摘要：设计合成了一种发夹型核酸适体（Aptamer），结合聚合酶反应建立了蛋白质荧光分析新方法．该核酸适体同时作为蛋白质配体和聚合反应模板，与靶蛋白特异结合后，其构象发生了变化，启动聚合反应，从而在未直接标记核酸适体的情况下，通过监测聚合反应进程来检测蛋白质的浓度．采用该方法检测凝血酶的线性范围为0．5～8nmoL／L，检测下限为0．5nmoL／L，为蛋白质检测提供了一种简便快速的非直接标记的荧光分析方法，有望在蛋白质组学的研究中得到广泛的应用．

摘要：以核酸适体作为识别分子,建立了一种简单、灵敏特异的蛋白质检测新方法.该方法以凝血酶为目标蛋白,针对其两个结合位点,分别设计了两条具有3′末端互补碱基序列的核酸适体探针.当两条探针同时与凝血酶结合时,末端借助接近效应形成稳定的杂交并在聚合酶的作用下发生聚合反应,双链DNA产物的量通过Sybr GreenⅠ的荧光信号指示出来.实验结果表明,聚合反应初速度与凝血酶的浓度正相关.本方法中核酸适体探针设计简单灵活,对目标蛋白选择性和灵敏度高,检测下限可达到6.9pmol/L.

摘要：报道了一种基于发夹型荧光探针的甲基化酶活性的分析方法,甲基化酶和相应的限制性内切酶的识别位点被设计在发夹型探针的茎部,四甲基罗丹明(TAMRA)被连接在探针的5'端,其荧光被连在3'端的熄灭基团4-(4'-二甲基对胺基偶氮苯)苯甲酸(DABCYL)所熄灭.限制性内切酶可切割未发生甲基化修饰的探针,导致探针的发夹结构遭到破坏,引起TAMRA荧光信号的恢复.根据荧光信号的恢复程度可实现对甲基化酶活性的分析.在此基础上,建立了一种简便、快速分析抗肿瘤药物对DNA甲基化酶活性的影响的方法,为筛选针对基因甲基化异常引起的恶性肿瘤的治疗药物提供了一种新的思路和方法.

摘要：根据肿瘤抑制基因p21序列设计合成分子信标,通过显微操作将其注入p21表达水平存在差异的两种鼻咽癌细胞内,以活细胞成像方式动态检测了分子信标进入鼻咽癌细胞后荧光信号的变化.p21分子信标注入两种细胞后,荧光信号均逐渐增强,约15min后达到最大值;注入细胞后4min内,细胞间荧光增强速率存在明显差异,该差异反映了p21mRNA表达水平的变化趋势,与常规逆转录PCR(RT-PCR)结果相符.在使用分子信标进行活细胞内mRNA表达水平的研究中,通过分析荧光增强速率的变化,可有效降低细胞内的酶的影响,提高检测结果的准确性.