摘要：目的:探讨DLL4基因在人结肠癌SW480细胞中的表达及利用RNAi技术对DLL4基因表达的沉默作用,为临床基因治疗结直肠癌提供一个可选择的靶点和方法。方法:针对DLL4基因的DNA设计具有特异性的SiRNA,经脂质体转染人结肠癌SW480细胞,采用免疫组化方法检测空脂质体组和转染组DLL4基因表达有否阻断。结果:DLL4在SW480细胞对照组和空脂质体组中高表达,转染后,DLL4表达显著降低(P<0.05)。结论:RNAi技术能够有效抑制DLL4基因的表达。

摘要：目的探讨高压氧(HBO)辅助健脾解毒方处理对体外培养人结肠癌SW620细胞恶性生物学行为的影响及其作用机制。方法体外培养人结肠癌SW620细胞完成后,按照实验设计分成4组:对照组、HBO组、健脾解毒方组和联合组。对照组SW620细胞不作如何处理,HBO组予以0.25 MPa HBO处理,健脾解毒方组予以1.50 mg/ml健脾解毒方制剂处理,联合组予以1.50 mg/ml健脾解毒方剂处理后再予以0.25 MPa HBO处理。首先在200倍倒置显微镜下观察SW620细胞形态的变化,采用MTT法检测SW620细胞的增殖能力,利用Hoechst 33258染色法检测SW620细胞凋亡情况,划痕实验检测SW620细胞迁移能力,Western blotting实验检测SW620细胞内凋亡蛋白的表达水平。结果处理48 h后,倒置显微镜下发现健脾解毒方组SW620细胞密度轻度减少,悬浮细胞稍微增多;联合组SW620细胞密度明显减少,部分细胞皱缩变圆,悬浮细胞明显增多(P0.05);而联合组SW620细胞G1期明显降低,S期明显增高(P0.05);与对照组、健脾解毒方组、HBO组比较,联合组SW620细胞内凋亡蛋白Bax、caspase-3、Cytochrome C表达水平明显升高,Bcl-2蛋白表达明显降低(P<0.01)。结论HBO辅助健脾解毒方处理对SW620细胞具有抑制细胞增殖、诱导细胞凋亡及抑制细胞迁移的作用,其作用机制可能与下调Bcl-2蛋白表达,提高Bax、caspase-3、Cytochrome C蛋白表达水平有关。