摘要：白细胞介素17(interleukin-17,IL-17)是Th17细胞的特征性细胞因子,被认为是一种关键的炎性细胞因子,在宿主抵抗胞外菌、真菌感染,以及炎症、超敏反应、自身免疫性疾病等多种疾病的病程中起到了重要的作用。为研究IL-17A对山羊乳腺上皮细胞免疫防御功能的影响,本研究根据GenBank公布的奶山羊IL-17A完全CDS区序列设计了真核表达引物,从Con A活化的奶山羊外周血单个核细胞(PBMCs)中提取总RNA,反转录PCR法扩增目的序列。扩增出的目的片段连接于真核表达载体pEGFP-N1,并转入大肠杆菌Trans5α感受态细胞保存,将鉴定正确的重组质粒命名为IL-17A-pEGFP-N1。将重组质粒转染入HEK293T细胞进行瞬时表达,收取真核表达上清作为刺激物。选取成年健康奶山羊,通过组织块贴壁法制备原代山羊乳腺上皮细胞(GMEC)。用IL-17A真核表达上清(终质量浓度:15 mg/L)刺激山羊乳腺上皮细胞,通过Real-time PCR方法检测GMEC分泌的各种促炎性细胞因子、趋化因子以及防御性蛋白表达水平的变化。结果表明,IL-17A可以促进山羊乳腺上皮原代细胞分泌多种促炎性细胞因子、趋化因子和防御性蛋白,暗示IL-17A可能参与了奶山羊乳腺炎的发生,并在山羊乳腺免疫防御中起到了一定的调节作用。