摘要：采用实时荧光PCR技术建立了瓜炭疽病菌(Colletotrichum orbiculare)的检测方法。根据瓜炭疽病菌甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)基因和谷氨酰胺合成酶(GS)基因序列,设计了该病菌特异性引物和TaqMan探针,并对所设计的引物和探针的反应条件进行了优化。采用本试验建立的实时荧光PCR方法对瓜上的其他菌株及近似菌株进行检测,可将瓜炭疽病菌与其他病原菌区分开。灵敏度试验表明,25μL体系中只要有39.6pg的核酸量就可以被检测到,检测灵敏度达到1.584pg/μL,比普通PCR检测灵敏度高100倍。同时对田间采集的病株和未知样品进行的检测证明了引物和TaqMan探针的特异性。

摘要：三相电压型PWM整流器静止坐标模型不需要旋转变换,可以实现整流器系统无锁相环控制,同时虚拟磁链技术可以使系统无交流电网电压传感器运行,降低控制成本和提高系统可靠性。但静止坐标系下直接功率控制系统相关变量稳态下为正弦量,PI控制不能实现无静差调节。针对这一问题,采用反馈线性化理论进行了控制器设计,该算法能较好地实现瞬时功率解耦,但对系统参数变化比较敏感。为了对其进行改进,提出一种自抗扰直接功率控制算法,能够提高系统鲁棒性。最后借助Matlab/Simulink对以上两种策略进行对比分析,结果表明自抗扰直接功率控制能够更好地改善系统性能。

摘要：目的将免疫磁珠分离技术(IMS)和荧光探针定量PCR(qPCR)相结合,建立水源性微小隐孢子虫卵囊的检测方法。方法以抗微小隐孢子虫卵囊表面抗原Cp23单克隆抗体包被链霉素磁珠,制备特异免疫磁珠,根据卵囊回收率优化分离和富集卵囊条件。根据微小隐孢子虫核糖体DNA小亚基(18S rDNA)基因(登录号AB513881.1)序列设计引物和荧光标记探针,以分离纯化后的微小隐孢子虫卵囊基因组DNA为模板进行扩增,将扩增产物克隆至Peasy-T1载体。经筛选鉴定后,将重组质粒倍比稀释至104～108copy/μl,荧光探针定量PCR检测,并绘制标准曲线。用荧光探针定量PCR分别检测微小隐孢子虫、贝氏隐孢子虫、刚地弓形虫、犬隐孢子虫和大肠埃希菌基因组DNA,判断该方法的特异性;检测100～108copy/μl重组质粒,判断该方法的敏感性。对采自河北某奶牛养殖场的50份污水样品,分别采用免疫荧光分析法(IFA)和IMS-qPCR检测,并比较分析检测结果。结果磁珠与Cp23单克隆抗体的最佳孵育浓度为20 ng/ml,最佳孵育时间为30 min,最佳捕获时间为30 min,卵囊的回收率>95%。PCR扩增产物长度为272 bp,重组质粒经酶切和测序鉴定正确。荧光探针定量PCR结果显示,重组质粒拷贝数与Ct值之间呈现良好的线性关系,相关系数r2=0.996 1。特异性和敏感性检测结果显示,仅微小隐孢子虫有扩增条带,最低10 copy/μl微小隐孢子虫卵囊18S rDNA重组质粒可被检测到。以IFA检测结果为金标准,50份水样的检测结果显示,IMS-qPCR的特异性为100%(18/18),敏感性为93.8%(30/32)。结论 IMS-qPCR可用于检测水源性微小隐孢子虫卵囊。

摘要：利用正交试验法对雪灵芝中黄酮类质的提取工艺进行优化,应用高效液相色谱法对提取样品的成分进行了初步分析。通过单因素试验分别考察表面活性剂种类、表面活性剂用量、乙醇体积分数、料液比、回流温度、回流时间对雪灵芝黄酮提取率的影响,选取适当的试验因素与水平,利用正交法设计试验,对各个因素的显著性和交互作用进行分析。结果表明:乙醇体积分数为5%,十二烷基苯磺酸钠浓度0.25%,料液比为1∶30(g/mL),提取时间30 min,提取温度70℃,此条件下黄酮提取率可达1.75%,样品经HPLC检测发现含有少量槲皮素和山奈酚,表面活性剂辅助浸提法在植物资源提取领域显示出了优良的应用前景。

