摘要：目的　研究分子灯塔技术检测 N5、N10 -亚甲基四氢叶酸还原酶 (methylenetetrahydrofolatereductase,MTH FR)基因 C677T突变的可行性。方法　针对野生型和突变型 MTH FR基因分别设计分子灯塔 (荧光 -淬灭修饰探针 ) ,检测 2 2 8例标本 N5 ,N10 -亚甲基四氢叶酸还原酶基因 C677T突变情况。结果　发现 MTHFR基因型有 3种 ,即纯合子突变 (TT型 )、杂合子突变 (CT型 )和野生型 (CC型 ) ,其基因型频率分别为 18.0 %、49.5%和 3 2 .5%。每例标本均可明确鉴定其基因型。结论　分子灯塔技术是一种能够高度特异性、高通量、高度自动化检测 MTH FR基因突变的技术 ,而且这种技术还可运用于其他基因类似突变的检测 ,是一种检测已知基因突变的先进技术。

摘要：目的 :探讨早产和低出生体重与母亲和婴儿 5 10亚甲基四氢叶酸还原酶基因 (MTHFR)C6 77T多态性的关系。方法 :采用病例对照及核心家系的研究设计 ,共调查了 5 0 0个核心家系 ,包括 2 5 0个正常孕周出生的核心家系和 2 5 0个早产核心家系。采用盐沉淀法提取基因组DNA ,通过聚合酶链式反应 (PCR)对 5 10亚甲基四氢叶酸还原酶基因C6 77T多态性进行基因型鉴定。通过SAS软件的广义线性模型 (GENMOD) ,选用对数线性模型 (Log linearModel)中的泊松回归进行最大拟然比检验 (MaximumLikelihoodRatioTest) ,分析母亲和婴儿MTHFR基因分别与早产和低出生体重的关系。结果 :首先 ,我们采用TDT方法分别检验了早产和低出生体重对照核心家系MTHFR 6 77T等位基因传递是否平衡 ,研究结果表明MTHFR 6 77T突变等位基因传递符合孟德尔遗传规律。之后 ,我们分析了MTHFR基因与早产和低出生体重的关系。结果显示 :婴儿MTHFRCT和TT基因型不但增加早产的发生危险性且具有显著的统计学意义 (CT基因型 :OR =2 .0 1,95 %CI为 1.2 1～ 3.32 ;TT基因型 :OR为 1.82 ,95 %CI为 1.0 2～ 3.26 ) ,而且婴儿MTHFR基因能够增加低出生体重的发生危险且具有显著的统计学意义 (CT基因型 :OR =1.87,95 %CI为 1.0 8～ 3.2 4 ;TT基因型 :OR =1.

摘要：目的建立检测人亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因多态性荧光PCR的检测方法。方法用Primer Premier 5.0和Primer Express 3.0软件针对人MTHFR基因677多态性位点分别设计1对引物和2条TaqMan-MGB探针,通过GenBank在线比对分析评估引物的特异性,优化建立荧光PCR反应体系。以2个检测通道的循环阈值(Ct值)差值判断检测位点的基因型。评价该方法的最低检测限、准确度和精密度。用该方法检测300例临床样本,用核酸序列测定法对准确度进行评价。结果建立的荧光PCR法对MTHFR 677位点检测具有较高的准确度,最低检测限到达2 ng/反应。300例临床样本的检测结果与测序法的检测结果的一致性为100%。结论建立的MTHFR基因多态荧光PCR检测方法具有很好的准确度和精密度,适用于临床精准预测脑卒中发生风险和预后及指导孕妇个体化补充叶酸。

摘要：目的建立一种基于错配杂交及化学发光技术的检测亚甲基四氢叶酸还原酶(m ethylenetetrahydrofolate reducatase,MTH-FR)基因多态性的新方法。方法针对多态位点设计两条寡核苷酸探针,分别与野生型及突变型序列互补。将两条探针分别与含多态位点C677T的PCR扩增产物杂交,然后用化学发光法检测,根据两条探针的发光值之比确定样品的基因型。结果用本法随机检测了50例DNA样品,结果3种基因型的发光值之比可以严格区分,其中野生型(C/C)15例,杂合型(C/T)28例,突变型(T/T)7例,与参考方法(PCR-RFLP)的检测结果完全一致。结论本方法操作简便、检测快速而且费用低廉,可广泛应用于MTHFR基因突变及多态性检测。

