摘要：目的:探讨利用干扰RNA(RNAi)抑制血管内皮生长因子(VEGF)基因表达对乳腺癌细胞MCF-7增殖和凋亡的影响。方法:设计针对VEGF基因的小干扰RNA(siRNA),合成DNA模板,体外转录siRNA。以脂质体转染法将双链siRNA导入MCF-7细胞后,用MTT比色法检测siRNA对MCF-7细胞增殖的影响。通过Hoechst33258染色观察MCF-7细胞的凋亡。用流式细胞术检测细胞周期的改变,RT-PCR检测VEGFmRNA表达的变化,免疫细胞化学法检测VEGF蛋白的表达。结果:所设计的两个靶位点siRNA,均能有效地抑制MCF-7细胞的增殖,诱导细胞凋亡,使细胞周期阻滞于G0/G1期,VEGFmRNA及其蛋白的表达明显减少;而作为阴性对照的错义序列组siRNASCR则没有上述效应。结论:体外转录合成的siRNA可抑制MCF-7细胞中VEGF基因的表达,抑制细胞增殖,促进细胞凋亡。

摘要：利用草炭、蛭石、珍珠岩为原料的育苗基质 ,运用正交试验设计 ,加入不同浓度的氮、磷、钾肥料 ,进行了番茄、黄瓜、茄子和甜椒穴盘育苗研究。结果表明 ,不同施肥品种与施肥量对果菜类蔬菜幼苗生长的影响具有显著差异 ,施用磷肥与供试 4种蔬菜幼苗株高和干物重增长的相关性达到显著或极显著水平 ,是培育优质壮苗的重要营养元素 ;氮、磷、钾肥料配合施用 ,是培育优质壮苗的关键。供试穴盘育苗混合基质中的最佳N、P2 O5、K2 O施肥量分别为番茄 0 .2、0 .4、0 .2kg m3,黄瓜 0 .8、0 .2、0 .1kg m3,茄子 0 .8、0 .4、0 .2kg m3,甜椒 0 .4、0 .4、0 .4kg m3。

摘要：采用磷酸活化褐煤半焦为载体,负载多种金属氧化物制备了催化裂化(FCC)柴油吸附脱硫剂。煅烧温度、载样种类、浸渍比、煅烧时间和浸渍时间等因素都会对脱硫剂的性能产生显著的影响,按正交实验设计方法,采用FCC柴油为原料,考察了这5种因素对脱硫活性的影响。结果表明,半焦载体的煅烧温度对于脱硫活性的影响最为显著,最佳的煅烧温度为700℃,其他影响因素依次为:载样种类CuO、浸渍比1.5∶1、煅烧时间1.5 h和浸渍时间20 h。实验还考察了采用最佳制备条件得到的吸附脱硫剂在空速为2 h-1和120℃条件下的脱硫性能,并对其失活样品在350℃进行水蒸气再生。结果表明,无论是新鲜脱硫剂还是再生样品,其脱硫率都随脱硫时间的延长而下降,且再生后脱硫剂脱硫效果明显下降。

摘要：太阳能路灯工程设计的关键是太阳能电池组件、蓄电池、照明光源的配置组合达到最优。照明光源功率确定后较易匹配蓄电池容量。由于光照受气候环境、地理位置的影响较大,因此选择合适功率的太阳能电池组件非常关键。依据理论计算或气象资料设计方法确定的太阳能电池组件容量偏差较大。在常规设计方法基础之上,将计算出的145 W太阳能电池组件容量调整为80 W,通过连续实时跟踪监测,结果表明:该设计降低了系统成本,节省了使用空间。

摘要：背景:血管脱细胞组织基质作为天然生物支架材料的制备与临床应用具有一定的时差,保存条件对其影响逐渐收到人们重视。目的:拟观察不同液氮保存时间对脱细胞血管基质支架材料组织形态及力学特性的影响。设计、时间及地点:随机分组设计,对比观察,于2007-08/2008-05在青岛市市立医院心脏外科实验室完成。材料:健康新西兰兔10只,体质量550~600g,用于制备脱细胞血管基质。方法:采用胰蛋白酶、低渗溶液、化学除垢剂法处理兔胸主动脉制备脱细胞血管基质。根据液氮保存时间的不同将制取的血管随机分为液氮1月组,液氮2月组和液氮3月组;另设新鲜组:未用液氮保存而作为对照。主要观察指标:苏木精-伊红染色、扫描电镜观察各组脱细胞血管基质形态变化,并作力学测试,包括Lagrange应变、Lagrange应力、伸长比和极限应力。结果:苏木精-伊红染色可见新鲜组血管脱细胞组织基质中胶原纤维和弹性纤维保持原来的形态和结构,呈网状排列,细胞已基本去除。液氮保存组光镜下见与新鲜组无明显差异。扫描电镜见新鲜组血管脱细胞组织基质的纤维结构完整,胶原纤维无断裂,为网状和多孔状,孔径为(100~150)×(10~20)μm。液氮保存组胶原纤维结构完整,呈网状排列,胶原纤维无断裂现象,孔径与新鲜组无明显差异。各组力学指标相比,差异无显著性意义(P>0.05)。结论:不同液氮保存时间对脱细胞血管基质的形态学、组织学以及力学特性方面没有明显影响。

