摘要：目的　制备依托泊苷脂质体 ,测定其含药量及包封率 ,对其体外释放及原料药的体外释放进行比较 ,并对脂质体灭菌后的稳定性进行考察。方法　采用薄膜 超声分散法制备依托泊苷脂质体 ,通过均匀设计优化处方 ,利用透析法测定其含药量及包封率 ,进行热压灭菌及60 Co灭菌两种灭菌方式 ,以粒径和包封率为指标考证灭菌后的稳定性。结果　按均匀设计的最优组合制备脂质体的含药量为 (5 74 3± 30 7) μg·mL-1,平均包封率为 (6 1 5 8± 0 83) % ,依托泊苷脂质体 5 0h累积释药 (96 13±1 11) % ,而其原料药 3h累积释药 (97 10± 1 84 ) % ,热压灭菌的渗漏率比60 Co灭菌的渗漏率高。结论　用薄膜 超声分散法制备的依托泊苷脂质体外观圆整 ,粒径小而均匀 ,体外释药达到了长效缓释的作用 ,60 Co灭菌后脂质体较稳定。

摘要：目的:制备依托泊苷固体脂质纳米粒(ET-SLN)并考察其药剂学性质。方法:采用乳化-超声分散法制备ET-SLN,以单硬脂酸甘油酯(A)、大豆磷脂(B)、泊洛沙姆188(C)、依托泊苷(D)的处方用量为考察因素,包封率为指标设计正交试验,筛选最优处方。考察纳米粒的粒径、表面电位、包封率、体外释放情况等。结果:A、B、C、D分别为0.020、0.010、0.015、0.015mg;所制纳米粒平均粒径(83±0.5)nm,表面电位(-23±0.3)mV,包封率81.2%,可持续48h缓释。结论:所制ET-SLN符合药剂学性质要求。

摘要：为提高依托泊苷制剂的水溶性和稳定性,采用星点设计-效应面法优化依托泊苷纳米混合胶束(ETP mPEG-PLA/P123)的处方工艺。在单因素试验基础上,以投药量、mPEG-PLA所占质量比和水化体积为自变量,以依托泊苷包封率、载药量以及粒径为因变量,进行3因素5水平的星点设计-效应面法实验,采用荧光探针法测定临界胶束浓度(CMC),并对所制备的胶束制剂进行理化性质和释放行为的评估。结果表明,ETP mPEG-PLA/P123胶束制剂的最优处方工艺如下:mPEG-PLA与P123质量比为38∶62,投药量为5 mg,水化体积为6 mL;采用最优处方制得的混合胶束的包封率为87.4%,载药量为4.19%,粒径为115.6 nm,PDI为0.216,Zeta电位为-16.3 mV;荧光探针法测定的CMC值为1.7×10^(-3)g/L,mPEG-PLA/P123胶束稳定性良好;体外释放实验中,依托泊苷可从胶束中缓慢而持续地释放,在48 h内释放量可达80%。采用优化处方制得的ETP mPEG-PLA/P123纳米混合胶束,能显著增加依托泊苷的溶解度,胶束制剂稳定性好,且有一定的缓释作用,可为进一步拓宽依托泊苷新型制剂的应用范围提供理论依据。

