摘要：目的 探讨胆囊收缩素A受体(CCKAR)的偏向性信号通路,设计治疗糖尿病的特异性药物,为其他G蛋白偶联受体(GPCR)偏向性信号通路的研究提供新思路。方法 构建受体与Gα亚单位(Gs、Gq)或者β-arrestin-1之间的融合蛋白,研究其偏向性信号通路。在确保融合蛋白能够正常表达的前提下,采用环磷酸腺苷(cAMP)累积实验检测细胞在硫化缩胆囊素八肽(CCK-8s)刺激后细胞内cAMP含量的变化;采用钙成像技术检测细胞在CCK-8s刺激后细胞内钙离子的变化;采用免疫印迹技术检测细胞在CCK-8s刺激后细胞外调节蛋白激酶(pERK)和Bcl-2死亡启动子(pBad)的磷酸化情况。结果 融合蛋白质粒(CCKAR-Gs/Gq/β-arrestin-1)能够在HEK293细胞系中稳定表达;CCKAR-Gs融合蛋白可以产生高的cAMP信号,非融合蛋白CCKAR产生低的cAMP信号,而CCKAR-Gq/β-arrestin-1不引起cAMP信号;CCKAR-Gq具有更强的钙离子信号;CCKAR-β-arrestin-1具有特异的信号偏向性,显著提升下游ERK蛋白和Bad蛋白的磷酸化水平。结论 人工构建的CCKAR融合蛋白能够有效、偏向性地激活CCKAR的下游信号通路,可以选择性地行使不同信号通路调控的生理功能。