摘要：在液体发酵单因素研究的基础上,通过二水平设计的Plackett-Burman试验确定3个对黑曲霉产α-葡萄糖苷酶影响的关键因素:玉米淀粉用量、装液量和温度。再通过最陡爬坡实验逼近最大酶活区。最后利用响应面法中的Box-Behnken试验设计,进行三因素三水平的响应面分析,以期获得黑曲霉产α-葡萄糖苷酶最优的发酵培养基和发酵条件。优化结果表明,黑曲霉产葡萄糖苷酶最优条件为:玉米淀粉55.8 g/L,玉米浆干粉30 g/L,接种量4%(体积分数),装液量49.3 m L(500 m L摇瓶),摇床转速240 r/min,初始p H4.8,发酵温度36.3℃。优化后α-葡萄糖苷酶活为375.5 U/m L。

摘要：以山芝麻粉为原料,以蒸馏水为提取剂,以多糖提取率为考察指标,采用超声辅助法提取山芝麻多糖。在单因素试验的基础上,设计响应面试验优化山芝麻多糖提取的工艺条件,并考察山芝麻多糖对α-葡萄糖苷酶的抑制率。结果表明,最佳工艺条件为提取时间42 min、提取温度83℃、液料比32 m L∶1 g,在此最优条件下,山芝麻多糖的提取率达到7.676%。山芝麻多糖的紫外、红外谱图分析可知,主要官能团有O—H键、糖类中甲基的C—H对称和非对称键、CO键和吡喃型糖环。比较同浓度下阿卡波糖片和山芝麻多糖对α-葡萄糖苷酶的抑制率发现,当浓度大于30μg/m L时,山芝麻多糖的抑制率高于阿卡波糖片。综合分析可知,山芝麻多糖有明显的降血糖功效,研究结果可为山芝麻降糖产品的开发提供参考。

摘要：以6株霉菌为出发菌株发酵提取α-葡萄糖苷酶,以麦芽糖为底物进行转苷试验,用高压液相色谱法分析,筛选出1株产酶活力较高的菌株黑曲霉41873,并对其液体培养产酶条件进行了优化。单因素试验发现最佳碳源为麦芽糖,最佳氮源为豆饼粉,钙离子对产酶有促进作用。为进一步优化产酶条件,采用Plackett-Burman试验设计,从8因素中选出影响产酶的3个重要因素:麦芽糖浓度、接种量和培养时间。利用响应面分析法预测了当麦芽糖浓度为19.8 g/L,培养时间为18.2 h,接种量为0.2 ml时酶活达最大,为549.65 U/ml,通过试验验证,实际酶活分别为529、544 U/ml,该模型有较好的预测性。

摘要：为了从藤黄中分离出黄酮类化合物并考察其对α-葡萄糖苷酶的抑制活性,试验采用大孔树脂、硅胶等提取分离、核磁共振确定化学结构的方法,建立了以4-硝基苯-α-D-吡喃葡萄糖苷(PNPG)为底物应用酶标仪测定吸光度的体系。结果表明:经结构鉴定,分离出了藤黄酸和新藤黄酸;藤黄酸、新藤黄酸的抑制活性均明显高于阿卡波糖(IC50=0.99 mg/m L),并且藤黄酸(IC50=0.18 mg/m L)优于新藤黄酸(IC50=0.24 mg/m L)。说明从藤黄中分离出的藤黄酸和新藤黄酸对α-葡萄糖苷酶有明显的抑制作用,活性优于阿卡波糖,具有很大的开发应用价值。

摘要：为了开发利用蚕沙中的亚氨基糖类降血糖活性成分,采用阳离子交换树脂对蚕沙中的总亚氨基糖类成分进行富集纯化。以1-脱氧野尻霉素(DNJ)的含量作为考察指标,在筛选阳离子交换树脂种类的基础上进一步优化富集纯化工艺条件,并对总亚氨基糖类提取物进行α-葡萄糖苷酶活性抑制试验。001×7强酸型(H+)阳离子交换树脂对蚕沙总亚氨基糖类成分的富集效果最好,最佳富集纯化工艺为:按1 g阳离子交换树脂、1 g蚕沙提取液的比例上样,依次以p H 1的HCl溶液、水、0.5mol/L氨水洗脱,收集氨水洗脱液;将得到的氨水洗脱部分再以中性氧化铝纯化后,以50%乙醇洗脱;乙醇洗脱液60℃减压浓缩即得纯化的蚕沙总亚氨基糖类提取物。采用上述工艺条件从蚕沙中富集纯化的总亚氨基糖类提取物对α-葡萄糖苷酶的IC50为(0.056±0.002)mg/m L,具有良好的降血糖活性。