摘要：目的·研究抗肿瘤药物依托泊苷对间充质干细胞(mesenchymal stem cell,MSC)成骨分化的促进作用及可能的机制。方法·体外分离C57BL/6J小鼠骨髓和人骨髓来源MSC。给予小鼠MSC不同浓度(0~12.50μmol/L)的依托泊苷12、24、36、48和60 h后,采用CCK-8法检测MSC的增殖活性。采用凋亡检测试剂盒检测依托泊苷(0、0.001、0.01、0.1、1μmol/L)对大鼠成骨性骨肉瘤细胞系UMR-106凋亡的影响。分别以依托泊苷(0、0.001、0.01、0.1、1μmol/L)处理小鼠和人MSC(同时诱导成骨分化)、UMR-106细胞,通过碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)染色、茜素红染色分析细胞成骨分化情况。通过实时荧光定量PCR技术检测依托泊苷对小鼠MSC成骨分化标志物Alp、骨钙素、Ⅰ型胶原α1链mRNA水平的调控。将0.001μmol/L依托泊苷与UMR-106细胞共孵育后,通过Illumina Xten高通量转录组测序和生物信息学分析,寻找依托泊苷上调的成骨分化相关靶基因,并通过PCR验证。Western blotting检测依托泊苷(0、0.001、0.01、0.1、1μmol/L)处理的小鼠MSC中成骨特异性转录因子(osterix,OSX)、矮小相关转录因子2(runt-related transcription factor 2,RUNX2)及DNA结合抑制因子1(inhibitor of DNA binding 1,ID1)的表达变化。结果·依托泊苷对小鼠MSC增殖的影响呈现浓度依赖性;当浓度≥0.20μmol/L时,依托泊苷开始抑制MSC的增殖,48 h的半数抑制浓度(half-maximal inhibitory concentration,IC_(50))为2.192μmol/L,60 h的IC_(50)为1.399μmol/L。凋亡检测结果显示依托泊苷浓度为0.001~1μmol/L时UMR-106细胞的凋亡率为16.137%~28.300%。ALP染色、茜素红染色及荧光定量PCR结果显示0.001~0.1μmol/L依托泊苷对小鼠和人MSC以及UMR-106细胞具有促成骨分化的作用。RNA测序分析表明,依托泊苷可上调UMR-106细胞结缔组织生长因子基因表达。Western blotting分析结果显示,0.001、0.01μmol/L依托泊苷显著增加小鼠MSC OSX、RUNX2及ID1的表达。结论·抗肿瘤药物依托泊苷可促进MSC成骨分化,该作用可能与其上调ID1、RUNX2、OSX表达有关。

摘要：目的制备难溶性药物依托泊苷(VP16)明胶微球,并对其形态学性质和载药特性进行研究。方法以PVP为分散介质,采用加液研磨法制得难溶性药物依托泊苷固体分散体,通过正交试验设计,筛选乳化缩聚法制备肺靶向依托泊苷明胶微球的最佳制备工艺。结果微球平均粒径为17.21μm,其中10～30μm的占89.58%,载药量为(20.94±0.13)%,药物包封率为(86.27±0.65)%。结论以PVP为载体将药物制成固体分散体后再用乳化缩聚法制得的依托泊苷明胶微球外观均匀圆整,分散性良好,粒径分布符合肺靶向要求,载药量较高。

摘要：目的：本研究设计1种PEG两端修饰疏水药物（人参皂苷Rh2及依托泊苷）的两亲性聚合物,并以此制备及表征其自组装成的聚合物胶束。方法：以p NP-PEG-p NP为主链框架,利用对硝基苯氧基团易于离去的特性,在无水条件下将人参皂苷Rh2及依托泊苷与PEG链两端共价连接,形成两端疏水、中间亲水的两亲性聚合物,采用水透析法制备聚合物胶束,并通过动态光散射（DLS）和透射电镜（TEM）表征胶束理化性质。结果：以此法所得的GRh2-PEG-vp16最终产率为62.9%,化学结构经1H NMR和FT-IR确证为目标聚合物;通过包埋荧光探针芘法测得GRh2-PEG-vp16的临界胶束浓度为63.4μg·m L-1;通过单因素考察确立最佳制备工艺为：37℃下,50 mg·m L-1的GRh2-PEG-vp16乙醇溶液滴入5 m L去离子水中,流动水透析8 h。制备所得的胶束粒径为（112.64±4.28）nm,多分散系数为（0.224±0.002）,Zeta电位为（-13.82±2.74）m V,在p H 4.5~7.4范围内、在50倍体积去离子水的稀释下以及同等体积胎牛血清共孵育12 h均能保持粒径、电位的相对稳定。体外释放行为研究表明,在p H 6.5条件下依托泊苷和人参皂苷Rh2的48 h累计释放量分别为42.5%和52.5%。结论：GRh2-PEG-vp16可作为一种很有前景的中西药协同抗肿瘤纳米递送系统。

