摘要：【目的】建立基于简化基因组测序(2b-RAD)宽鳍鱲(Zacco platypus)的微卫星分子标记,并进行遗传多样性分析,为有效开展宽鳍鱲品种间遗传多样性分析和分子育种,挖掘和利用宽鳍鱲种质资源提供参考。【方法】利用限制性内切酶EcoRⅠ打断基因组DNA,每个样本分别进行物理打碎,选取300~700 bp插入片段文库,利用Illumina HiSeq PE150测序平台进行双末端(Paired-End)测序获得海量遗传多态性标签序列。【结果】2b-RAD筛选宽鳍鱲的微卫星位点得到两端各留100 bp作为引物的SSR数量为41018个,带有引物片段的SSR数量为1522个,片段引物的设计率为37.1%,构建的文库质量较高,测序深度达高准确度下的分型标准。在筛选的64个微卫星位点中,有14个位点(21.88%)具有多态性,由于存在无效等位基因,有3个位点(Zpla08、Zpla09和Zpla10)显著偏离Hardy-Weinberg平衡(P<0.05),因此选用其中的11个微卫星位点分析宽鳍鱲群体遗传多样性。基于11个微卫星DNA位点的分析表明,宽鳍鱲7个群体的平均等位基因数(N_(A))为3.66,平均Shannon;s信息指数(I)为0.689,平均观测杂合度(H_(O))为0.315,平均期望杂合度(H_(E))为0.354,平均多态信息含量(PIC)为0.409。【结论】基于简化基因组测序(2b-RAD)开发宽鳍鱲的微卫星分子标记可用于评估野生宽鳍鱲种群的遗传多样性、遗传结构和物种鉴定。宽鳍鱲基因组DNA 14个微卫星位点中有11个微卫星位点具有中高多态性,3个位点(Zpla08、Zpla09、Zpla10)偏离Hardy-Weinberg平衡,在群体遗传研究中应慎用。

摘要：CRISPR/Cas9系统是一类有效的目标基因编辑工具,能够精准编辑植物基因组以改善植物的性状。该技术能够同时靶向一个或多个序列,切割后通过非同源末端连接或同源重组引入新的遗传变异。然而,CRISPR/Cas9技术对于木本植物仍为挑战,主要局限于基因组倍性与再生转基因植物的能力。为了建立一套有效的杜仲(Eucommia ulmoides)基因编辑系统,利用农杆菌介导的遗传转化,以杜仲EuFLC(Flowering Locus C)基因为靶标,通过设计4个向导RNAs(sgRNAs)靶向EuFLC的2个保守区域转化杜仲,在卡那霉素选择培养基上筛选4周后,分离出抗性株系,通过Sanger测序对其进行基因分型。结果表明:EuFLC的编辑效率约为5.62%,sgRNA1与sgRNA2介导的突变类型均为单个碱基的替换,其中sgRNA1编辑效率约为1.12%;sgRNA2编辑效率最高,约为4.49%,首次成功在杜仲细胞中实现基因编辑。本研究为杜仲基因功能鉴定与遗传改良提供了新的途径。

摘要：以黔西南州普遍种植的白壳薏苡(Coix lachryrma-jobi L.)为材料,通过随机区组设计,探讨不同种植密度对薏苡产量及构成因子的影响。结果表明,不同窝行距对株高、株穗数、株粒数、百粒重有明显影响,差异达极显著或显著水平,对窝株数影响不大;不同下种量对株高、株粒数、百粒重、窝株数有影响,差异达极显著或显著水平,对株穗数影响不大。

摘要：为了探索发酵全混合日粮(FTMR)对贵州黑山羊淘汰母羊生产性能、瘤胃发酵参数、血清免疫指标及育肥效果的影响,试验选择健康、平均体重为(35.00±1.63)kg的贵州黑山羊淘汰母羊33只,采用完全随机区组设计(RCBD)将试验羊分为3组,每组11只,各组单栏饲养。试验Ⅰ组饲喂市售商品颗粒TMR,试验Ⅱ组饲喂现加工的常规TMR,试验Ⅲ组饲喂FTMR,预试期为10 d,正试期为75 d。试验开始前试验羊空腹称初始重,然后每间隔14 d称重1次,计算日增重(ADG)、干物质采食量及料重比,统计增重饲料成本和增重效益。试验结束后,试验羊颈静脉采血,检测血清免疫指标[免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白M(IgM)、免疫球蛋白G(IgG)、胰岛素样生长因子(IGF)、干扰素(IFN)、生长激素(GH)、白细胞介素-2(IL-2)、游离三碘甲状腺原氨酸(T3)、游离四碘甲状腺原氨酸(T4)]。用导管法采集各组试验羊瘤胃液样品30 mL,测定总挥发性脂肪酸(TVFA)、氨态氮(NH3-N)、乙酸、丙酸、丁酸含量及pH值,统计主要挥发性脂肪酸(VFA,乙酸、丙酸、丁酸)占TVFA比例,并计算乙酸与丙酸比(乙丙比)。结果表明:试验Ⅲ组ADG为(196.43±36.28)g/d,与试验Ⅱ组相比差异不显著(P>0.05),但试验Ⅰ组日增重显著高于试验Ⅱ组(P0.05),试验Ⅲ组的粗蛋白、中性洗涤纤维和粗脂肪消化率高于试验Ⅰ组和试验Ⅱ组(P>0.05)。各试验组间瘤胃液pH值,TVFA含量,乙酸、丙酸、丁酸占TVFA比例及乙丙比差异不显著(P>0.05),试验Ⅰ组NH3-N含量极显著高于试验Ⅱ组和试验Ⅲ组(P0.05)。说明饲喂FTMR可提高贵州黑山羊淘汰母羊养分消化率,提升体液免疫功能,促进其生长发育,同时能降低增重饲料成本,提高育肥经济效益。

