摘要：目的:建立一种快速、简单的SNP(Single Nucleotide Polymorphisms)检测方法。方法:设计带生物素标记的扩增引物对检测用具有单碱基差异的野生型和突变型靶序列分别进行扩增,然后通过紫外交联的方式将相应检测靶序列的探针固定在硝酸纤维素膜上,借助Taq酶完成膜上单引物延伸,从而对探针捕获的靶序列进行延伸固定在膜上,最后使用生物素-亲和素酶联显色(ABS-ELISA)反应肉眼观察结果。结果:阳性和阴性对照探针显示正常。野生型探针和突变型探针能够分别特异性结合靶序列,并通过生物素和亲和素显色系统放大为一种肉眼可判断结果的检测形式。结论:建立了一种基于硝酸纤维素膜载体上进行核酸扩增的SNP检测方法。

摘要：目的:建立HBV基因分型高通量液相芯片检测技术,并探讨其应用价值。方法:对GenBank中收录的明确分型的HBV基因序列进行分析,选择preS2-S区设计引物和A、B、C和D型特异性探针。与荧光编码微球偶联的特异型探针与一条引物生物素标记的PCR产物直接杂交反应,然后结合亲和素标记的藻红蛋白,用流式检测仪(Bio-Plex 200)检测荧光信号。检测182份阳性乙肝患者血清DNA,其中35份样品检测结果与测序法比较。用B、C型质粒DNA倍比稀释及混合样品检测灵敏度来评估该方法。结果:建立了HBV基因分型的快速高通量液相芯片检测方法。182份患者血清检测结果为:B型占24.2%(44/182),C型占71.4%(130/182),D型为6.6%(12/182),BC混合型4.4%(8/182)。其中35份样本与测序法比较,除3份混合型测序法未检出外,其它32例结果均相同。本方法的灵敏度检测下线为1×103copies/mL。结论:应用悬液芯片技术进行乙肝病毒的基因分型分析,具有较好的特异性和较高的灵敏度,并有简便、灵活和高通量等优势。该检测系统不仅在科研中有广泛的前景,也有望成为临床推广的多重分子诊断和基因分型的新方法。

摘要：目的:分析江苏省建筑生产企业外来务工人员艾滋病相关健康信念及其与艾滋病预防行为的关系。方法:采用问卷调查方法收集江苏省外来务工人员艾滋病健康信念与艾滋病预防行为的资料,分析其艾滋病健康信念和艾滋病预防行为及信念与行为的关系。结果:调查对象的艾滋病健康信念得分不高,总分7.2分,其中易感性得分和行为效益得分低于其他两项得分。外来务工人员发生性行为时每次都用安全套的仅占8.9%。相关分析显示安全套使用频率与健康信念4个项目得分均呈正相关。结论:外来务工人员发生性行为时安全套使用率低,今后可以健康信念模式为理论框架来设计艾滋病行为干预策略。

摘要：目的利用侧流层析–重组酶聚合酶扩增(LF-RPA)技术建立快速、敏感、特异的土拉弗朗西斯菌(土拉菌)检测方法。方法基于土拉菌特异性基因(tul4)设计重组聚合酶恒温扩增方法的引物及探针,优化反应时间和温度,同时评价该方法的灵敏度及特异性,并通过模拟血液样品评估此方法的实用性。结果该方法最佳反应条件是40℃,20 min,可检测核酸浓度最低为20fg/μl,与实时荧光定量PCR(qPCR)方法相近,且不与7种非土拉菌发生交叉反应。土拉菌模拟样本最低检测浓度为460CFU/ml。结论该检测方法操作简单,特异性良好,敏感度高且无需大型精密实验设备,在临床及现场检测土拉菌中具有应用前景。

摘要：目的设计并实现基于基本数据集和互联网的国家或区域性医院感染过程数据监测平台。方法依据WEB信息系统原理,利用J2EE轻型构架进行开发,并利用大型关系数据库实现数据存储等技术,通过对感染信息的标准化,提取标化后的信息,统计分析医疗机构的住院患者感染全过程数据,进行区域性医院感染信息的实时监控和追踪。结果实现了基于基本数据集对各医疗机构感染信息的标化、提取、分析和比较,实现了对国家或区域性医院感染过程信息的实时监测和追踪,使国家、省、地市各级卫生行政部门和医院感染管理质量控制中心掌握区域内医院感染发生情况,并进行评价、比较和反馈。结论建立了基于基本数据集和互联网的国家、区域性医院感染实时监测平台,促进了医院感染数据的共享和比较,有效提高了医院感染数据的利用水平和分析价值,促进了感染预防控制模式的转变。

