摘要：目的 沙眼衣原体主要外膜蛋白(major outer membrane protein,MOMP)在维持沙眼衣原体结构稳定性和衣原体感染宿主细胞过程中发挥重要作用,为深入研究MOMP蛋白的功能及作用机制,使用人工合成多肽制备MOMP多克隆抗体。方法 分析沙眼衣原体MOMP的抗原表位,根据15个沙眼衣原体血清型MOMP保守肽段,设计并合成MOMP特异性肽段,与血蓝蛋白偶联后免疫新西兰兔。采用免疫亲和层析纯化免疫血清,应用SDS-PAGE和ELISA评估血清抗体纯度及效价,利用Western blot和免疫荧光染色鉴定MOMP抗体特异性。结果 纯化后的血清IgG抗体纯度为89.6%,MOMP抗体效价达1∶12 800,Western blot结果显示抗体与8个血清型沙眼衣原体蛋白在40 kDa处特异性结合,免疫荧光染色证实该抗体可特异性结合沙眼衣原体。此外,MOMP抗体与进口商品化抗体明显共定位于宿主细胞内,且两种抗体荧光强度相当。结论 本研究成功制备效价高、特异性好的沙眼衣原体MOMP的兔多克隆抗体,为后续深入研究MOMP的生物学功能提供了有力工具。

摘要：目的 对沙眼衣原体（Ct）主要外膜蛋白（MOMP）细胞毒性T淋巴细胞（CTL）表位进行预测和选择，并进行Ct MOMP多表位基因克隆和多表位蛋白的原核表达及其抗原性分析，为研制多表位Ct疫苗提供基础资料。方法利用SYFPEITHI法和多项式方案结合预测HLA-A2限制性的0MOMP的CTL表位，选取含多个CTL表位的基因片段作为目的基因，兼顾目的基因上下游存在的TH和B细胞表位的基因，共同组成含CTL、TH和B细胞表位的多表位基因。多表位基因经密码子优化后进行全序列合成，克隆入原核表达载体pET-32a（＋），经IPTG诱导在大肠杆菌BL21（DE3）表达并纯化，经SDS-PAGE和Western blot分析鉴定表达产物。结果 经预测筛选得到了多个MOMPHLA-A2限制性的CTL表位，成功克隆了含CTL、TH、B表位的MOMP多表位基因，并在大肠杆菌中获得了高效表达。表达产物的相对分子质量（Mr）约24×10^3，与预期肘，相符，并用Western blot方法初步证实多表位蛋白有抗原特异性。结论 成功设计了Ct MOMP的T、B细胞多表位基因，并证实在原核表达系统中获得正确表达的多表位蛋白具有良好的抗原性。

摘要：目的探讨E型沙眼衣原体（Q）主要外膜蛋白（MOMP）DNA疫苗和重组腺病毒联合免疫小鼠诱导的免疫效应。方法构建、纯化重组腺病毒Ad-MOMP及重组真核表达质粒pVAX1-MOMP。设计4种免疫方案，分别为DNA免疫（DNA组）、重组腺病毒免疫（Ad组）、DNA初次免疫一重组腺病毒加强免疫（DNA／Ad组）、重组腺病毒初次免疫-DNA加强免疫（Ad／DNA组）。末次免疫后2周检测小鼠血清特异IgG、IgG1、IgG2a、IgA抗体，阴道分泌物SIgA抗体及脾淋巴细胞分泌IFN-γ、IL-10水平。结果DNA组诱导较弱免疫应答，未产生sIgA抗体及Th1反应。Ad组诱导出Th1反应及sIgA抗体，且血清抗体显著高于DNA组。联合免疫均能诱导明显强于单独免疫的黏膜sIgA、血清抗体及Th1反应。Ad／DNA组的Th1反应强于DNA／Ad组；而DNA／Ad组的血清抗体和黏膜抗体水平强于Ad／DNA组。结论Ad—MOMP能诱导黏膜免疫及Th1细胞免疫应答，DNA／Ad及Ad／DNA联合免疫产生的特异性免疫应答明显强于单独免疫。其中Ad／DNA的Th1反应优势更明显，DNA／Ad的血清抗体和黏膜抗体反应更强。接种顺序会影响联合免疫的强弱及类型，这为Ct疫苗的设计研究提供新的思路和实验依据。

摘要：针对鹦鹉热嗜衣原体(Cps)的主要外膜蛋白(MOMP)基因和多形态膜蛋白(PMP)基因分别设计引物,建立荧光定量PCR方法,比较两对引物的灵敏度和特异性。试验结果表明,两对引物均可用于Cps检测,在样本中靶标浓度高时,PMP引物的检测灵敏度优于MOMP引物;但前者的扩增效率低于后者,后者更适合用于Cps的实时定量PCR检测。相对定量研究表明国内不同Cps流行株的PMP基因在基因组上的拷贝数可能存在较大差异。

摘要：沙眼衣原体(CT)检测方法很多,有Moccy细胞培养方法、直接涂片荧光抗体法、酶免疫法、探针杂交和PCR技术等.临床实验证明PCR技术敏感、特异,但敏感度也受标本收集、引物选择等多种因素的影响,本研究主要比较设计不同引物序列对PCR检测敏感度的影响.