摘要：针对现有的荧光涨落超分辨显微成像运行平台算法不统一的现状,使用App Designer设计了基于MATLAB的多算法荧光涨落超分辨集成平台。该集成平台具有仿真生成荧光信号、调用多种超分辨算法、表征重建图像的强度相对误差和结构相似性等功能。通过该平台生成一组微管蛋白仿真图像序列以及使用荧光免疫标记方法采集一组细胞微管蛋白图像序列,使用4种荧光涨落超分辨算法进行图像重构。结果表明:4种超分辨算法可以显著提高成像分辨率,但每种超分辨算法重建图像在分辨率、强度相对误差等方面各有优劣;同时使用均值偏移算法预处理的重建图像具有更高的信噪比。该集成平台调用多种算法,并对重建图像进行质量评价,能用于生物亚细胞荧光超分辨成像及医学成像等方面的应用研究。

摘要：目的 观察大鼠OPTN基因的低表达对视网膜神经节细胞系（RGC5）亚细胞形态结构及存活的影响.方法 实验研究.设计并合成特异性针对Sprague-Dawley（SD）大鼠OPTN的3对RNA干扰片段（siRNA）,体外培养SD大鼠星型胶质细胞,取对数生长期的细胞做实验,分别将3对siRNA（si-OPTN-001、si-OPTN-002、si-OPTN-003）通过脂质体Lipofectemine 2000转染入星型胶质细胞,24 ～ 48 h后采用实时PCR和Western Blot检测siRNA的干扰效果,筛选出抑制效果最佳的序列;以筛选出来的siRNA序列构建绿色荧光蛋白EGFP标记的si-OPTN,并通过Lipofectemine 2000包裹转染RGC5,将RGC5分为4组：空白对照组,绿色荧光蛋白真核细胞表达载体（pEGFP）阳性对照组,si-OPTN组,脂质体阴性对照组.转染24～48 h后用细胞器特异荧光染料标记细胞内不同细胞器结构,通过共聚焦荧光显微镜来观察表达的si-OPTN在RGC5内的分布、定位及其对细胞器形态结构的影响;通过形态学观察和Hoechst33342-PI荧光染色观察si-OPTN对RGC5存活的影响.实验中不同组间的总体比较采用单因素方差分析.结果 实时PCR及Western Blot的结果显示：转染si-OPTN-001、si-OPTN-002和si-OPTN-003 24 h后星型胶质细胞内OPTN的mRNA表达下降,分别为阴性对照组的（61.71±0.84）％、（48.13±0.92）％和（46.22±0.73）％,而转染si-OPTN-001、si-OPTN-002和si-OPTN-003 48 h后星型胶质细胞内OPTN的蛋白表达水平下降,分别为阴性对照组的（64.44±2.01）％、（57.78±1.97）％和（37.78±1.84）％,其中si-OPTN-003与阴性对照组相比降低显著;si-OPTN转染RGC5细胞24 h后的转染效率为（17.43±0.94）％;转染48 h后的转染效率为（20.13±1.24）％;表达的si-OPTN在细胞内基本上均匀分布于整个细胞,覆盖胞质和胞核,与阴性对照组细胞器染色情况比较,转染细胞内的肌丝蛋白、线粒体、溶酶体及高尔基体形态结构未见明显损伤性改变;Hochest33342/PI荧光染色结果显示：转染24 h,与空白对照组（0.74±0.34）％和阴性对照组（0.96±0.41）％比较,EGFP阳性对照组及si-OPTN组整组的RGC5细胞凋亡率均增加,差异有统计学意义（F=5.457,P＜0.05）,但si-OPTN组转染质粒的细胞凋亡率明显低于阳性对照组,差异有统计学意义（F=6.541,P＜0.05）.随转染时间延长,在转染48 h时,阳性对照组凋亡率较24 h时下降,si-OPTN组凋亡率稍升高但无统计学意义（F=3.212,P＞0.05）,且仍低于阳性对照组.结论 相较于另2对si-RNA,si-OPTN-003更能有效地抑制OPTN的表达;si-OPTN转染RGC5后均匀分布于全细胞,对细胞内的亚细胞器结构未见明显损伤性改变;通过转染si-OPTN使OPTN表达降低可能对RGC5的存活有保护作用.

摘要：瞄准：为在活体内评估一根最新发达的手持的共焦的探针在啮齿类动物的完全的胃肠道的显微镜的成像。方法：一根新奇僵硬共焦的探针(直径 7 公里) 为 fluorophore 刺激用 488 nm 单身者线激光在人为使用与类似于灵活 endomicroscopy 系统的光特征被设计。轻排放在 505 ～ 750 nm 被检测。看法的地多样地是 475 妈妈 475 妈妈。光片厚度是有 0.7 妈妈的侧面的分辨率的 7 妈妈。在不同深度(到 250 妈妈的表面) 的表面下的连续图象多样地在 1024 点在实时被产生由在轻轻的、稳定的接触把探查放到织物上的 1024 个象素(0.8 frames/s ) 。织物标本为组织病理学说的关联被取样。结果：食管，胃，小并且大肠和中央，肝，胰和胆囊是在在 n = 的高分辨率的视觉 ised 在活体内 48 个鼠标。有共焦的微型显微镜学探查的实时显微镜的成像是容易的完成。不同染色协议(荧光黄，吖啶黄，标记 FITC 的葡聚糖和 L。可食用嗯植物凝血素) 织物的每个加亮的特定的方面，和在活体内成像与常规组织学最优地相关。在活体内血流监视把功能的质量加到词法成像。结论：共焦的显微镜学是在甚至表面下的织物结构的高分辨率允许完全的官方补给的道的可视化的可行在活体内。在这研究评估的新共焦的探查设计与腹腔镜检查兼容并且显著地扩展可能的应用的地到 intra 腹的机关。它允许新在活体内染色和申请选择的立即的测试因此在病人从动物研究允许快速的转移到临床的使用。

摘要：记录电信号飞速地通过神经元和心肌细胞不容易,用哈佛大学Charles Lieber等设计的一种新的纳米仪器,能够记录这些动作电位而不损伤细胞,还能探知树突等亚细胞结构。BIT-FET是一种分支的细胞内纳米管,将一条纳米线和一条纳米管接入一个纤细T型结构,后者能够插入细胞的同一处达5次之多,而不阻碍动作电位,亦不损伤细胞。穿入细胞的细小纳米管,宽50～100 nm,进入时吸取些许细胞质,后者与细胞外的纳米线接触,纳米线接受电压时,