摘要：目的:设计并表达预防16型人乳头瘤病毒感染的重组蛋白疫苗。方法:选取HPV16型病毒L1蛋白上的B表位和T表位,将其连接组合成多种方式,利用计算机预测蛋白质的三维结构,选取其中最优的结构进行基因克隆构建,并利用杆状昆虫系统进行表达。结果:利用计算机设计出了一种重组蛋白,成功构建了该重组蛋白的结构基因,并在杆状昆虫表达系统中得到表达。结论:成功构建并表达了人乳头瘤病毒的重组蛋白疫苗。

摘要：子宫颈癌已经成为严重威胁女性健康的公共卫生问题,人乳头瘤病毒(HPV)感染是子宫颈癌最主要致病因素。为了预防HPV感染,目前使用的预防性疫苗主要通过诱导宿主产生体液免疫反应,从而生成中和抗体。相较之下,HPV治疗性疫苗的设计目标是诱导宿主产生以Th1为主的细胞免疫应答,并清除已有的病毒感染并延缓或抑制肿瘤的发展。目前,已有多种基于不同机制和技术的HPV治疗性疫苗进入临床试验阶段。本文对上述疫苗的临床试验进展进行了梳理和总结,以期为我国HPV治疗性疫苗的研发工作提供参考。

摘要：目的建立一种适合于临床应用的人乳头瘤病毒(HPV)基因分型检测新方法,并通过对宫颈分泌物标本检测,验证HPV基因分型检测新方法的临床使用效果。方法利用HPV保守的L1区设计各型PCR扩增通用引物,根据GenBank中HPV的型特异性序列设计、合成分型探针,制备可对16、18、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66和68型15种高危型和6、11和42型3种低危型HPV进行联合分型检测的膜芯片。通过对100例宫颈炎患者宫颈分泌物标本进行检测,以了解临床使用效果;对阳性标本进行测序以验证分型的准确性;对标准品进行测定以检测其灵敏度。结果在100例临床样品中发现HPV感染病例30例,其中包括高危型中的HPV16、18、33、45、51、58和66,以及低危型中的HPV6、11和42,既有单一型感染也有混合型感染。灵敏度经标准品验证可达10个拷贝的HPVDNA分子。对单一类型感染基因测序分型证实,所建立的HPV基因芯片分型结果与测序结果完全一致。结论利用PCR-膜芯片技术建立的HPV基因分型诊断方法可以简便、有效地检出所有已知的高危型和低危型HPV,并能明确其基因类型,适用于临床HPV感染的实验室诊断与流行病学研究。

摘要：人乳头瘤病毒（ HPV）感染是宫颈癌的明确病因，病毒生活周期中DNA含量变化情况和各种mRNA和蛋白质的表达与宫颈病变各个阶段的发生发展联系密切。文章主要阐述高危型HPV的自然生活史、空间分布特征与宫颈病变的关系，根据不同应用环境设计和应用不同检测技术，对筛查和临床应用有重要的指导意义。

摘要：高危型人乳头瘤病毒(Humanpapillomavirus,HPV)是宫颈癌的主要致病因子。利用Arraydesigner2·0和BLAST等生物学软件对10种型别的人乳头瘤病毒全基因组序列进行分析,设计高特异性、熔解温度(Tm)和GC含量相近的60merHPV型特异性寡核苷酸探针,用于HPV检测芯片的制备,并对其中四型最常见HPV病毒(HPV6,11,16,18探针的有效性进行初步验证,结果表明设计所得的探针型特异性好,可以应用于HPV的检测与分型。

摘要：子宫颈癌已成为严重威胁女性健康的全球公共卫生问题,接种人乳头瘤病毒(HPV)疫苗是预防子宫颈癌的重要一级预防措施。随着中国HPV疫苗应用的加快,开展HPV疫苗应用的真实世界研究(RWS)能够指导疫苗的合理应用,对于中国加速消除子宫颈癌的策略和实践具有重要的意义。长三角宫颈癌及女性下生殖道感染防控联盟和长三角免疫规划一体化项目组组织专家制定了《人乳头瘤病毒疫苗应用真实世界研究长三角地区专家建议》。本文基于中国医疗信息化和HPV疫苗接种现况,结合国内外研究的文献和案例,阐述了HPV疫苗接种和评价的数据链,介绍了RWS的研究设计、研究方向、数据库建设、数据治理和统计分析,对开展HPV疫苗RWS实践中的问题提出了专家建议,旨在指导HPV疫苗应用的RWS,促进中国真实世界证据的产生。

