摘要：为了构建基于CRISPR/Cas9系统的蒺藜苜蓿高效基因组编辑载体,便于开展蒺藜苜蓿的基因组编辑研究,试验以蒺藜苜蓿基因组中的PDS基因为靶标,应用CRISPR-P软件设计2条特异sgRNA靶位点序列,以pYLCRISPR/Cas9-P35S为骨架载体,以适合双子叶植物的AtU3b作为sgRNA转录启动子,并引入可以显著提高基因编辑效率的tRNA保守序列,采用Golden Gate克隆法构建双靶点CRISPR/Cas9植物表达载体。结果表明:针对蒺藜苜蓿PDS基因设计的双靶点pYLCRISPR/Cas9植物表达载体的各个表达盒组装顺序完全正确,DNA碱基序列准确无误。说明pYLCRISPR/Cas9-AtU3b-tRNA-sgRNA基因编辑载体构建成功,可以为进一步开展农杆菌介导的蒺藜苜蓿基因组编辑研究提供载体,为双子叶植物开展基因编辑研究提供新的载体构建策略。

摘要：根据GenBank公布的的SIP基因序列,设计一对特异性引物,通过对PCR方法的优化,建立了牛无乳链球菌性乳房炎的快速PCR检测方法。用建立的PCR检测方法对患牛乳中无乳链球菌总DNA进行扩增,获得大小为945bp的DNA片段。特异性试验表明,停乳链球菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌DNA均未扩出条带;敏感性试验表明,该对引物能够检测到的最低DNA浓度为1.25ng;重复试验表明该方法具有良好的重复性和稳定性。

摘要：以寒地节水抗旱水稻新品系及黑龙江省首个国标一级米龙稻18为试材,分析其在正常栽培条件下产量和品质,并利用主成分分析(PCA)的方法对品质性状进行综合评价。结果表明,921产量最高,极显著高于其他材料(p<0.01);917稻米蛋白质含量最低,硬度最小,米饭弹性最好,食味值最高且极显著高于龙稻18及其他材料(p<0.01)。通过PCA提取了3个主成分(PC),PC 1方差贡献率最大,为49.3%,综合了蛋白质、弹性、直链淀粉含量;PC 2方差贡献率为23.112%,综合了外观、口感、综合评分;PC 3方差贡献率为19.774%,综合了硬度、食味值。品质综合评价值排序为:917(0.887)、928(0.701)、龙稻18(0.675)、913(0.481)、921(0.358)、914(0.219)。结合人工品尝可知,917食味优于龙稻18,928食味与龙稻18相当。