摘要：为建立一种快速检测新孢子虫的环介导等温扩增方法(LAMP),本研究根据GenBank中登录的新孢子虫Nc-5基因序列(X84238.1)设计2对特异性引物,通过PCR扩增将新孢子虫Nc-5基因片段并克隆至pMD18-T载体中,构建重组质粒pMD18-T-Nc-5,并经PCR和测序鉴定正确后作为质粒标准品。通过优化该方法的引物浓度、反应温度,并利用LAMP浊度仪测定扩增目的基因时出现白色焦磷酸镁的浊度值实时监控反应进程,初步建立了检测新孢子虫的LAMP方法,反应结束后通过加入SYBR Green I观察荧光对结果可视化判定。反应条件优化结果显示,引物F3/B3和FIP/BIP的终浓度分别为10 pmol/μL、20 pmol/μL,63℃扩增40 min效率最佳。利用该方法检测新孢子虫、弓形虫、瑟氏泰勒虫、环形泰勒虫、双芽巴贝斯虫、伊氏锥虫核酸,并在反应结束后加入SYBR Green I观察荧光以评估该方法的特异性。结果显示仅新孢子虫核酸扩增为阳性,其余病原核酸均为阴性结果。荧光观察结果显示,新孢子虫反应管呈翠绿色荧光(阳性),其他反应管呈橙黄色荧光(阴性);对重组质粒标准品10倍倍比稀释后作为模板(即4.0×10^(7)拷贝/μL~4.0×100拷贝/μL)进行LAMP的敏感性试验,结果显示该方法对质粒标准品的检测限为4.0×10^(1)拷贝/μL,且在反应结束后加入SYBR Green I,4.0×10^(7)拷贝/μL~4.0×10^(1)拷贝/μL质粒标准品的反应管均呈翠绿色荧光(阳性),4.0×100拷贝/μL反应管呈橙黄色荧光(阴性),敏感性与《新孢子虫病检疫技术规范》(SN/T 3499)中荧光定量PCR方法的敏感性一致;分别以同一时间和不同时间提取的3个不同稀释度的质粒标准品进行批内和批间重复性试验,结果显示批内和批间重复性试验的变异系数均小于5%。综上表明该方法特异性强、敏感性高、重复性好。对895份临床疑似感染新孢子虫的动物肝脏、脑组织样品同时采用建立的LAMP方法及《新孢子虫病检疫技术规范》(SN/T 3499)中的荧光定量PCR方法检测,结果显示LAMP的阳性检测率为41.45%(371/895),阴性率为58.55%(524/895),与SN/T 3499中的荧光定量PCR检测结果一致。本研究建立的新孢子虫LAMP方法快速、敏感、特异性强,且能够实时监测反应过程并能可视化判定结果,为新孢子虫现场快速检测提供了新的技术手段。

摘要：对表面光泽度较高的物体表面颜色进行测量,常采用漫射照明、8°观察角、消除镜面反射光的几何条件。在结构设计中,通过积分球内设置的光阱来消除镜面反射光。由于光阱的尺寸、大小的不同,导致不同结构的仪器在测量表面光泽度不同的样品时会产生较大的器间差。从理论上分析了漫射照明、8°观察角、消除镜面反射光的几何条件下不同结构的测量仪器的器间差产生原因;设计了一种可以兼容包含镜面反射光(SCI)和去除镜面反射光(SCE)几何条件的测量结构,通过对样品表面SCI和SCE数据进行同时测量获得样品表面的光泽数据;提出了一种根据被测材料表面光泽数据对SCE测量数据进行修正的修正模型,并设计相关实验进行验证。实验结果证明,应用该修正模型对测量结构进行修正可以显著减小不同仪器结构之间的测量偏差,有显著的工程应用价值。

摘要：路径导引是导航与位置服务领域重要研究内容之一。传统依次转弯的方式能够提供陌生环境下的导引信息,但不符合人们的对于熟悉环境下的认知和日常沟通习惯。通过按照地标的显著度进行分层,建立多粒度的路径导引描述信息,则更符合由概略到详细的空间认知规律。本文提出基于分层地标的多粒度路径导引描述方法,该方法通过计算导航地标显著度构建多层加权Voronoi图,结合路径计算结果生成多粒度的路径导引描述信息。设计试验表明基于分层地标的多粒度路径导引描述与行走试验及本地人(出租车司机)行进体验抽样问答的结果基本一致。

摘要：差分频域分析方法是常用的攻击方法之一,当设计中使用随机延时运行等其他防护措施时,现有的差分功耗分析方法已经不能开展攻击,而差分频域分析方法可以对这类防护措施实施攻击.但该攻击方法会带入更多噪声,降低攻击效率.针对以上问题,文中提出了一种基于重采样的差分频域分析方法,该方法可有效地提升攻击效率.文中首先介绍了基于重采样的差分频域分析方法的基本原理,然后搭建实验,在SASEBO GII仿真板上实现一个防护措施为随机延时运行和功耗隐藏的DES算法实施攻击.实验结果表明,针对DES随机延时运行和功耗隐藏防护措施,文中提出的重采样频域攻击方法较之DPA方法可攻击成功,是多种防护措施攻击成功的实例.同时,采用重采样处理的差分频域分析方法可以有效提高信号的信噪比,将攻击效率提升一倍.

