摘要：目的研制肺炎克雷伯菌(KP)全基因组DNA芯片并对芯片质量进行评价。方法根据KP的NTUH-K2044全基因组序列,挑选出5075条基因,PCR扩增各基因并纯化产物,点样制备芯片。设计了3个质控杂交组合,采用双色荧光杂交策略,对芯片质量进行评价。结果与结论芯片杂交结果与理论预期结果一致。本研究成功研制了KP全基因组DNA芯片,并建立了基于全基因组DNA芯片的KP比较基因组学技术平台。

摘要：目的了解多重耐药肺炎克雷伯菌的基因型和整合子存在情况。方法设计TEM、SHV和CTX-M型及Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ类整合酶基因特异性引物,并将聚合酶链反应(PCR)扩增获得β-内酰胺酶编码基因,分别克隆入pMD18-T载体后测定其核苷酸序列,分析其基因亚型。结果该多重耐药株与TEM-1、SHV-12及CTX-M-3型编码基因序列的同源性为100%,Ⅰ类整合酶基因检测阳性,Ⅱ、Ⅲ类整合酶基因检测阴性。结论Ⅰ类整合子存在产ESBLs肺炎克雷伯菌中。

摘要：目的　了解门诊患者分离菌超广谱 β 内酰胺酶 (ESBLs)的检出率及其基因型分布情况。　 方法　用美国国家临床实验室标准化委员会 (NCCLS)推荐的表型确证方法 ,对我院 2 0 0 0年 10月～ 2 0 0 3年 8月门诊患者分离的 70株大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌进行ESBLs确证。分别设计TEM、SHV和CTX M通用引物对ESBLs阳性株进行聚合酶链反应 (PCR) ,PCR扩增产物经 1%琼脂糖凝胶电泳 ,溴化乙锭染色 ,用凝胶成像系统观察结果进行初步分型。　结果　 70株菌中共检出ESBLs株 13株 ,总检出率为 18.6 % ;13株ESBLs阳性菌中 12株 (92 .3% )检出CTX M基因 ,5株 (38.5 % )检出TEM基因 ,2株 (15 .4 % )检出SHV基因。在所有ESBLs阳性菌株中 ,1株 3种基因检测均阴性 ,6株只检测出CTX M基因 ,4株同时检出TEM和CTX M基因 ,1株同时检出SHV和CTX M基因 ,1株同时检出 3种基因。　结论　门诊患者分离菌ESBLs检出率较低 ,最常见的基因型为CTX M型。