摘要：为确定低谷蛋白稻米蛋白质组分的最优提取条件,以低谷蛋白水稻D105为材料,用连续提取法,在优化提取液浓度的基础上,采用响应面法(RSM)优化各组分蛋白的提取条件。结果表明,球蛋白提取最适提取氯化钠溶液浓度为0.6 mol/L、醇溶蛋白最适乙醇体积分数为80%、谷蛋白的最适提取氢氧化钠浓度为0.04 mol/L;基于单因素实验,选择料液比、提取时间、提取温度、提取次数为自变量,以各组分蛋白提取量为响应值,利用Box-Behnken(BB)中心组合设计4因素三水平实验,确定清蛋白最佳提取条件为:料液比1∶22、提取温度31.6℃、提取时间43 min、提取3次;球蛋白最佳提取条件为:料液比1∶20、提取温度33.1℃、提取时间22 min、提取3次;醇溶蛋白最佳提取条件为:料液比1∶21、提取温度34.6℃、提取时间40 min、提取2次;谷蛋白最佳提取条件为:料液比1∶16、提取温度34.7℃、提取时间22 min、提取3次。在此条件下稻米各组分蛋白的提取量分别为:清蛋白4.26 mg/g、球蛋白9.76 mg/g、醇溶蛋白2.27 mg/g、谷蛋白23.60 mg/g,与预测值的相对误差分别为0.0187、0.0563、0.0308、0.014,表明响应面法优化所得提取工艺条件较好,具有应用价值。

摘要：通过常规系谱育种法将亲本材料04DP携有的水稻低谷蛋白基因Lgc1导入到本地粳稻材料中,获得52个F6高世代水稻株系。根据低谷蛋白基因Lgc1的碱基缺失突变,设计出Lgc1基因的分子标记。利用分子标记对52个株系的320个单株进行PCR分子标记检测,同时利用考马斯亮蓝G-250法对52个株系的谷蛋白含量进行了测定。结果显示：有37个株系为低谷蛋白基因纯合株系,谷蛋白含量为2.45%～3.31%;9个为普通谷蛋白基因纯合株系,谷蛋白含量为3.55%～4.76%,分子标记检测结果与谷蛋白含量基本一致,表明该方法可以应用于含有Lgc1基因杂交后代的低谷蛋白水稻品种的选育。

摘要：低谷蛋白稻米是肾脏病人极有效的食疗辅助品,培育低谷蛋白功能性水稻品种具有重大意义。低谷蛋白基因Lgc1作为培育低谷蛋白功能性水稻品种的优质资源,受到了育种家的青睐。为提高低谷蛋白基因Lgc1分子标记辅助选择的准确性,我们根据其突变体在两个谷蛋白基因GluB4和GluB5间的碱基缺失,设计出了Lgc1基因的插入缺失标记InDel-Lgc1-A和InDel-Lgc1-B。利用InDel标记对W3660(Lgc1低谷蛋白品种)/南粳46(谷蛋白正常品种)的F2分离群体和13份水稻品种进行检测验证。依据其PCR扩增产物的电泳带型,可准确地区分出低谷蛋白纯合基因、谷蛋白正常纯合基因和杂合基因型3种带型,且3种带型与其植株或品种相应的蛋白性状表现完全一致,表明这两对InDel标记可用于Lgc1低谷蛋白基因资源的鉴定以及分子辅助育种。

摘要：我国肾脏病患者和糖尿病肾病患者呈不断增加的趋势,筛选和培育这一特殊人群可以食用的谷蛋白含量低的水稻品种具有重要意义。在前期研究中获得一个低谷蛋白隐性突变体冷水糯,该突变体籽粒的谷蛋白具有57kD前体聚增(57H)伴有成熟亚基减少。由于glup3基因与57H前体裂解相关,本研究对冷水糯的glup3测序、比对后,发现冷水糯的glup3基因的编码区第824个碱基由G突变为A,导致翻译产物第275个氨基酸由丝氨酸变为天冬酰胺。根据突变位点两侧的序列设计了CAPS标记DG-2,该标记能扩增出173bp的条带,运用TscAI酶对该片段进行酶切,来自于冷水糯的片段不能被该酶切开,来自于9311的片段可被切成105bp和68bp的两条片段,而来自于9311/冷水糯的杂交1代PCR产物经酶切后,出现双亲的带型。该标记对9311/冷水糯的高代品系(F7代)的100个家系进行鉴定,结合SDS-PAGE蛋白电泳结果,证实该标记可以准确地区分具有57H前体聚增的低谷蛋白水稻材料。同时,该标记可以区分glup3基因的杂合型,可以用于分子标记辅助选择育种。