摘要：根据NCBI登录的PRRSV G5、CSFV E2的全基因序列,设计2对引物,以PRRSV、CSFV总RNA为模板,通过筛选最佳RT-PCR反应条件,利用RT-PCR成功扩增出目的片段,证明所检测病料为猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(PRRSV)和猪瘟病毒(CSFV)混合感染。

摘要：为研究草地贪夜蛾对饥饿诱导自噬的响应。从草地贪夜蛾EST数据库中筛选到一段核苷酸序列,设计特异性引物,RT-PCR技术从草地贪夜蛾Sf9细胞中扩增该核苷酸序列,经过生物信息学分析该序列与昆虫自噬相关基因ATG8同源性最高,命名为SfATG8基因,并构建了pIEX-4-mCherry-EGFP-SfATG8载体转染Sf9细胞。Sf9细胞经饥饿(PBS)诱导4 h后,Lyso-Tracker染色、Western Blotting、共聚焦显微镜检测细胞对自噬的响应程度。结果表明,经饥饿(PBS)诱导4 h的Sf9细胞中出现Sf Atg8-PE的表达,共聚焦显微镜检测到Sf9细胞膜上的自噬小体。以上证据证实饥饿(PBS)能诱导Sf9细胞发生自噬,为深入研究Sf9细胞对自噬的响应奠定了基础。

摘要：【目的】家蚕CecropinB6(BmCecropinB6)是家蚕免疫防疫系统中1种重要的抗菌肽,对革兰氏阳性和革兰氏阴性细菌具有极强的抗菌作用,但对该重组抗菌肽的自诱导表达还未见报道。【方法】以家蚕中肠组织总RNA为模板,设计特异性引物,通过RT-PCR技术扩增BmCecropinB6基因,构建pET32a-BmCecropinB6原核表达载体,通过自诱导表达系统表达BmCecropinB6重组蛋白,并对表达产率进行分析。【结果】克隆的BmCecropinB6基因大小192 bp,编码63个氨基酸,自诱导表达的重组蛋白大小为27 ku,表达产率高达41%。【结论】该研究为BmCecropinB6抗菌肽的进一步应用奠定基础。

摘要：为制备奶牛隐性乳房炎多价蜂胶灭活疫苗,研究多价蜂胶疫苗的免疫效果,试验将菌液用0.4%的甲醛灭活,以蜂胶作为佐剂,灭活菌液与蜂胶佐剂以1∶1的比例等体积混合制成多价蜂胶灭活疫苗,并对该疫苗的物理性质、安全性、免疫效果进行检测,通过构建小鼠模型设计浓度梯度,找出最佳免疫剂量。结果表明：通过攻毒试验,注射奶牛隐性乳房炎多价疫苗的混菌液,灭活疫苗的保护率达86.4%,免疫效果良好。说明制备的奶牛隐性乳房炎多价蜂胶灭活疫苗的混悬液具有良好的免疫保护效果。

摘要：以笔者所在实验室提供,从新鲜奶样中初步分离并通过生理生化鉴定的大肠杆菌为研究对象,设计一对特异性引物,PCR技术检测分离的大肠杆菌。结果表明,扩增的16S rRNA序列大小为1 419 bp,与GenBank上发表的大肠杆菌16S rRNA序列核苷酸同源性为96%,从分子水平上确定分离的菌为大肠杆菌。这为奶牛隐性乳房炎的分子生物学鉴定奠定了基础。

摘要：抗菌肽是构成昆虫体液免疫的主要方式,BmMoricin是家蚕免疫系统中1种重要的抗菌肽,具有极强的抑菌活性。以家蚕中肠组织总RNA为模板,设计1对特异性引物,通过RT-PCR技术扩增BmMoricin,构建pET32aBmMoricin原核表达载体,采用自诱导表达系统表达BmMoricin重组蛋白。结果表明,BmMoricin基因片段的大小为201 bp,编码66个氨基酸,自诱导表达的BmMoricin重组蛋白大小约为19 ku,表达产率比异丙基-β-D-疏基半乳糖苷(IPTG)诱导的重组蛋白表达产率高,为BmMoricin抗菌肽的生物学活性鉴定及应用奠定了基础。