摘要：脑毛细血管上的特殊结构单元为大脑提供氧气和养分,与此同时形成一种限制性屏障,称为血脑屏障(BBB),该结构单元由单层脑微血管内皮细胞构成,内皮细胞外侧的周细胞、基膜以及星形胶质细胞的足突也参与了血脑屏障的形成.血脑屏障是一种选择性渗透屏障,大多数中枢神经系统候选药物在血脑屏障中的渗透性差,用实验动物进行药物筛选具有成本高、周期长、成功率低等缺点.此外,直接在人体中试验有违道德伦理,但建立可靠的体外血脑屏障模型可以简化实验过程、缩短试验周期、实验结果更易测定,因此建立体外BBB模型可以极大地加快中枢神经系统药物的研发.目前已研究的模型主要可以分为3类:单培养、共培养、三培养,这些模型由简单到复杂,与体内血脑屏障的相似性也越来越高.本文就目前现有的血脑屏障模型进行综述,以期未来在体外BBB模型设计中有新的思路.

摘要：视网膜疾病是重要的致盲原因,由于视网膜位于眼后节最内层,结构精细复杂,药物到达眼后节需要克服很多障碍,选择合适的研究模型是设计和优化眼部递药系统的关键。虽然体外实验不能完全代替体内研究,但体外实验能更好地反映眼内不同屏障对药物的通透性,且可以避免活体实验带来的费用及伦理问题,通过精心设计的体外模型同样具有重要的应用价值。本文对近年来眼后节递药体外模型的研究进行综述,从而为视网膜疾病的药物研发提供借鉴及参考。

摘要：要使内皮细胞成功地种植于小口径人工血管就必须使细胞有效地粘附在血管腔面,并且在血流情况下能维持细胞的固位。有许多因素影响内皮细胞的粘附,例如制备血管的材料、衬底、孵育时间以及种植密度。本文设计了一体外模型,以便能测定各种影响因素,为临床种植试验提供人体内皮细胞粘附的最佳条件。

摘要：血脑屏障(BBB)是位于循环血液与中枢细胞外液之间的一道天然生理屏障,其表现出的动态选择性滤过作用决定了BBB在防卫中枢神经系统(CNS)免受异物侵害的同时也限制了相关药物的递送吸收。本文通过查阅近年来国内外相关文献,梳理常见BBB体外细胞模型的优缺点,并对各种药物BBB通透性方法进行评价分析,揭示构建一种高度契合人体内真实BBB条件的模型,不仅对BBB生理机制进行研究,而且在新型靶向药物的设计与筛选中都具有极大帮助。最后展望当前中药纳米递药系统这一热点研究方向,为深入开发穿透BBB治疗CNS疾病的药物提供积极探索。

摘要：目的建立注射用替莫唑胺零期临床试验微量泵给药的体外模型,检测和校准微量泵,保证后续零期试验微剂量给药的准确性。方法在相同的实验环境下,对Ⅰ期临床实验研究室12台微量注射泵进行定量检测,采用注射用替莫唑胺零期试验相同的给药速度(0.8 ml/h)和给药时间(90 min),模拟零期试验的给药过程,对实际测量液体量与理论值进行对比和误差计算。所有试验重复3次,取3组数据平均值计算每台微量泵的误差值。结果 12台微量泵的误差值范围在±5%以内,根据国家计量规定和零期临床试验微剂量给药要求,表明本研究室的12台微量泵给药精确度高,可以用于后续零期试验给药。结论在整个实验的过程中,重视微量泵使用的相关因素,保证零期试验给药的准确性。

摘要：目的建立大鼠矢状缝牵张体外模型,为进一步进行矢状缝牵张的实验研究奠定基础。方法将35只体重相近的12日龄雄性SD大鼠无菌条件下解剖出矢状缝,安放牵张装置,随机分成7组,加力0周的空白对照组,加力2周的0.000 00 N、0.002 94 N和0.005 88 N组,加力2周并保持2周的0.000 00 N、0.002 94 N和0.005 88 N组,并进行组织形态学检测。结果大体观察,大鼠颅骨块体外培养4周后,各组培养液均无污染、各组弹簧均无脱落;形态学观察表明实验组大鼠矢状缝在加力2周后明显扩宽,在随后2周保持时间内,骨缝宽度略有减小;组织学检测显示出典型的骨缝牵张成骨组织学变化,且0.002 94 N组较0.005 88 N组成骨更加活跃。结论本实验所建立的大鼠矢状缝牵张模型满足研究需要,具有设计科学、操作简单、可重复性强的特点。

摘要：以96孔板为载体,通过改良微孔板法研究细菌接种浓度、培养基pH、培养基浓度、培养温度、培养时间5个单因素对金黄色葡萄球菌生物被膜生长量的影响。在单因素试验基础上,选择培养基pH、培养温度、培养时间3个因素,设计二次回归正交旋转组合试验,建立金黄色葡萄球菌生物被膜实验模型。结果表明,生物被膜成膜最佳条件为细菌接种浓度109CFU/mL、培养基pH7.3、培养基质量分数6%、培养温度37.5℃、培养时间为64.9h,此时96孔板所测光密度理论优化值为3.113 8。

