摘要：目的研究甲状腺球蛋白(thyroglobulin, TG)基因在中国先天性甲状腺功能减退症(先天性甲减)患儿中的突变及其家系遗传规律。方法 2014年至2018年本课题组收集235例先天性甲减患儿及部分家系的临床资料并留取外周血, 提取外周血DNA, 设计TG基因各个外显子区及其外显子-内含子交界区的引物扩增TG基因, 然后利用二代测序技术及生物信息学分析获取TG基因的突变并进行Sanger测序验证。另外对其中2例携带有TG基因复合杂合突变患儿的父母进行Sanger测序验证。结果在235例先天性甲减患儿中, 携带TG基因变异位点的患儿有34例(14.47%), 其中6例(2.55%)患儿携带复合杂合突变。此外, 在这些TG基因变异位点中, 1个位点为热点突变(4例患儿携带T1620M), 9个变异为新发现的位点(T601M、V2423I、R2308S、C2005R、C2264F、L987R、K1645Efs*49、F311Lfs*91和T1416M)。结论 TG基因在中国先天性甲减的患儿中突变率较高, 为常染色体隐性遗传模式。

摘要：目的 研究先天性甲状腺功能减退症（CH）患儿GLIS3基因突变的类型和特点,为CH患儿的早期诊断及治疗提供理论依据.方法 选取2007年2月至2016年11月山东地区50例CH患儿,并提取其外周血中白细胞全基因组DNA,用Primer5.0软件设计11对序列特异性引物对GLIS3基因第2～11外显子进行聚合酶链反应扩增,对扩增产物采用一代测序法（Sanger测序法）进行直接测序.采用DNA MAN软件与GLIS3基因的参考序列（美国国立生物技术信息中心Reference Sequence：NC_000009.12）进行序列比对分析,根据比对结果进行基因突变筛查.结果 50例确诊为CH的新生儿中,男22例,女28例,男女比例为1.0∶1.3;年龄（2.5±0.5）岁;甲状腺发育不良、缺如、异位的比例分别为12％（6/50例）、46％（23/50例）、42％（21/50例）.在1例甲状腺缺如患儿第10外显子区发现GLIS3基因cDNA的2 507位点发生了C＞A的突变（c.C2507A）,导致第836密码子的脯氨酸变为谷氨酰胺（p.P836Q）.此突变为杂合型的错义突变.在另1例甲状腺缺如患儿第2外显子区发现一个GLIS3突变体（rs780019691,c.C289T）,该位点为无义突变,导致第97密码子的精氨酸变为终止密码子（p.R97X）.结论 山东地区CH患儿中GLIS3基因突变率较低,且基因型与表型关系尚不明确,需进一步研究.

摘要：目的探讨黔南地区影响新生儿先天性甲状腺功能减退症(CH)患病的影响因素。方法收集2012年10月-2015年12月黔南地区筛查诊断为CH的新生儿42例作为病例组,按照1∶3比例随机选取同期健康新生儿126例为对照组,采用自行设计《黔南州新生儿先天性甲状腺功能减退症患病影响因素调查表》进行问卷调查,并对影响新生儿CH患病相关因素进行Logistic多元回归分析。结果病例组新生儿父母亲年龄≥35岁及母亲孕期有先兆流产、妊娠期高血压疾病、妊娠期糖尿病、妊娠期合并甲状腺疾病、不良嗜好、焦虑情绪、甲状腺疾病家族史、慢性疾病史、辐射接触史、重金属接触史、用药史与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05);多因素Logistic回归分析结果显示:新生儿父母亲年龄≥35岁及母亲有甲状腺疾病家族史、焦虑情绪、不良嗜好、妊娠期合并甲状腺疾病、用药史和辐射接触史是黔南地区新生儿CH患病的主要危险因素。结论黔南地区新生儿CH患病主要危险因素有父母亲年龄≥35岁和母亲有甲状腺疾病家族史、焦虑、妊娠期合并甲状腺疾病、用药史和辐射接触史等。

摘要：目的通过制备磺酸化125I-3,3′-二碘甲腺原氨酸(125I-3,3′-T2S),探索其纯化的最佳条件。方法将氯磺酸(CSA)与二甲基甲酰胺(DMF)按体积比1∶4进行混合,取混合液200μL缓慢加入125I-3,3′-T2,室温过夜后加入800μL冰蒸馏水混匀,采用正交设计选定3个因素,每个因素3个水平,利用不同Sephadex LH-20层析柱探索酸化产物最佳纯化方案。借助下行纸层析及放射自显影对酸化产物进行鉴定。结果成功获得酸化产物,30mL层析柱、0.95cm内径、0.1mol/L盐酸、蒸馏水、洗脱液Ⅱ(1mol/L氨水∶乙醇=1∶99,vol/vol)进行洗脱,流速0.4mL/min,上样量40μL为最佳纯化方案;酸化产物经过3种溶液洗脱,分别洗脱下来游离125I、125I-3,3′-T2S和125I-3,3′-T2,根据放射性计数作图分别对应3个峰。结论成功地制备了125I-3,3′-T2S,摸索出酸化产物的最佳纯化方案。

摘要：目的分析甲状腺发育异常相关致病基因的突变特点。方法以江苏地区通过新生儿疾病筛查确诊的89例先天性甲状腺功能减低症(CH)患者为研究对象,基于文献复习的基础上,针对甲状腺发育异常相关致病基因的热点突变的外显子及外显子-内含子交界区域设计靶向测序panel,包括促甲状腺素受体(TSHR)、甲状腺转录因子1(TTF1)、甲状腺转录因子2(TTF2)、PAX8、NKX2-5和THRA基因,采用靶向捕获测序技术进行检测。结果89例CH患者中有19例检出甲状腺发育异常致病基因致病突变,70例未检出相关潜在致病突变,总体突变检出率为21.35%(19/89);共检出23个潜在致病突变,包括17个TSHR突变,2个TTF1突变,2个PAX8突变,以及TTF2、NKX2-5突变各1个,THRA突变未检出。共发现8个新突变,包括4个TSHR突变,1个TTF1突变,2个PAX8突变和1个NKX2-5突变。结论江苏地区人群中CH相关致病基因突变中约20%与甲状腺发育异常有关,与国外研究相比存在较大的差异。