摘要：目的：比较新型牙髓治疗材料i Root BP Plus与矿物三氧化物凝聚体（mineral trioxide aggregate,MTA）对人牙龈成纤维细胞的细胞毒性。方法：采用四甲基偶氮唑盐（methyl-thiazol-tetrazolium,MTT）法测定上述2种材料不同浸提时间（1、3、7 d）的浸提液原液及不同浓度稀（1：2、1：5）释液对体外培养的人牙龈成纤维细胞增殖的影响。细胞增殖率以x±s表示,采用SPSS20.0软件包对数据进行析因设计的方差分析。结果：i Root BP Plus和MTA的浸提液原液及不同浓度稀释液作用后的细胞增殖率界于77.31%~113.82%,细胞毒性分级为0或1级,评价结果为无细胞毒性。不同时间点、不同稀释度下,2种材料对体外培养的人牙龈成纤维细胞增殖率的影响无显著差异（F浓度＊时间＊材料=1.393,P=0.256）。结论 ：i Root BP Plus与MTA均对体外培养的人牙龈成纤维细胞无细胞毒性。

摘要：目的:研究钛微沟槽形貌对人牙龈成纤维细胞黏附及细胞周期推进的影响。方法:用光刻技术在硅片表面制作钛微沟槽形貌,沟槽宽度(等于间隔)分别为15、30、60μm,沟槽深度为5μm和10μm,分组为T15/5、T15/10、T30/5、T30/10、T60/5、T60/10,光滑钛(T0)表面为对照组,测量材料表面微沟槽形貌,将体外培养的人牙龈成纤维细胞(HGFs)接种于材料表面,用免疫荧光和流式细胞仪周期分析观察细胞黏附形态及细胞周期推进的差异。结果:T0组表面细胞排列不规则,沟槽表面细胞均顺沟槽排列,T60/10组细胞周期S期比例始终高于其他各组,T30组居中,T15组最小,但仍高于对照T0组,宽度大的沟槽组(T60,T30)沟槽深度的增加促进细胞周期S期比例的增加,而沟槽宽度小的T15组,沟槽加深减少S期比例。结论:本实验所设计的沟槽尺寸均能诱导细胞顺着沟槽排列,随着沟槽的宽度增加、深度增大越有利于促进细胞周期的推进。

摘要：背景:研究已证实,部分烤瓷冠基底金属在体外具有抑制人牙龈成纤维细胞增殖作用,并诱导其凋亡,但烤瓷冠基底金属抑制细胞的具体机制尚不清楚。目的:观察4种烤瓷冠基底合金在体外对人牙龈成纤维细胞P70S6k表达的影响。设计、时间及地点:以人牙龈成纤维细胞P70S6k的表达量为观察对象,对比观察实验。于2009-07/10在辽宁医学院科技楼免疫组化及免疫印迹实验室完成。材料:镍铬合金、纯钛、金合金、钴铬合金由深圳美冠达牙科有限公司提供。选择年龄12～18岁,因正畸需拔除的健康第一前磨牙的牙颈部牙龈缘组织进行原代培养,取其5代对数期的细胞进行指标测定。方法:将镍铬合金、纯钛、金合金、钴铬合金加入DMEM培养液中制备出合金浸提液,以10%浓度加入培养的人牙龈成纤维细胞培养液中。阴性对照组为含体积分数为10%胎牛血清的DMEM培养液。主要观察指标:各组合金浸提液干预72h后采用免疫印迹分析检测人牙龈成纤维细胞P70s6k表达量。结果:免疫印记结果显示,P70S6k表达的平均灰度值在阴性对照组、金合金组、纯钛组之间差异无显著性意义(P>0.05),金合金组与纯钛组、镍铬合金与钴铬合金组之间差异也无显著性意义(P>0.05),而镍铬合金、钴铬合金与阴性对照组、金合金、纯钛组之间差异均具有显著性意义(P<0.01)。结论:金合金、纯钛对人牙龈成纤维细胞的增殖活性影响不明显,而镍铬、钴铬合金组对人牙龈成纤维细胞的增殖活性有抑制作用。

