摘要：目的观察与探讨G-蛋白耦联受体(CASR)在豚鼠肠神经系统中的表达。方法以豚鼠为试验对象,先进行RT-PCR设计,然后采用Western blotting来检测豚鼠肠神经系统中CASR蛋白,并且应用间接法双重免疫荧光标记对肠神经系统整体、肠神经系统中的肌间神经丛黏膜下神经丛中的CASR分布及数量等进行测定,荧光标记物采用FITC和Cy3。结果无论是肠神经系统中的肌间神经丛还是黏膜下神经丛,不同的肠神经细胞中含有不同的神经元标记物,即均存在CASR。结论豚鼠肠神经系统存在钙敏感受体的表达,因此,关于CASR在肠神经系统中的相关研究具有重要的临床意义,可能为将来研究CASR在肠道神经系统中的功能及肠炎症中的作用奠定基础。

摘要：目的探讨自身抗体计算机辅助分析系统辅助判读自身抗体荧光染色图象的应用价值。方法根据免疫荧光抗体染色手工流程设计,由初学者在软件知识库和标准图谱辅助下判读503例荧光染色结果,并与两位有经验的检验人员判读结果进行比较。结果初学者软件辅助判读结果与专业人员判读结果有较好的一致性。以专业人员判读结果为标准,辅助判读的灵敏度为99.1%,特异性95.6%,准确度96.8%。结论自身抗体计算机辅助分析系统辅助判读自身抗体染色结果,简化了复杂的判读过程,缩短了结果报告时间,使结果判断更客观、更规范,并且大大降低了实验成本。

摘要：目的:通过观察田麻益智颗粒含药血清对GLu损伤的胎鼠海马神经元的保护作用,探讨田麻益智颗粒对脑损伤神经元的保护机制。方法:取孕7 d Wistar大鼠的胎鼠海马,进行体外培养,并对培养的神经干细胞进行神经元鉴定。部分细胞开始贴壁,贴壁细胞呈圆形结果培养24 h后,大部分细胞己经贴壁生长:分化3 d后神经元胞体增大,突起延长并出现分枝,形成稀疏的网络,7d胞体大,突起长,分枝连接成网,相互联系增多细胞成熟。MTT结果表明,田麻益智颗粒含药血清保护组与Glu损伤模型组相比细胞活性明显升高(P<0.05)。平均值,田麻益智颗粒中剂量组对Glu损伤的神经元细胞保护作用与尼莫地平组的保护作用接近,优于正常组及模型组。说明田麻益智颗粒含药血清对Glu损伤海马神经元有保护作用。免疫荧光结果半定量分析结果标记CAMKII的神经元细胞中,统计分析结果表明正常组平均灰度值为148.6±9.88、保护组灰度值151.0±12.37低于Glu损伤组171.5±6.87(P<0.05),说明保护组中CAMKII的含量与正常组接近,并且较Glu损伤模型组少,中剂量组田麻益智颗粒对谷氨酸损伤神的海马神经元的有较好的保护作用。

摘要：目的:构建抑制TPP1基因的短发夹RNA(sh RNA)干扰载体。方法:以人的TPP1基因为靶序列,设计并合成sh RNA序列TPP1-si1和TPP1-si2,分别与RNA干扰慢病毒载体pll3.7连接,双酶切鉴定质粒得到阳性克隆pll-TPP1-si1和pll-TPP1-si2,经测序正确后将其与慢病毒包装载体(RRE、REV、VSVG)共转染293T细胞,进行病毒的包装,将得到的病毒感染稳定高表达外源TPP1蛋白的HT1080细胞,通过Western印迹检测其对TPP1蛋白表达的抑制效果,并进行比较;将抑制效果好的病毒感染高表达外源Pot1蛋白的Hep G2细胞,检测Pot1蛋白在内源TPP1被敲低的情况下能否在端粒定位。结果:经双酶切验证,外源片段成功插入载体pll-TPP1-si1和pll-TPP1-si2中;pll-TPP1-si1和pll-TPP1-si2均能明显抑制TPP1的表达,其中pll-TPP1-si1的抑制效果最好;pll-TPP1-si1病毒感染高表达外源Pot1蛋白的Hep G2细胞,经免疫荧光鉴定能够有效抑制内源TPP1的表达,使Pot1不再端粒定位。结论:构建的抑制TPP1基因的sh RNA干扰载体能有效抑制TPP1的表达,为端粒蛋白TPP1功能的研究奠定了实验基础。

摘要：败血梭状芽胞杆菌是动物恶性水肿和人类气性坏疽的主要病原体,它可产生4种主要毒素,常规诊断用补体结合(CFT)、免疫荧光(IF)和ELISA,但检验手段繁琐而费时,通常要花几天时间。日本学者Takeuchi建立了PCR检测梭状芽胞杆菌的快速诊断技术,可测其溶血素基因(α毒素)。选10株杆菌的270bpDNA片段作为扩增模板,引物按溶血素基因序列设计,寡核苷酸人工合成,序列为5′—AATTCAGTGTGCGGCAGTAG—3′(位于611—630)