摘要：目的探讨L-阿拉伯糖对小肠α-葡萄糖苷酶的抑制作用及与阿卡波糖的联用效应。方法利用体外实验,提取大鼠小肠粘膜上清液为α-葡萄糖苷酶粗酶液,分别以终浓度为60 mg/ml蔗糖、20 mg/ml麦芽糖/α-糊精为底物,建立最佳抑制反应体系,测定L-阿拉伯糖对α-葡萄糖苷酶抑制活性(IC50)及抑制作用类型;采用4×3析因设计,研究L-阿拉伯糖与阿卡波糖联用效果。结果以蔗糖、麦芽糖、α-糊精为底物时,L-阿拉伯糖对小肠α-葡萄糖苷酶活性均有一定抑制作用,但选择性较高地抑制蔗糖酶活性,当L-阿拉伯糖添加量为0.5%蔗糖浓度时酶活性抑制百分率>50%,最高酶活性抑制百分率约93%,且有良好剂量-反应关系,IC50为0.164 mg/ml,抑制类型为反竞争性抑制(Ki,0.558 mg/ml);与阿卡波糖联用二者有交互作用,尤其以蔗糖为底物时联用效果较明显,联合应用可能提高了抑制活性。结论 L-阿拉伯糖有抑制α-葡萄糖苷酶活性作用,尤其对蔗糖酶有良好的选择性抑制;在α-葡萄糖苷酶抑制作用方面,其与阿卡波糖有一定联用效果,L-阿拉伯糖在含糖食品中可能有较良好的实际应用前景。

摘要：以意大利蜜蜂α-葡萄糖苷酶基因(GenBank登录号NM_001040259)的保守区设计引物,从中华蜜蜂(Apis cerana cerana)工蜂中提取总RNA,逆转录成cDNA,进行RT-PCR,将扩增产物克隆到pGEM-T easy载体上,导入大肠杆菌JM109,阳性克隆经双酶切鉴定后测序,将测序得到的中华蜜蜂α-葡萄糖苷酶(alpha-glucosi-dase)基因与已知的意大利蜜蜂核苷酸序列比较,同源性为91.31%。氨基酸序列与意大利蜜蜂、黑腹果蝇、埃及斑蚊、冈比亚按蚊、印度蜜蜂、小蜜蜂、非洲爪蟾、日本蜜蜂、赤拟谷盗、尖音库蚊的同源性分别为90.83%、48.11%、47.28%、45.74%、42.25%、41.21%、38.10%、37.93%、35.56%、33.88%。首次从中华蜜蜂工蜂中成功扩增到长度为745 bp、编码α-葡萄糖苷酶(alpha-glucosidase)的基因片段(已提交GenBank,登录号为EF638842)。

摘要：优化青霉产α-葡萄糖苷酶培养基的3个因素配比。应用DPS v7.05统计分析软件中的三元二次正交旋转组合设计方案进行试验设计。通过二次多项回归方程寻优,当麦芽糖5.5%、蛋白胨1.25%、麸皮汁∶土豆汁3∶2,此时的酶活力达到最大4.23u/ml,比优化前酶活力2.49u/ml提高了41.1%。通过产酶验证试验得出实验值与模型预测值基本符合,说明二次正交旋转组合设计可用于产酶培养基组分的优化和分析。

摘要：肠膜明串珠菌(Leuconostoc mesentcroides ATCC8293)基因组中存在一个编码糖苷酶家族3保守区段的基因(Leum-0289),根据该基因序列设计引物,经过扩增和重组,成功将该基因插入到表达载体pET28a(+)中,实现了该基因的诱导表达。该基因包含2226个碱基,编码742个氨基酸,编码蛋白质理论预测分子质量为75kDa,表达蛋白经SDS-PADE分析,分子质量与理论值基本一致。纯化后的蛋白经酶活测定,发现该酶只能水解α-对硝基苯酚葡萄糖苷(pNPG)底物,无水解甘露糖、蔗糖、纤维二糖、乳糖和龙胆二糖的活性,遂命名为α-葡萄糖苷酶。进一步酶学性质研究表明该酶的最适反应温度和最适反应pH分别为40℃和pH6.5,Fe2+、Ca2+、Mg2+对重组α-葡萄糖苷酶有明显激活作用,而Cu2+、Zn2+对其有一定的抑制作用。

摘要：本研究合成了一种新型有机羧酸氧钒配合物-杨梅黄酮合氧钒,应用红外光谱、紫外光谱对其结构进行初步表征,并研究其对α-葡萄糖苷酶的抑制作用。结果表明:合成的双[3,5,7-三羟基-2-(3,4,5-三羟基苯基)-4H-1-苯并呋喃-4-酮]合氧钒为目标配合物,即杨梅黄酮合氧钒。0.4mg/L的杨梅黄酮合氧钒对α-葡萄糖苷酶抑制率达91.91%,抑制类型为竞争性抑制,表明所合成的梅黄酮合氧钒有望成为一种新型α-葡萄糖苷酶抑制剂。