摘要：目的探讨电化学脱合金Ti6Al4V基台对人牙龈成纤维细胞(human gingival fibroblasts,HGFs)的影响,为种植基台表面改性设计提供实验依据。方法根据试样不同表面进行分组:NC组(阴性对照,光滑表面无其他处理)、NM-1组(纳米网-1,1 mol/L NaOH电化学脱合金处理1 h,电压2 V)、NM-2组(纳米网-2,5 mol/L NaOH电化学脱合金处理1 h,电压2 V)。扫描电镜(scanning electron microscopy,SEM)观察不同试样表面形貌及HGFs在其表面的黏附状态,接触角测量仪测定试样表面亲水性。CCK-8评估HGFs在不同试样表面的增殖情况;qRT-PCR检测HGFs在不同试样表面Ⅰ型胶原(collagenⅠ,COL1A1)、Ⅲ型胶原(collagenⅢ,COL3A1)、纤连蛋白1(fibronectin 1,FN1)、黏着斑激酶(focal adhesion kinase,FAK)、黏着斑蛋白(vinculin,VCL)、整合素α2(integrinα2,ITGA2)、整合素β1(integrinβ1,ITGB1)等黏附相关基因表达水平;免疫荧光染色,激光共聚焦显微镜(confocal laser scanning microscope,CLSM)观察HGFs在不同试样表面vinculin蛋白表达情况;天狼猩红染色评价HGFs在不同试样表面胶原纤维分泌合成情况。结果SEM观察到NM-1组和NM-2组表面形成有序均一的三维网状结构,网格直径NM-1组约为30 nm,NM-2组约为150 nm;NM-1组和NM-2组对比NC组,水接触角显著下降(P0.05)。SEM镜下可见HGFs黏附24 h后在各组试样表面均黏附良好,NM-1组和NM-2组细胞与NC组对比伸展面积更大,形态纤长,细胞伪足更发达。qRTPCR结果显示NM-1组中COL1A1、COL3A1、FN1、FAK、VCL等黏附相关基因表达水平显著高于NC组和NM-2组(P<0.01)。vinculin蛋白免疫荧光结果表明,NM-1组vinculin蛋白表达水平最高,单个细胞黏着斑数量最多(P<0.01)。天狼猩红染色结果显示NM-1组胶原纤维分泌合成量最高(P<0.0001)。结论Ti6Al4V经电化学脱合金改性后所构建的三维纳米网状结构有促进HGFs黏附增殖和胶原分泌合成的作用,其中网格直径约为30 nm的NM-1组对HGFs的促进作用明显。

摘要：目的探讨金属蛋白酶解离素28(ADAM28)反义寡核苷酸对人牙龈成纤维细胞(HGFs)内ADAM28表达的抑制作用。方法设计合成与ADAM28 mRNA特异序列互补的AS-ODN和正义对照S-ODN转染HGFs后,通过RT-PCR和Western blot检测细胞中ADAM28的表达差异。结果 ADAM28 AS-ODN转染HGFs后,在转录、翻译和蛋白水平HGFs内ADAM28的表达均明显减弱,统计学分析有显著性差异(P<0.05)。结论 ADAM28 AS-ODN可有效阻断HGFs内ADAM28的基因表达。

摘要：目的:研究不同磁路设计的磁性附着体所产生静磁场对人牙龈成纤维细胞酶学的相关作用。方法:使用自主设计的磁场加载系统,产生不同强度的静磁场,对体外培养的人牙龈成纤维细胞进行不同时间的磁场加载。通过与对照组的比较,探讨磁场对该类细胞碱性磷酸酶活性的影响。结果:改变加载强度(120 mT、10 mT、0mT)或加载时间(1、3、5个加载周期),静磁场对人牙龈成纤维细胞碱性磷酸酶活性均无显著性影响(P>0.05)。结论:静磁场对牙龈成纤维细胞碱性磷酸酶活性没有影响,初步提示开放及闭合磁路系统磁性附着体所产生静磁场,对牙龈成纤维细胞的相关酶不存在生物学效应。

摘要：目的 :比较不同尺寸微沟槽表面对人牙龈成纤维细胞(HGF)黏着斑蛋白vinculin表达的影响,作为选择种植体穿龈部分微沟槽尺寸的依据之一。方法:针对HGF大小,设计不同沟槽尺寸,利用光刻技术制作微沟槽形貌,沟槽宽度和间隔分别为15μm、30μm和60μm,沟槽深度为5μm和10μm,分组为T15/5、T15/10、T30/5、T30/10、T60/5和T60/10,光滑钛(T0)表面为对照组。通过免疫荧光、实时荧光定量PCR和蛋白免疫印迹比较vinculin基因和蛋白水平的表达差异。采用SPSS17.0软件包对数据进行统计学分析。结果:免疫荧光显示,随着沟槽宽度增加,vinculin的绿色荧光点增多,m RNA和蛋白水平表达T60最高,T15最低。相同沟槽宽度下,深度改变对该蛋白的表达无显著影响。结论:微沟槽形貌有利于vinculin蛋白的表达,表达量随着沟槽的宽度增加而增加。就vinculin蛋白的表达而言,T60组沟槽更适合作为穿龈部分的沟槽尺寸。

摘要：目的·观察淀粉样前体蛋白(APP)家族在慢性牙周炎牙龈组织中的表达情况,及其在炎症微环境下人牙龈成纤维细胞(HGF)中的表达。方法·采用real-time PCR技术和免疫组化法分别检测健康成人和慢性牙周炎病例牙龈组织中APP家族基因和蛋白表达变化。体外培养HGF细胞,用1μg/m L牙龈卟啉单胞菌脂多糖(P.g-LPS)模拟炎症微环境,运用real-time PCR技术检测APP家族基因表达。结果·慢性牙周炎组与健康组相比,APP和APLP2基因和蛋白表达均显著升高,APLP1无明显变化。HGF细胞在P.g-LPS刺激后APP、APLP1和APLP2基因表达均升高。结论·APP家族可能在慢性牙周炎发生发展过程中发挥一定作用。