摘要：目的建立一种基于错配杂交及酶联免疫检测亚甲基四氢叶酸还原酶(Methylenetetrahy drofolate redu-catase,MTHFR)基因多态性的新方法。方法针对多态位点设计两条寡核苷酸探针,分别与野生型及突变型序列互补。将两条地高辛标记的探针分别与含多态位点C677T的PCR扩增产物杂交,然后显色检测,根据两条探针的吸光度值之比确定样品的基因型。结果用本法随机检测了50例DNA样品,结果可见三种基因型的发光值之比可以严格区分,其中野生型(C/C)15例,杂合型(C/T)28例,突变型(T/T)7例,与参考方法(PCR-RFLP)的检测结果完全一致。结论本方法操作简便、检测快速而且费用低廉,可广泛应用于MTHFR基因突变及多态性检测。

摘要：目的探讨亚甲基四氢叶酸还原酶（MTHFR）基因C677T及A1298C多态性与饮酒间交互作用对食管癌发病的意义。方法以新诊断的食管癌患者为研究对象,采用病例-对照研究设计,用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析法（PCR-RFLP）检测MTHFR基因C677T及A1298C多态基因型,运用相乘模型分析MTHFR基因C677T及A1298C多态性与饮酒交互作用对食管癌发病的影响。结果MTHFR基因C677T多态基因型与饮酒指数间存在次相乘模型的交互作用,OR为10.892（2.461-65.927）;MTHFR基因A1298C多态基因型与饮酒指数间存在超相乘模型的交互作用,OR为8.339（1.131-61.459）。结论MTHFR基因C677T及A1298C多态基因型可增加过量饮酒者食管癌的患病危险性。

摘要：国际营养医学学术期刊Precision Nutrition近日发表了中国高血压人群中的一项多个剂量叶酸干预试验的研究流程和设计方案。论文题为A Randomized, Double-Blind, Controlled Trial on the Homocysteine-Lowering Effects of Different Doses of Folic Acid among Patients with Hypertension and Elevated Homocysteine according to Methylenetetrahydrofolate Reductase C677T Genotypes:Rationale and Methods(根据亚甲基四氢叶酸还原酶C677T基因型,对不同剂量叶酸对高血压和高同型半胱氨酸患者降低同型半胱氨酸效果的随机、双盲、对照试验:原理和方法)。来自南昌大学第二附属医院鲍慧慧和黄晓副教授为论文第一作者,程晓曙教授为通信作者。

摘要：国际营养医学学术期刊Precision Nutrition近日发表了中国高血压人群中首个也是最大的一项多个剂量叶酸干预试验的研究流程和设计方案。论文题为“A randomized,double-blind,controlled trial on the homo-cysteine-lowering effects of different doses of folic acid among patients with hypertension and elevated homocysteine according to methylenetetrahydrofolate reductase C677T genotypes:rationale and methods”(不同剂量叶酸治疗对亚甲基四氢叶酸还原酶C677T不同基因型高血压人群降低同型半胱氨酸疗效——随机、双盲、对照临床研究)。来自南昌大学第二附属医院鲍慧慧和黄晓副教授为论文第一作者,程晓曙教授为通信作者。

摘要：为探讨两对交叉引物PCR(PCR-CTPP)技术的原理并提高SNP分型的准确性,以人类MTHFR基因1298位点突变为例,通过设计合理的引物、优化引物终浓度及复性温度等重建PCR-CTPP检测系统,对比常规PCR-CTPP和改良的PCR-CTPP检测系统的可靠性。结果表明,改良的PCR-CTPP检测系统更加准确,支持了常规方法存在理论缺陷的观点;批量鉴定结果进一步验证了改良方法的可靠性。该技术有望在医学和分子生物学等领域广泛应用。

摘要：目的探讨MTHFR基因C677T和A1298C多态与非综合征性唇腭裂(NSCL/P)发生的关系。方法采用病例对照设计,应用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法,进行亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因C677T和A1298C多态性检测,并进行遗传统计分析。结果对于MTHFR基因C677T,48个杂合子父母及患儿的核心家庭TDT检验(χ2=0.02,P>0.05);76例NSCL/P患儿和60例正常儿童基因型及等位基因频数病例对照研究(χ2=9.91,P<0.05)。而MTH-FR基因A1298C,27个杂合子父母及患儿的核心家庭TDT检验(χ2=4.00,P<0.05);76例NSCL/P患儿和60例正常儿童基因型及等位基因频数病例对照研究(χ2=4.42,P<0.05)。结论MTHFR基因C677T位点多态与NSCL/P的发生相关,MTHFR基因A1298C位点多态可能是NSCL/P的遗传易感因子。