摘要：亲环素a是亲环素家族重要成员,是重要的免疫抑制药物环孢素A的体内结合蛋白,除了具有肽脯氨酰顺反异构酶活性,亲环素a在一系列生物途径中发挥作用,如蛋白折叠、装配、转运、神经生长调节和HIV病毒复制。总结了天然产物抑制剂、肽类抑制剂和有机合成分子等亲环素a抑制剂的发现和发展历程,对亲环素a抑制剂的研究进展进行了综述。

摘要：通过电子克隆所得基因序列设计引物,采用RT-PCR方法首次克隆得到长度为885 bp的凡纳滨对虾亲环素a（Cyclophilins A）CYPA基因cDNA序列,其开放阅读框为35~529 bp,可编码164个氨基酸.推算其分子量约为17.6×103,理论等电点为8.55.与其他物种的CYPA基因比对发现,该基因的氨基酸序列具有较高的保守性.基于氨基酸序列的聚类分析表明,凡纳滨对虾与斑节对虾的亲缘关系最近.荧光定量PCR的结果显示该基因在组织中广谱表达,在抗病组中,胃中的表达量最高,心脏中的表达量最低,差异约为2倍.而在感病组中,该基因在心脏中的表达量最高,肌肉中的表达量最低.利用ProtFun在线预测蛋白质的功能分类,表明CYPA基因可能是一免疫应答抑制因子,参与凡纳滨对虾免疫防御反应.

摘要：目的克隆细粒棘球绦虫亲环素a（EgCypA）基因并体外表达纯化该蛋白以评价EgCypA的血清学免疫检测价值。方法利用生物信息学方法分析细粒棘球绦虫cDNA文库中的EgCypA的理化及生物学特性并设计引物，以细粒棘球绦虫cDNA为模板进行PCR扩增得到EgCypA基因，将该基因克隆到原核表达载体pET28a中，将重组载体导入大肠埃希菌，IPTG诱导该重组菌株表达EgCypA，使用聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS—PAGE）明确重组蛋白表达情况；利用Western blot法进行纯化的重组蛋白对细粒棘球绦虫感染血清及其他寄生虫感染血清免疫反应性的鉴定，以此评价该重组蛋白的免疫检测价值。结果SDS—PAGE显示重组菌株在相对分子质量18400～25000表达了大量蛋白，该蛋白的分子量同生物信息学分析的EgCypA的分子量吻合。Western blot结果显示细粒棘球绦虫相关血清与重组蛋白作用后于17000～26000之间出现了特异性的反应条带，其他寄生虫血清则无此反应。结论EgCypA具有良好的抗原性，是很有前景的细粒棘球绦虫特异性诊断抗原，可以作为免疫学检查细粒棘球绦虫早期感染的候选分子。

摘要：目的　识别和克隆日本血吸虫新基因。方法　对本实验室获得的EST进行同源性分析 ,识别血吸虫新基因 ;根据EST设计引物 ,用锚着PCR法从cDNA文库中扩增出新基因全长cDNA ,并将其克隆入原核表达载体 pGEX - 4T - 1,用生物信息学技术对获得的编码基因进行结构与功能的分析。结果　EST同源性分析得到一个完整编码基因 ,开放阅读框(ORF) 4 95bp ,编码 16 4个氨基酸 ;锚着PCR法获得另一EST的 3’端所缺序列 ,得到完整编码阅读框 ,其ORF 999bp ,编码 332个氨基酸。利用生物信息学技术确定它们分别为日本血吸虫亲环素a(CyPA)和乳酸脱氢酶 (LDH)的编码基因。重组质粒经双酶切及测序鉴定证明日本血吸虫CyPA和LDH原核表达质粒构建成功。 结论　克隆到日本血吸虫亲环素a和乳酸脱氢酶编码基因的全长cDNA 。

摘要：目的 :用基因重组技术表达人亲环素 A( Cy PA) ,以避免从人组织材料中提取纯化该蛋白的麻烦。　 方法 :应用反转录聚合酶链反应 ( RT- PCR)技术从人淋巴细胞系 ( MT4 )总 RNA中扩增得到 Cy PA基因片段 ,并用重组 DNA技术对该基因片段进行克隆 ,构建表达载体 ,转入大肠杆菌进行表达。　 结果 :DNA序列分析表明 ,得到的基因片段与设计编码 Cy PA的结构基因序列完全相同。所构建的表达载体 p ET11/Cy PA转入大肠杆菌获得表达 ,重组蛋白表达量占菌体可溶性蛋白的 4 1% ,经测定具有肽基脯氨酸顺 /反异构酶活性。　 结论 :利用基因重组技术使大肠杆菌高效表达出有生物活性的人 Cy PA。

摘要：目的:构建人CyPA基因重组质粒pET30α(+)-CyPA。方法:根据CyPA基因设计引物,从人肺癌组织cDNA中扩增目的基因。pET30α(+)质粒、目的基因DNA经NdeI酶、XhoI酶双酶切,用DNA快速连接试剂盒连接得重组子pET30α(+)-CyPA。将重组子转化DH5α,经卡那霉素琼脂糖平板筛选,挑选阳性克隆进行PCR扩增并测序。结果与结论:快速PCR能从阳性克隆中扩增出目的DNA。将重组质粒测序,由起始密码ATG到终止密码TAG止,扩增得到的目的基因片段具有完整的阅读框;与人CyPA基因cDNA序列进行比较,同源性达到99.8%。重组质粒pET30α(+)-CyPA构建成功。