摘要：为建立兔多杀性巴氏杆菌(Pm)和兔出血症病毒(RHDV)的双重PCR检测方法,本研究根据Pm kmt1基因和RHDV VP60基因保守区域,设计2对特异性引物,经PCR分别扩增Pm kmt1基因和RHDV VP60基因保守区域,构建重组质粒pMD-Pm和pMD-RHDV,并经菌液PCR和测序鉴定后作为重组质粒标准品。经各反应条件优化后初步建立了检测Pm和RHDV的双重PCR方法。反应条件优化结果显示,该方法的最适退火温度为59℃,扩增kmt1和VP60基因的最优引物浓度均为0.5μL(10μmol/L)。对Pm和RHDV及其他病原包括兔源支气管败血波氏杆菌、产气荚膜梭菌等20种相关病原的特异性试验结果显示,除Pm和RHDV有特异性扩增条带外,其余相关病原均无扩增条带,特异性较强。将两种重组质粒标准品分别10倍倍比稀释并等体积混合后作为模板,经该双重PCR方法扩增。结果显示,该方法对pMD-Pm的检测限为17.9拷贝/μL,对pMD-RHDV的检测限为1260拷贝/μL,敏感性较高;对两种病原的DNA和cDNA混合物的批内和批间重复性试验结果均一致,重复性较好。对100份临床患病兔肺脏样品的检测结果显示,Pm和RHDV的阳性率分别为13%(13/100)和7%(7/100),二者混合感染率为37%(37/100),与已报道的Pm和RHDV单一PCR方法的检测结果均一致。表明该方法检测的准确性较高,可以用于临床样品的检测。本研究建立的同时快速检测Pm和RHDV的双重PCR方法为临床这两种病的诊断提供了技术支持。

摘要：目的对当前典型手指逆行岛状皮瓣修复术的最新文献进行总结,分析手部供区修复存在的问题,通过手术设计为手部供区修复问题寻找更优的解决方案。方法本文系统检索了4个国内外医学研究数据库中关于局部皮瓣修复手部供区的文献,对符合文献筛选标准的2018至2022年发表的67篇文献的结果进行了系统分析,并对纳入文献进行梳理、归纳、总结,结合具体病例分析目前常用的3种供区修复方法的优缺点。通过设计手背局部皮瓣的方案,探索其对供区修复的可行性及先进性。结果通过对文献与病例进行系统性分析,发现局部皮瓣在设计方案中均可对手指近端供区进行修复,同时可解决目前手部供区修复中存在的张力过大、瘢痕、植皮收缩、皮片色差等问题。结论采用局部皮瓣不仅可对手指近端供区缺损进行良好修复,而且手术操作相对简单,是手部供区修复的更优选择。