摘要：目的建立一种实时荧光逆转录重组酶介导的等温扩增(reverse transcription recombinase-aided amplification,RT-RAA)技术检测寨卡病毒(Zika virus,ZIKV)的方法,以实现ZIKV的现场快速筛查及诊断。方法通过基因组序列比对,选择ZIKV保守序列设计RT-RAA特异性引物和探针,并用系列稀释的ZIKV重组质粒与毒株核酸验证方法的灵敏性与重复性,通过检测登革病毒、基孔肯雅病毒、西尼罗病毒等其他虫媒病毒验证方法的特异性。结果建立的RT-RAA方法可在39℃恒温条件下30 min内对ZIKV进行高效扩增,检测系列稀释的ZIKV重组质粒,其95%检测限可达到15拷贝/反应,特异性强,与登革病毒、基孔肯雅病毒、西尼罗病毒虫媒病毒无交叉反应,且重复性好。结论本研究建立的ZIKV的RT-RAA等温扩增方法,具有反应迅速,无需精密仪器,操作简单等优点,适合于应急快速检测。

摘要：CRISPR-Cas免疫系统在天然状态下保护细菌和古生菌免受外来质粒或噬菌体的入侵。研究者们根据Ⅱ型CRISPRCas系统开发了全新的基因编辑工具——CRISPR-Cas9,它利用与靶序列互补的向导RNA引导Cas9酶定点切割DNA,该技术具有设计简单、操作方便、特异性强、效率高等优势,成为新一代基因组编辑技术。本文综述了CRISPR-Cas系统的技术发展史、最新分类和作用原理,重点介绍了近几年来CRISPR-Cas9系统应用于真核细胞领域的研究进展。

摘要：目的了解甲型H1N1流感(以下简称"甲流")患者患病期间相关卫生行为习惯及其影响因素,为今后流感等呼吸道传染病流行时期提供有针对性的健康教育提供依据。方法以统一设计的调查问卷,委托国家12320卫生热线对北京、福建和河南三省市896例甲流患者开展电话调查。结果甲流患者在生病期间,去医院就诊戴口罩的比例为75.1%,但去人员密集的公共场所后戴口罩的比例仅为39.0%,乘坐交通工具后戴口罩占62.9%,与他人密切接触时戴口罩为60.6%;打喷嚏时遮挡占75.0%,其中遮挡方式主要为用手(42.7%),其次为纸巾(38.7%),上衣袖(9.4%)。接受过健康教育的患者卫生行为习惯表现较好;与医院隔离和居家隔离的患者比较,住院后居家隔离(出院时未痊愈)的患者卫生行为习惯较差,差异有统计学意义(P<0.05)。结论需要对流感等呼吸道传染病患者加大宣传正确的个人卫生行为习惯;特别是出院时未痊愈的流感或其他呼吸道传染病患者进行出院健康教育,改善不良行为习惯。

摘要：探讨肝气虚与肝阳虚的病理机制,并结合名家的临床经验阐述从肝气虚与肝阳虚论治慢性乙型肝炎的临床意义。

摘要：疫苗是预防百日咳(pertussis)的最有效措施,但无细胞百日咳疫苗接种后免疫力的迅速衰退是近年来百日咳发病率上升的原因之一。百日咳毒素(pertussis toxin,PT)是由百日咳鲍特菌(Bordetella pertussis)分泌的主要毒力因子,具有多种生物学活性。在无细胞百日咳疫苗设计初期,为确保疫苗的有效性,抗PT的单克隆抗体(单抗)常被用来检测PT表面重要的抗原表位。研究表明,与天然PT特异性结合的部分单抗无法识别经化学方法脱毒后的PT,提示化学脱毒会改变疫苗中PT的一些抗原表位,进而影响疫苗保护效果。现结合单抗可用来研究抗体干扰PT功能的分子机制,对机体在感染百日咳后的保护性免疫机制进行综述,以期为无细胞百日咳疫苗的进一步改进及开发人源化抗PT单抗治疗百日咳提供科学依据。