摘要：目的应用多交叉置换扩增技术结合纳米生物传感器(multiple cross displacement amplification coupled with gold nanoparticle-based lateral flow biosensor,MCDA-LFB)建立一种快速、特异和灵敏的伊氏李斯特菌(Listeria ivanovii,***)检测方法,并对该方法进行评价。方法以***种特异性基因smcl为靶标设计引物,对引物进行最佳反应温度、灵敏度和特异性测试,并用模拟样本和实际样本进行评估。结果***-MCDA-LFB的最佳反应温度为64℃。在***和***菌种鉴定中,该方法特异性为100%。此外,***-MCDA-LFB在纯培养物和模拟污染粪便样本的灵敏度分别为10 fg/反应和6.8×10^(2) CFU/g。在195份野鼠粪便样本增菌培养物检测中,***-MCDA-LFB检测结果和传统培养法(ISO 11290-1)结果相同,且只需二次增菌液水煮模板即可检出。结论***-MCDA-LFB方法作为一种快速、灵敏和特异的诊断方法可应用于食品、医疗和科研领域。

摘要：目的白纹伊蚊天然携带A与B亚组沃尔巴克氏体Wolbachia,这种共生菌能够通过抑制宿主传播病毒能力或降低宿主种群密度来控制虫媒疾病传播,且这种作用强度与其密度密切相关,本文旨在建立一种准确检测蚊虫携带Wolbachia分型与密度的方法。方法克隆白纹伊蚊携带Wolbachia的wsp基因并测序,在w AlbA与w AlbB wsp基因的非保守区设计特异性引物,建立qPCR检测方法。结果该方法灵敏性和特异性良好,两亚组Wolbachia无交叉反应。利用该方法检测不同浓度四环素处理后蚊虫携带Wolbachia密度下降程度,确定最适四环素处理浓度为0.1 mg/mL。结论本方法的建立为研究Wolbachia在蚊虫生理生殖和天然免疫方面的作用提供了技术支撑。

摘要：以重大传染病信息处理和使用为例,探讨知识服务平台的设计与应用。设计的知识服务平台以本体为基础,以重大传染病信息为采集和组织对象,建立了知识加工系统、知识库构建与维护系统、基于本体的全文检索系统、传染病热点信息采集与分析系统等,为传染病政策管理人员、科研人员提供多层次的知识和内容服务。

摘要：目的分析天津市1例输入性基孔肯亚病毒(CHIKV)的全基因组序列特征与进化,为CHIKV的监测与防控提供科学依据。方法收集2019年11月4日于天津市第二人民医院采集的血清标本200μl提取核酸,设计叠瓦式引物扩增CHIKV基因组全长,然后利用Illumina Miniseq平台进行高通量测序。结果本研究的CHIKV属于ECSA基因型印度洋分支,与大部分中国分离株一致,相似性为92.72%~99.86%,在国际上与巴基斯坦分离株亲缘关系最近(99.74%)。天津CHIKV在关键位点E1-D284E和E2-I211T处有两处突变,与ECSA基因型一致。此外,天津CHIKV还具备两个关键毒力位点E2-12T和E2-82G,以及nsP3-R524Opal终止子突变。结论天津CHIKV具备较强毒力,且具备在白纹伊蚊中传播的能力,提示应继续加强对CHIKV的监测。

摘要：设计了一种基于场效应管(FET)生物传感器的检测系统。以STM32F103微处理器集成了自动进样、温度控制、光调制、数据采集与放大等模块;同时完成了基于C++软件环境的数据处理与分析人机交互界面的设计。通过对整个系统性能测试实验分析,结果表明:该系统检测灵敏度高,响应速度快,性能稳定可靠,抗干扰性强,操作简单、便携,能够较好地满足现场快速检测病原微生物的需求。