摘要：目的:构建重组厌氧芽胞梭菌saccharobutylicum内源性β-1,4葡聚糖酶启动子(eglA p人)-表皮生长因子受体2胞外区(hHer2/neu ECD人)-白细胞介素12(rhIL-12)融合基因穿梭表达载体(pIMP1 eglA p-hHer2/neu ECD-rhIL-12),为进一步制备eglAp-hHer2/neu-rhIL-12融合基因修饰的厌氧芽胞梭菌,并探讨其对Her2/neu+实体肿瘤的基因治疗作用奠定基础。方法:以含有全长hHer2/neu序列的真核表达质粒(pcDNA3.1 hHer2/neu)为模板,采用PCR方法,扩增hHer2/neu ECD基因片段;将其插入重组rhIL-12真核表达质粒pcD-NA6 rhIL-12(p1)中的rhIL-12基因上游,获得pcDNA6 hHer2/neu ECD-rhIL-12(p2)真核表达质粒;设计合成eglAp基因中一段55 bp序列作为模板,通过连续PCR的方法,扩增eglAp片段(335 bp),并构建T-eglA p(p3)亚克隆质粒;通过酶切连接的方法,将eglA p片段插入p2质粒中的hHer2/neu ECD基因上游,构建pcDNA6 eglA p-hHer2/neu ECD-rhIL-12(p4)真核表达质粒;通过in-fusion技术,将融合基因eglAp-hHer2/neu ECD-rhIL-12插入pIMP1穿梭表达质粒,构建重组pIMP1eglA p-hHer2/neu ECD-rhIL-12(p5)穿梭表达载体,并进行菌液PCR、酶切及测序鉴定。结果:获得的hHer2/neu ECD和eglA p片段及p2、p3、p4重组质粒、p5融合基因重组穿梭表达载体,其PCR产物和酶切片段大小与预期一致,测序结果证实各基因序列与GenBank中mRNA或DNA序列一致。结论:成功地构建了大肠杆菌-厌氧芽胞梭菌融合基因穿梭表达载体(pIMP1 eglAp-hHer2/neu ECD-rhIL-12),为进一步制备eglAp-hHer2/neu ECD-rhIL-12融合基因修饰的厌氧芽胞梭菌,探讨其对Her2/neu+实体肿瘤的基因治疗作用奠定基础。

摘要：目的:研究不同分子量及不同浓度的壳聚糖对口腔常见致病菌的体外抑制作用。方法:采用纸片药敏试验,检测不同分子量及不同浓度壳聚糖(浓度为2.0%,1.5%,1.0%,0.5%)在pH6.5时对金黄色葡萄球菌、白色念珠菌、幽门螺杆菌、牙龈卟啉单胞菌和变形链球菌的抑菌环直径;测定不同处理方法对其抑菌效果的影响。组间比较采用随机区组化设计方差分析、完全随机设计方差分析及t检验。结果:不同分子量壳聚糖在pH值6.5时对金黄色葡萄球菌、白色念珠菌、幽门螺杆菌、牙龈卟啉单胞菌、变形链球菌均有抑制作用,但多以小分子量的抑菌作用最好(变形链球菌以大分子量最好)(P0.05)。结论:壳聚糖在pH6.5条件下对口腔常见致病菌有抑制作用。

摘要：为建立山楂中熊果酸的提取工艺及测定方法，实验以熊果酸的得率为检测指标，采用正交设计L16（4^5）。考察提取时间A、乙醇浓度B、料液比C三个影响因素，用高效液相色谱法进行含量测定。结果表明，因素B和C对熊果酸的得率有显著影响，因素A影响不明显，最佳工艺条件为A3B4C3，即每次用12倍量的95％乙醇提取3h。

摘要：RNA干涉(RNA interference,RNAi)是指序列特异性的转录后基因沉默,它已经发展成为高效、特异阻断目的基因表达的有效工具。据此,我们针对人VEGF_(165)基因mRNA序列,设计了2个干涉靶位点,体外转录合成siRNA,通过脂质体转染入HeLa细胞,分别体内、体外观察对HeLa细胞凋亡的影响。

摘要：动力卡盘是机床夹具的重要附件,这里以Φ250卡盘为例在加工较大尺寸的工件时存在的问题,并对原有的常规结构提出了相应的改进措施,设计一种分体式动力卡盘,解决卡盘加工精度和磨损问题。