摘要：目的：研究碱性磷酸酶（alkaline phosphatase, ALP）试剂开瓶后的稳定性，为实验室合理购买试剂包规格提供依据。方法：采用同步测量设计方案，首先选择5个试剂盒，分别记为S0、S1、S2、S3、S4，第1天上午8点启用试剂S4进行ALP常规检测，未用完试剂盖紧盖，置2-8℃保存备用；第2天、第3天、第4天上午相同时间、相同方式启用S3、S2、S1；第5天启用试剂S0；在仪器上按试剂说明书设置5个相同参数的ALP检测通道，记为ALP0、ALP1、ALP2、ALP3、ALP4，对应试剂为S0、S1、S2、S3、S4；在荷兰威图Selectra-E全自动生化仪上用校准品（中生北控生物科技有限公司）校准各个通道；测量样品并进行结果比较分析。结果：试剂 S3、S4与试剂 S0测量样品结果比较差异有统计学意义（P〈0.01），试剂S1、S2与试剂S0测量样品结果比较差异无统计学意义（P〉0.05）。结论：ALP试剂开瓶后48 h内是稳定的，实验室应根据用量选择合适包装规格的试剂包。

摘要：为了解决会话初始协议(SIP)应用中遇到的安全问题,结合SIP的特点分析了SIP可能遭遇的安全危机,提出一种在应用层上的安全机制。该安全机制采用认证和加密相结合的方法,在SIP消息传递时完成用户代理和服务器的双向认证和非对称加密算法的公钥交换,通过双向认证防止注册攻击和消息篡改等攻击手段,利用加密保证数据传输的安全,保证了SIP在各个阶段的安全性。实验结果表明,该安全机制可行并拥有很高的效率。

摘要：根据枣疯病植原体16SrDNA基因保守区域设计、合成特异性引物和TaqMan探针,以构建的重组质粒作为阳性标准品,建立并优化了对枣疯病植原体的TaqMan实时荧光定量PCR检测方法。对优化后的方法进行灵敏度、特异性及稳定性评价,制作了标准曲线。结果显示,制作的标准曲线有极好的线性关系,相关系数(r2)达到0.998,建立的实时荧光定量PCR检测方法能够特异性地检测枣疯病植原体,能检测到60拷贝的质粒DNA。本研究建立的实时荧光定量PCR检测方法灵敏度、特异性、重复性好,不仅能够实现对枣疯病植原体的快速检测,而且为实现从病原定量水平上对枣疯病病情分级奠定了基础。

摘要：介绍了交流数字伺服电机和CAN总线技术的相关信息,并由此设计了一套CAN总线同步控制双轴伺服电机的系统。进行了两个不同运动轨迹试验,控制精度达到200反馈脉冲,验证了基于CANopen的多轴伺服电机同步控制的可行性。

摘要：强度与刚度是大型门式起重机结构设计中的重要参数,结构的振动特性则是其承受动态载荷的重要参数。利用Pro/E及有限元法对大型门式起重机进行了整机建模,研究了大型门式起重机的静强度、刚度以及振动特性,指出了在满载吊重下大型门式起重机的危险位置,并分析了大型门式起重机的固有振动频率和振型,为大型门式起重机的安全性和可靠性提供理论基础,也为后续大型门式起重机的疲劳分析及优化工作提供依据。

摘要：为了解决在无线局域网中移动终端切换时产生的时延和抖动对实时业务质量的严重影响,通过分析移动终端媒体访问控制层切换的过程和无线局域网鉴别和保密基础结构,提出了一种基于证书预鉴别的WAPI快速切换算法。该算法采用扫描和切换阈值,通过对证书进行预鉴别,有效地减少了切换过程中的扫描和认证时延,提高了切换效率。在无线网卡驱动中,对该算法完成了软件实现,并且在嵌入式移动终端中进行了测试,结果表明了该算法的良好效果。