摘要：目的采用检测阴性设计病例对照研究评价23价肺炎球菌多糖疫苗(23-valent pneumococcal polysaccharide vaccine,PPV23)对儿童肺炎球菌[即肺炎链球菌(Streptococcus pneumonia,Spn)]相关呼吸道感染疾病的保护效果。方法选取2017年1月1日—2020年12月31日因急性呼吸道感染(acute respiratory illness,ARI)在苏州大学附属儿童医院住院治疗的2岁≤年龄<10岁的患儿为研究对象,前瞻性收集呼吸道感染患儿中分离的肺炎链球菌菌株,通过荚膜肿胀实验确定Spn菌株血清型。采用检测阴性设计病例对照研究,病例组为感染PPV23血清型肺炎球菌的患儿,对照组分别为非疫苗血清型(non-vaccine serotype,NVT)患儿(感染非PPV23血清型肺炎球菌患儿)(NVT对照组)和肺炎球菌阴性(Spn–)患儿(临床样本中未检出感染Spn的患儿)(Spn–对照组)。在苏州市疾病预防控制中心的疫苗接种登记数据库中查询患儿PPV23接种的相关信息。采用Logistic回归模型估计PPV23接种的调整比值比,评价PPV23的保护效果(vaccine effectiveness,VE)。结果共纳入1749株Spn菌株,其最常见的血清型依次为19F、6B、23F、6A和19A;PCV13和PPV23疫苗血清型覆盖率分别为76.56%和72.27%。病例组共纳入1264例患儿、NVT对照组485例、Spn–对照组1590例,平均年龄分别为(3.88±1.27)、(4.02±1.43)、(4.52±1.92)岁;病例组、NVT对照组和Spn–对照组PPV23的接种率分别为5.4%、6.8%和5.8%,接种疫苗的平均年龄为(2.53±0.61)岁。以NVT患儿为对照时,通过logistic回归模型调整患儿年龄、临床诊断和其他疫苗接种情况后,PPV23对预防儿童疫苗血清型Spn肺炎球菌相关呼吸道感染疾病的总体保护效果(VE)为18.3%(95%CI=–26.3%~47.1%),对社区获得性肺炎的VE为15.7%,对血清型19F、6B及15B的VE分别为32.8%、16.5%和57.5%,对2~5岁儿童的保护效果(26.0%)优于5岁以上儿童(7.6%)。以Spn–患儿为对照时,通过logistic回归模型调整患儿年龄、户籍、其他疫苗接种情况、就诊年份、就诊季节及临床诊断后,PPV23对2~5岁儿童的保护效果为29.9%(95%CI=–22.0%~59.7%)。结论PPV23对预防儿童疫苗血清型Spn相关呼吸道感染疾病具有一定的保护效果,但随接种后时间的推移而减弱。

摘要：目的调查分析北京市昌平区不同年龄及教育程度人群对抗菌药物及细菌耐药的认知、态度及行为,了解城市人群对抗菌药物及细菌耐药的认知缺口,为制定遏制耐药科普宣传策略提供依据。方法设计调查问卷,采用分层随机抽样方法,借助微信“问卷星”平台开展问卷调查,利用SPSS软件进行统计分析,使用卡方(χ^(2))检验分析不同人群对抗菌药物认知、态度、行为状况及差异。结果共收集到1267份有效问卷,依据受访者年龄和教育程度的不同,将受访人群分为7个年龄组和4个学历组分别进行统计分析。受访者中对抗菌药物、当前的耐药形势及耐药菌跨领域传播的正确认知率分别为58.09%、48.38%和52.80%,研究生及以上学历组正确认知率高于另外3个学历组(χ^(2)=32.378,P<0.05)。90.69%的受访者表示愿意学习抗菌药物的相关知识;93.61%的受访者使用前会主动了解药物的使用剂量、注意事项和不良反应;89.42%的受访者会在使用抗菌药物前阅读说明书,显示民众学习了解抗菌药物相关知识的主观意愿比较强。93.37%的受访者赞同必须医生开具处方才可购买抗菌药物的规定,但严格遵从医嘱使用抗菌药物的比例仅为74.19%。71.03%的受访者家中常备抗菌药物;55.72%的受访者会在患病时自行服用抗菌药物;23.84%的受访者会依据病情变化自行加减或停用抗菌药物。而且,55.01%的受访者认为自己不存在抗菌药物过度使用或不规范使用的情况。结论遏制耐药国家行动计划实施五年,城市居民对于抗菌药物及细菌耐药的认知和关注度高,反映出北京市在遏制耐药科普宣传方面取得了很好的效果。但在对耐药现状及耐药菌危害认知方面,不同人群间差异大。此外,认知同行为脱节,认识到个人存在抗菌药物使用不当行为的人群比例低,提示抗菌药物正确使用行为规范科普宣传有待提高。因此,下一步将加强具体行为规范的科普,针对不同年龄段、不同教育背景人群开展更有针对性的宣传,强化认知到行为的转变,促进全人群合理用药的行为规范,以达到“扩大认知,遏制耐药”的公共卫生目标。

