摘要：为制备猫传染性腹膜炎病毒N蛋白特异性多克隆抗体,研究根据HLJ/HRB/2016/11毒株N基因序列设计引物,通过PCR进行基因扩增,并将目的基因在Bam HⅠ、HindⅢ酶切位点克隆至pET32a(+)原核表达载体上,将其转化到BL21(DE3)感受态细胞,经终浓度为1 mmol·L^(-1)的IPTG在16℃诱导16 h后,SDS-PAGE检测表达产物,结果显示,在约69 kda处出现目的条带,且该蛋白主要以可溶形式表达。将重组N蛋白经Ni柱纯化后,按每只BALB/c小鼠免疫50μg,三免后7 d采血分离血清,经间接ELSA检测结果显示,获得的N蛋白可被特异性识别且效价可达到1∶12800。研究制备的猫传染性腹膜炎病毒N蛋白及其多克隆抗体为后续猫传染性腹膜炎的疫苗提供基础。

摘要：响应面法优化黑豆中植酸的超声波提取工艺。以10%硫酸钠-盐酸作为浸提液,植酸得率作为指标进行单因素实验,在此基础上,选择pH、料液比、温度、超声功率进行响应面试验设计。结果显示最佳提取条件为:提取液pH2,料液比1∶14,温度60℃,超声功率240 W,时间20 min,植酸得率为12.39 mg/g。相对于振荡提取法,植酸得率提升13.56%,减少了溶剂的使用量,缩短了提取时间。所建立的超声波提取方法能够充分提取黑豆中的植酸,可为黑豆植酸的其他研究提供技术支持。