摘要：为建立快速同步检测牛病毒性腹泻病毒、牛轮状病毒与牛冠状病毒的多重RT-PCR检测方法并应用于临床检测。根据GenBank中三种病毒参考毒株的基因序列,设计3对特异性引物。利用构建的三种病毒的标准质粒进行三种病毒的三重RT-PCR方法,进行特异性、敏感性和重复性检验,并进行临床样品检测。特异性结果显示,建立的牛病毒性腹泻病毒、牛轮状病毒和牛冠状病毒的三重RT-PCR方法可特异性扩增出阳性标准质粒的基因片段,对牛源沙门氏菌、大肠杆菌、牛巴氏杆菌、牛支原体无扩增;敏感性结果显示,对牛病毒性腹泻病毒、牛轮状病毒和牛冠状病毒质粒核酸最低检测浓度分别为250、 250和25ng/mL。重复性结果显示,能扩增出一致的目的基因条带。临床样品结果显示,三重RT-PCR方法和单一RT-PCR符合率100%。可见,建立牛病毒性腹泻病毒、牛轮状病毒和牛冠状病毒的三重RT-PCR方法特异性强、敏感性高、重复性好,可进行临床检测。

摘要：为提高贵州省多花黑麦草新品种区域试验标准化生产水平,为草地畜牧业生产提供标准技术支撑,依据国家行业标准制定了多花黑麦草品种区域试验的范围、试验区组的划分和试验点的选择、试验设计、试验年限、试验地的选择、区域试验品种的确定、供试种子要求、田间管理、记载项目及标准、收获和计产、品质和抗性测试、试验报告、品种来源和处理的区域试验技术规程。该技术规程于2013年通过贵州省质量技术监督局审定,编号为DB 52/T 818-2013。

摘要：通过对国内外现代科技型农业发展模式的分析,尤其以科技型生态循环农业发展模式、创意农业发展模式为重点展开简要综述,强调了科技型农业模式的发展因资源禀赋、社会经济条件而产生的差异性,以及国内外科技型农业模式对贵州的借鉴价值。同时指出,各地科技模式在实践探索上应各具特色,理论归纳上需关注驱动机制及路径选择。最后结合贵州省情,分析了贵州科技型农业发展环境及其国内外现代科技型农业发展模式对贵州可能的借鉴价值。

摘要：为火龙果生产上的合理施肥提供科学依据,采用3414试验设计,研究了氮、磷、钾肥配施对火龙果产量及品质的影响。结果表明:不同氮、磷、钾肥的配施水平均可显著提高火龙果的产量,但处理15(常规施肥区)与处理9(3414试验的最高产量)的产量无显著差异;不同施肥处理对火龙果果实的可溶性固形物、总糖、总酸及矿质营养元素的影响程度各不相同,果实中的N、P、K元素含量并不随氮、磷、钾肥用量的增加而提高,可能与火龙果的生长特性和植株对养分的分配需求密切相关。

摘要：在对1~30日龄罗曼蛋鸡进行H5亚型禽流感病毒母源抗体检测的基础上,设计了3个免疫程序,对9 000只罗曼蛋鸡进行分组免疫接种和抗体监测,以筛选适合贵州省蛋鸡养殖的高致病性禽流感疫苗最佳免疫程序。结果表明：罗曼蛋鸡母源抗体滴度在2日龄达到高峰值,平均滴度为7.7 log2,23日龄为0;以免疫程序3组获得的抗体滴度最高,离散度最小,抗体平均滴度达9.3 log2,60~200日龄的6次抗体检测滴度均达7.0 log2以上,免疫效果最佳。

摘要：为探索AsA代谢对高温胁迫的响应,研究了高温胁迫不同时间对苹果叶片AsA含量、氧化还原状态的影响。结果表明:苹果叶片MDA和H2O2含量随高温处理时间的延长而增加;总抗坏血酸、AsA含量在高温处理2 h时达最大,之后开始下降;AsA/DHA比值均随高温处理时间的延长而下降。