摘要：纳秒电脉冲消融是一种新型的电外科手术技术,在肿瘤切除中可以无创或少创器官旁组织,尤其是血管,达到既切除肿瘤,又不伤及周边组织的目的。纳秒电脉冲参数,如脉冲电压、脉冲持续时间、脉冲数、脉冲率等的选择是术前治疗计划设计的关键,术前进行仿真研究对手术设计至关重要。以人体模型Duke为对象,采用人体生物电磁仿真软件平台Sim4Life中的时域有限差分法(FDTD),对电脉冲波形、脉冲电压和电极间距在肝组织中的电场、能量密度、消融区域进行仿真。结果显示,在肝组织及旁组织中,电极中心电场强度较高,周边较低;脉冲波型对肝组织中电场和能量密度分布没有显著改变;消融区域包裹着电极;脉冲波型对消融区域没有变化,但脉冲电压和电极间距对消融区域有很大影响。因此,FDTD可以术前对电脉冲治疗计划设计,脉冲电压和电极间距两个参数是主要设计参数,Sim4Life是治疗计划设计的良好平台。

摘要：目的建立快速检测A（H3N2）亚型流行性感冒病毒（简称流感病毒）神经氨酸酶（NA）基因E119V奥司他韦耐药突变位点的双重实时荧光定量逆转录PCR（rRT—PCR）方法。方法由GenBank获取2000--2012年A（H3N2）亚型流感病毒NA基因序列26条，据此设计特异性靶向NAE119V突变位点的TaqMan—MGB探针进行双重rRT—PCR反应，并利用耐药参考株、临床分离株进行敏感性、特异性和重复性评价。结果建立了快速检测NA基因E119V位点的双重***检测方法。本方法在A（H3N2）病毒（HA=8）稀释度至10。仍可检测到荧光信号，病毒滴度的对数与ct值之间呈线性相关，具有较高的灵敏度；与无耐药突变的A（H3N2）流感病毒及其他呼吸道病毒均无交叉反应，两条TaqMan—MGB探针之间不存在交叉反应，具有很高的特异性，并能够检测耐药株和敏感株混合病毒中的耐药突变，在较高浓度的混合病毒中对耐药突变的检测限是5％，在低浓度混合病毒中的检测限是50％。重复性试验得到H3N2—119E和H3N2—119V两组探针批内平均变异系数（CV）值分别为2．32％和0．57％，批间CV值分别为1．77％和0．97％，具有较好的重复性。对其中20株病毒的NA基因序列进行分析，证实这些毒株的NA基因119位点均为谷氨酸（E），表明本研究设计的方法与序列测定结果一致。结论建立了基于TaqMan—MGB探针检测A（H3N2）亚型流感病毒E119V耐药突变的双重rRT—PCR方法，该方法灵敏、特异、重复性好，实验过程和结果判读简单易操作。

摘要：目的描述HIV/AIDS患者开始ART后AIDS相关和非AIDS相关死亡情况及变化趋势,并构建两种死亡预测模型。方法采用回顾性队列设计,分析2004-2019年就诊于广州某医院的HIV/AIDS患者基线和随访数据。采用累积发生函数法估计AIDS相关和非AIDS相关死亡累积发生率,基于自助法估计两者率比及95%CI。采用部分分布比例风险回归模型构建HIV/AIDS患者AIDS相关和非AIDS相关死亡预测模型,利用时依ROC曲线、校准图、Brier得分评估模型预测效能,应用十折交叉验证进行模型验证,最后绘制列线图实现模型可视化。结果16452例HIV/AIDS患者共发生404例死亡,其中AIDS相关死亡194例。非AIDS相关与AIDS相关死亡率比在1~10年随访期间呈增加趋势,并从第7年开始率比大于1,且有统计学意义。HIV/AIDS患者AIDS相关和非AIDS相关死亡模型共同预测因子包括年龄、感染HIV途径、结核病病史、临床症状种类数、CD4细胞计数、贫血程度、初始ART方案;而性别、白细胞水平、总胆红素水平仅是前者预测因子,血小板水平是后者预测因子。AIDS相关死亡预测模型在不同时间点的AUC(t)值较理想,第1年达0.89,校准曲线和Brier得分均显示模型具有较好的校准能力,十折交叉验证结果也表明模型预测性能较稳定。结论2004-2019年广州市HIV/AIDS患者开始ART后死因构成比有所变化,尤其在随访中后期非AIDS相关死亡占比更大。在目前相关预测模型不足的背景下,本研究构建的预测模型可作为临床医生早期识别不同死因高危患者的参考工具,同时也为决策者制定疾病管理计划等提供理论佐证。