摘要：目的探讨RNA干扰靶向抑制ULF的表达对化疗药物依托泊苷(etoposide)引起的非小细胞肺癌H1299细胞凋亡的影响。方法设计3条针对ULF基因的小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)片段及1条阴性对照siRNA,分别在慢病毒载体介导下感染H1299细胞。用real-time PCR及Western印迹法筛选出1条抑制效率最高的ULF序列,对有效干扰组和对照干扰组细胞进行etoposide处理,干扰对照细胞或沉默ULF的H1299细胞,用c-PARP做标记物检测H1299细胞的凋亡程度,MTT法检测H1299细胞增殖情况,流式细胞仪检测细胞周期分布。结果经感染ULF-shRNA-1序列的H1299细胞中ULFmRNA及蛋白表达降低最为明显,抑制率达80%,选择该条siRNA作为有效干扰组进行后续实验。Western blot结果显示etoposide处理后,有效干扰组H1299细胞凋亡水平显著增加,细胞增殖抑制率显著高于对照干扰组,并与etoposide剂量呈正相关,2组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。流武结果显示有效干扰组G0/G1期细胞较对照组增加,S期细胞减少,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 etoposide处理后通过干扰ULF蛋白表达可诱导H1299细胞的凋亡,抑制细胞增殖,使细胞出现S期阻滞,推测ULF基因可能成为癌症基因治疗的一个新靶点。

摘要：目的优化依托泊苷长循环脂质体的制备处方及工艺。方法以两亲性聚乙二醇-二硬脂酰磷脂乙醇胺为修饰体,采用薄膜超声-挤压法制备空白长循环脂质体;铵离子梯度法包封依托泊苷,制备依托泊苷长循环脂质体。以包封率为考察指标,采用正交设计法优化依托泊苷长循环脂质体的制备处方及工艺。结果优化后的依托泊苷长循环脂质体的工艺和处方:药脂比例为1∶5 ***-1、胆固醇与磷脂比例为0.3∶1(W/W)、硫酸铵离子浓度为200 mmol.L-1、包封温度为55℃。长循环脂质体平均粒径均小于1μm,药物平均包封率86.45%。结论该方法包封率高、粒径小且分布较窄,简便易行。

摘要：依托泊苷软胶囊是一种常用的抗肿瘤药物剂型,已被广泛用于治疗多种恶性肿瘤。然而,其口服制剂的生物利用度相对较低,主要由于其水溶性差和在酸性环境中易分解的特性所致。为了提高依托泊苷软胶囊的口服给药效果,探索了其制备工艺和质量。首先,在制备工艺方面,采用了合适的胶囊外壳材料,并通过合理的填充剂选择和溶剂调配,提高依托泊苷的溶解度和稳定性,并对封闭方法进行了优化,确保药物的长期保存和释放性能。其次,在质量研究方面,使用高效液相色谱仪和紫外检测器对产品进行分析,通过对基苯甲酸丙酷的对照液和供试品溶液的色谱分析,评估了依托泊苷软胶囊中的杂质峰和依托泊苷的含量。最后,通过优化制备工艺和进行质量研究,成功提高了依托泊苷软胶囊口服制剂的质量和生物利用度。

摘要：目的制备依托泊苷固体分散体,改善依托泊苷的溶出度。方法应用聚乙烯吡咯烷酮(PVPK30)和聚乙二醇(PEG6000)为载体,以溶剂法制备固体分散体。采用正交实验设计考察制备固体分散体的最佳工艺条件,并对所得样品进行体外溶出度研究,以X线衍射、DSC-量热分析进行物相鉴定。结果依托泊苷在载体PVPK30和PEG6000中结晶消失。药物的溶出速度随载体比例增加而增加。结论采用PVPK30和PEG6000所制依托泊苷固体分散体能显著提高药物的体外溶出度,药物以无定形状态或分子态存在于载体中。