最大,实际测产产量也最高。从分子水平对9个亲本的亲缘关系进行聚类分析,将9个亲本分成黄粒和白粒两个群。【结论】黄、白粒自交系间杂交具有一定的杂种优势;聚类分析结果与试验设计的父母本划分一致。

摘要：鳗鲡疱疹病毒(Anguillae herpesvirus,AngHV)是淡水鳗鲡的主要病毒性疾病病原之一。根据鳗鲡疱疹病毒(AngHV-1)的基因组序列(GenBank:NC-013668)设计引物,扩增鳗鲡疱疹病毒福建株(AngHV-FJ)ORF95基因的开放阅读框序列,克隆至pMD19-T载体;经限制性内切酶酶切和测序鉴定,进一步将其克隆至原核表达载体pET-32a,构建了表达质粒32a-ORF95,将其转化表达菌株BL21(DE3),经IPTG诱导,实现了ORF95在大肠杆菌中的高效表达。在0.1mmol.L-1 IPTG、23℃诱导14h的条件下,可溶性ORF95蛋白的表达量较高,经镍柱纯化获得了高纯度的融合蛋白。

摘要：为了使"以螨治螨"生防技术与病虫害综合治理中的其他防治方法合理结合,通过用玻片浸渍法对不同阿维菌素产品进行了毒力测定,确定了阿维菌素类农药对胡瓜钝绥螨具有中等毒性后,用在室内繁殖的多年未接触过任何农药的胡瓜钝绥螨敏感品系为材料,在实验室内用阿维菌素原粉进行胡瓜钝绥螨抗阿维菌素品系的汰选,并对筛选出的抗性品系进行抗性衰退、抗性再增长研究。研究结果表明,胡瓜钝绥螨敏感品系经过药剂汰选18次繁育54代后,LC50值由敏感品系的2.527 0mg.L-1上升到163.293 0mg.L-1,该胡瓜钝绥螨抗性品系的抗性倍数是敏感品系的64.62倍;抗性品系的抗性发展趋势符合逻辑斯蒂模型,拟合方程为y=120.4141/[1+e(4.88914-0.0935x)];筛选出的抗性品系对阿维菌素的抗性不稳定,繁育60代后抗性衰退至原有抗性的78.46%,60代到120代衰退缓慢,抗性水平最后稳定在敏感品系的10倍以上;当抗性衰退到原有水平的1/5左右时,再用阿维菌素原粉药剂汰选8次饲养24代后,抗性迅速上升至敏感品系的43.72倍。研究结果说明胡瓜钝绥螨对阿维菌素的抗性发展趋势发展迅速,筛选出的胡瓜钝绥螨抗阿维菌素品系即使停止用药后抗药性会较长时间保持在中等抗性水平;该抗性品系在田间应用可降低生物防治与化学防治之间的矛盾,为综合防治创造有利的条件。

摘要：采用田间试验,运用湿筛法,研究了菌渣施用对茶园土壤水稳性团聚体含量、分布和稳定性的影响。试验设计4个处理,分别为单施氮肥(M0)、50%氮肥+50%菌渣有机肥(M1)、全量菌渣有机肥(M2)和2倍菌渣有机肥(M3)。结果表明:>5 mm的团粒结构是茶园土壤团聚体的主要组分,所占比例为37.04%~52.37%,其它各粒径分布较为均匀;随着土层加深,茶园土壤大团聚体含量降低,5mm团聚体含量,增幅15.20%~41.39%,其中高量菌渣有机肥处理(M2和M3)处理显著增加(P0.25mm水稳性团聚体)、平均重量直径(MWD)和几何平均值(GMD)均随着菌渣施用量的提高而增加,分形维数(D)随菌渣用量的提高而减小。相关分析表明,R0.25、MWD和GMD均与>5mm的大团聚体呈极显著正相关,与0.25~0.5 mm和5mm的大团聚体呈极显著负相关,与0.25~0.5mm和5mm的大团聚体越多,土壤团聚体稳定性越好。以上结果说明,施用菌渣有机肥能增加土壤中大团聚体的含量及其水稳性,是改善茶园土壤理化性状和培肥地力的有效途径。

摘要：以5个籼型水稻不育系为母本和5个恢复系为父本,通过不完全双列杂交试验设计,对其主要农艺性状的配合力、遗传力进行分析。结果表明:株高、有效穗、穗总粒数、结实率、千粒重、单株谷重主要受加性效应的影响;亲本各性状一般配合力和特殊配合力之间并没有明显的关系;父本对有效穗、穗总粒数、结实率、千粒重、单株谷重的贡献大于母本,而母本对株高的贡献大于父本。6个主要农艺性状的狭义遗传率千粒重>株高>结实率>穗总粒数>有效穗>单株谷重。

摘要：总结了悬浮液体肥料生产工艺,针对现有液体肥料生产设备生产节奏缓慢、生产工序繁琐和配料浪费等问题,研发设计了一种能实现配方、制肥为一体的悬浮液体肥料生产技术及一体化设备,并介绍该悬浮液体肥料生产一体机的构造及优点。经生产实践验证,该悬浮液体肥料生产工艺精度高,性能稳定可靠,操作简单,经济实用。

摘要：为获取枇杷酒植物乳杆菌R23苹果酸乳酸发酵(MLF)降酸与挥发酸数学模型,采用4因子二次正交旋转组合设计,研究植物乳杆菌R23的接种量(X1)、枇杷酒的酒精度(X2)、枇杷酒的总SO2浓度(X3)、发酵温度(X4)及其交互作用对枇杷酒的植物乳杆菌R23 MLF降酸效果的影响,并建立数学模型。结果表明,影响枇杷酒MLF降酸的主次因素为X1>X3>X4>X2,影响枇杷酒MLF过程中挥发酸增加的主次因素为X1>X4,X2和X3对其影响不显著;两模型的验证试验值与模型计算值无显著差异(P>0.05)。