摘要：铁氧体缺陷裂纹严重影响其电气性能,在现代电子信息技术和环保产业大量需求铁氧体材料的背景下,传统人工检测方法已经难以满足产品的检测需求。提出了一种基于初始磁导率的铁氧体裂纹检测新方法,根据铁氧体工件小尺寸、窄初始磁化区的特性,建立检测模型,设计检测工况;针对微弱裂纹脉冲常被干扰淹没,设计双探头传感器,将原有单脉冲信号变为有相关性的双脉冲输出;结合双脉冲信号自相关函数的独有特性,综合多个特征进行裂纹辨识。72组实验数据证明,多特征辨识方法能够准确有效定性区分被检测对象是否存在裂纹。

摘要：目的:建立实时荧光聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)检测转基因DAS-44406-6品系大豆的定性检测方法和使用数字PCR检测转基因DAS-44406-6品系大豆的定量检测方法。方法:针对转基因DAS-44406-6大豆品系,进行5’-RACE,测定该品系转基因大豆外源片段与大豆染色体重组的边界序列,并根据该边界序列设计引物和探针。使用23种非DAS-44406-6品系转基因植物作为阴性对照测试实时荧光PCR引物和探针的特异性,以DAS-44406-6品系样品制备6个含量梯度的样品进行检测低限实验。使用数字PCR技术进行定量检测,并确定定量检测的低限。结果:建立的转基因DAS-44406-6大豆品系的实时荧光PCR特异性检测方法品系鉴定特异性较强,实时荧光PCR检测方法的检测低限在模板DNA浓度为100 ng/反应时,为0.01%的转基因大豆含量,约为16.6个拷贝的DAS-44406-6基因组DNA;数字PCR检测方法的检测低限在模板DNA浓度为0.5 ng/反应、转基因大豆含量为1%时,相对标准偏差为0.7%。因此,建立的转基因DAS-44406-6大豆品系实时荧光PCR和数字PCR特异性检测方法符合转基因检测的要求。

摘要：介绍了新研制的1mN·m～1N·m扭矩标准装置的关键部件——力臂系统的设计方案,并对力臂进行了不确定度分析。分析表明：1N·m扭矩标准机力臂长度的不确定度为4.2×10-6（k=2）,完全满足1N·m扭矩标准机技术指标的要求。

摘要：针对物质低饱和蒸气压数据大量缺乏给化工生产、设计带来不便的现状,基于直接静态法研究了一种实验测量方法,实现了0～100℃温度范围内物质0～133 Pa低蒸气压数据的自动测量.以三甘醇、1-十二烯2种试样为对象进行实验,并针对实验本体从设计上不可避免存在的空气残余及泄漏两项误差设计空样实验以获取其误差修正量,通过在实验结果中剔除误差修正量的方法进行误差补偿,将补偿前、后的实验结果与文献标准值进行比较以确定补偿方法的有效性.实验结果表明：补偿前平均绝对误差为6.98 Pa,最大绝对误差为13.34 Pa,相对于现有静态法实验研究绝对误差显著减小,但相对误差较大;补偿后平均相对误差为7.3％,最大相对误差为10.1％,提高了静态法在低压范围的测量精度,同时为理论研究和工程应用提供了准确的低蒸气压数据.

摘要：应用靶序列富集多重聚合酶链式反应（t arget-enriched multiplex-polymerase chain reaction,Tem-PCR）技术建立金黄色葡萄球菌、沙门氏菌和志贺氏菌3种食源性致病菌的快速检测方法。分别以金黄色葡萄球菌fem A基因、沙门氏菌inv A基因和志贺氏菌ipa H基因为靶基因,设计3对特异性引物,并与通用引物连接组成Tem-PCR引物,通过反应条件优化,建立了Tem-PCR检测方法。结果显示,建立的Tem-PCR方法特异性强,对沙门氏菌、金黄色葡萄球菌和志贺氏菌的检测灵敏度分别为1.1×10^3、2×10^3 CFU/m L和1.2×10^3 CFU/m L。Tem-PCR检测方法有效地解决了传统多重PCR引物扩增效率不均衡的问题。

摘要：通过在开封国家水大流量计量站开展DN1000口径三峡模型流道中18声道超声流量计测量准确性实验研究，得到了复杂流场给流量计引入的测量误差，验证了18声道超声流量计即使在复杂流场中依然具有较高的测量准确性。通过分析流量计得到的流速分布图可以推断出模型管道中的流场情况。流量计在正常安装位置旋转90。后测量误差变化不大，流量计测量误差和流速没有明显的相关性。采用CFD辅助设计可以增强模型实验的可靠性。