摘要：高危型人乳头瘤病毒(HPV)的持续感染是宫颈癌和宫颈癌前病变发生的重要原因,HPV检测有效地提高了宫颈癌筛查的敏感度,是宫颈癌筛查的重要方法。但由于HPV检测方法众多,各种检测方法的设计、原理以及临床阳性阈值设定存在差异等因素,临床应用中容易存在误区。

摘要：目的构建携带人乳头瘤病毒(HPV)结构蛋白L1和白色念珠菌甘露糖蛋白(CaMp65)细胞毒性T细胞表位(CTL)基因的重组质粒,并在杆状病毒-昆虫细胞系统中进行表达。方法分别设计包含HPV6bL1和CaMp65CTL145-153的引物,经PCR扩增嵌合基因HPV6bL1/CaMp65CTL145-153,并进一步将其插入杆状病毒表达载体pFastBacTM1。在***10Bac中组装成重组杆状病毒,在昆虫细胞sf-9中表达嵌合蛋白,并经SDS-PAGE和Westernblot分析鉴定。结果HPV6bL1/CaMp65CTL145-153嵌合蛋白在昆虫细胞sf-9中得到了表达,表达产物的相对分子质量为56000,与HPV6bL1单抗能产生特异性反应。结论HPV6bL1/CaMp65CTL145-153嵌合蛋白在杆状病毒-昆虫细胞系统中得到了成功表达,为防治HPV和白色念珠菌感染的基因工程疫苗的研究奠定了基础。

摘要：为促进人乳头瘤病毒（HPV）检测试剂盒临床功能验证设计的规范化，中国国家食品药品监督管理总局（CFDA）和美国国家食品药品监督管理总局（FDA）分别针对HPV检测试剂盒核酸检测的准确性验证和临床功能，包括不明意义非典型鳞状细胞（ASC－US）人群分流、联合筛查和初筛的有效性验证方面，从临床试验设计或评价等方面推荐了较为详细的指导原则。中美两国指导原则在研究设计、研究对象、样本量估计和统计分析等关键点的要求略有差异，但评价指标类似。按照CFDA指导原则要求，可采用横断面研究设计代替FDA建议的前瞻性设计进行ASC－US人群分流用途的验证；同时采用前瞻性研究设计，对同一个自然人群进行拟申报产品HPV和细胞学平行检测，通过至少3年细胞学随访，对初筛和联合筛查进行拟申报产品的临床有效性验证。

摘要：目的对HPV18型DNA疫苗的免疫原性和安全性进行初步评价。方法将HPV18L1基因与真核表达载体pcDNA3.1(+)连接,构建DNA疫苗质粒pcDNAL1。使用脂质体将重组质粒转染COS7细胞,用Westernblot检测体外瞬时表达的抗原。将重组质粒pcDNAL1肌肉注射BALBc小鼠(100μg只),加强免疫3次后分别采集血清,用ELISA法和Westernblot法检测抗体,实时荧光定量PCR法检测质粒的组织分布。采用ELISA法检测DNA疫苗免疫后抗核抗体和抗双链DNA抗体的效价。结果重组质粒可在真核细胞中有效地转录和表达HPV18L1蛋白。小鼠免疫后可检出较高滴度的抗HPV18L1抗体和特异条带。免疫后质粒主要分布在注射部位,且随着时间延长被清除;未检测到抗核抗体和抗双链DNA抗体。结论HPV18L1重组质粒可诱导小鼠产生特异的体液免疫反应,且该DNA疫苗是安全的,为进一步研制开发HPVDNA疫苗打下了基础。