摘要：目的纳米颗粒入侵血管内皮是其人体输运的必然过程,也是产生有益或有害生物学效应的关键环节。现有研究已表明,血管内皮细胞会在血液循环过程中摄取纳米颗粒,但纳米颗粒在细胞及亚细胞层面的输运规律尚不清楚,且受血液流动影响。构建模拟在体血液流动环境的体外内皮细胞培养模型,研究纳米颗粒胞外输运-胞摄取-内扩散的入侵动力学过程。方法首先,设计和构建可精准模拟真实血液流动环境且适于检测纳米颗粒运动的微流控内皮细胞培养模型。

摘要：目的:研究导航模板辅助曲针穿刺(CNP)在模拟隐匿性病灶体外模型上的应用价值。方法:采用Autodesk 123 D^(*) design软件设计一款包括普通靶区和特殊靶区的体外模型,分别设计一款圆弧形穿刺曲针和一款导航模板,通过3D打印获得实物。分别采用盲穿和CT引导模式,使用常规脊髓穿刺针直针穿刺(SNP)、CNP和导航模板辅助CNP在体外模型上进行穿刺操作,按照引导模式分为盲穿和CT引导。根据穿刺结果计算穿刺完成率、损伤率和穿刺合格率。结果:针对普通靶区,SNP、CNP和导航模板辅助CNP的完成率分别为58.8%、30.0%和73.8%,损伤率分别为56.3%、63.8%和43.8%,穿刺合格率分别为36.3%、13.8%和52.5%;3种穿刺方式间整体的穿刺完成率、损伤率和穿刺合格率比较,差异均有统计学意义(F=6.057,F=6.196,F=7.319;P<0.05)。盲穿和CT引导的穿刺完成率分别为40.8%和67.5%,损伤率分别为65.8%和50.8%,穿刺合格率分别为24.2%和44.2%。针对特殊靶区,CNP和导航模板辅助CNP的穿刺完成率、损伤率及穿刺合格率分别为35.0%和72.5%,92.5%和55.0%,7.5%和45.0%。盲穿和CT引导的穿刺完成率、损伤率及穿刺合格率分别为45.0%和62.5%,80.0%和67.5%,20.0%和32.5%。结论:导航模板辅助CNP技术可以明显提高曲针的可行性,可取得与SNP相似的结果,且对引导模式的依赖小,可弥补SNP在隐匿性病灶的技术缺陷,对于扩大介入穿刺技术的临床应用范围具有重要意义。

摘要：目的心房颤动(简称房颤)常见而高危,其发病机制未完全阐明。心房力学环境改变常见于易发房颤的多种基础疾病,其中压应力是心房应力的重要构成。建立心房肌细胞压应力超负荷模型,为研究心房机械-电反馈过程和房颤力学机制奠定方法学基础。方法选择出生0~3 d的SPF级SD大鼠乳鼠30只,体质量5~10 g,雌雄不限。设计压应力刺激装置;提取、消化、分离、纯化SD大鼠乳鼠心房肌细胞并体外培养;在培养环境中通过375 r/min(低压应力组,n=4)和735 r/min(高压应力组,n=4)的恒速离心对心房肌细胞施加不同强度的持续压应力刺激48 h,对照组细胞不施加压应力刺激(n=4);通过细胞骨架染色计算细胞面积,3-(4,5-二甲基噻唑-2-基)-5-(3-羧甲酯基)-2-(4-磺苯基)-2H-四唑(金翁)(内盐)(MTS)法检测细胞活性,分析由压应力超负荷导致的细胞形态和活性变化。结果成功分离、培养SD大鼠乳鼠心房肌细胞并通过鉴定;接种48 h后细胞贴壁良好,密度70%~80%,呈长梭形、三角形或不规则多边形,可见细胞搏动,心肌细胞纯度达90%~95%。设计的压应力装置在确保湿度、氧和二氧化碳浓度的培养箱环境中对细胞施加压应力刺激。MTS法检测到低压应力组细胞活性高于对照组和高压应力组(OD值0.57±0.03 vs 0.50±0.02、0.50±0.01。P<0.05)。高压应力组细胞活性与对照组差异无统计学意义(OD值0.50±0.01 vs 0.50±0.02。P=0.69)。细胞骨架染色以对照组细胞平均面积为基准,对照组、低压应力组、高压应力组细胞的相对面积依次增大(1.00±0.23 vs 1.20±0.16 vs 1.59±0.20。P<0.05)。离心仓与培养箱的温度差随离心过程逐渐升高,并于6 h后趋于恒定,与培养箱最高温差≤2℃,通过实时调控培养箱温度,可稳定维持离心仓温度于37.0℃~37.5℃。结论实验构建的离体心房肌细胞压应力超负荷模型具有良好的安全性、实验效率和可重复性,通过离心向培养环境中的离体心房肌细胞施加定量、定时压应力刺激后,心房肌细胞可存活,细胞形态和活性随压应力强度变化。该模型可为进一步探索压应力相关的心房机械-电反馈机制提供方法学基础。