摘要：利用全自动机械搅拌发酵罐对A型产气荚膜梭菌α-毒素的生产发酵工艺进行研究。设立温度、pH值和发酵时间3个因素,采用L9(34)正交优化设计方法,确定各因素对A型产气荚膜梭菌α-毒素产毒量的影响程度,并绘制发酵过程细菌生长曲线和产毒曲线。结果显示,pH对细菌的产毒量影响显著(0.010.05)。结果表明,pH7.0、发酵温度43℃、发酵时间6 h为A型产气荚膜梭菌α-毒素生产发酵工艺条件。

摘要：目的研究水中产气荚膜梭菌的荧光定量PCR检测方法,缩短水中产气荚膜梭菌的检测时间。方法根据产气荚膜梭菌的α-toxin基因设计引物并扩增,构建α-toxin-T重组质粒,对重组质粒进行梯度稀释后进行荧光定量PCR检测;用该方法检测水中常见的15种细菌,确定方法的特异性;检测产气荚膜梭菌加标水样,验证方法的可行性。结果成功扩增出产气荚膜梭菌的α-toxin基因并连接T载体(417 bp)。α-toxin-T重组质粒的稀释度在2.17×10~0~2.17×10~9 copies/μl的范围内,PCR反应的特异性良好,且重组质粒各浓度梯度间间隔的Ct值相近;所得回归方程为y=31.69-3.11x,r=0.997 73;该方法的检出限可达到为10 copies/μl。15株受试细菌DNA的检测结果均为阴性,产气荚膜梭菌加标水样检测结果阳性。结论该方法操作快速,具有较好的特异性和灵敏性,适用于水中产气荚膜梭菌的快速检测。